$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
فئة < p = "jove_title" >
1. جراحة وتركيب حلقة الجمجمة
< p class = "jove_content" >
ملاحظة: يتكون الدعم الكامل لتثبيت الماوس من 4 قطع ، وكتلة ولوحة ، وحلقة لتثبيت رأس الماوس ، وبرغي لتثبيت الحلقة على الكتلة (
الشكل 1 أ). تم الحصول على جميع عناصر الدعم من i.materialise.com عن طريق الطباعة ثلاثية الأبعاد. اللوحة مصنوعة من بوليمر أكريلونيتريل بوتادين ستايرين (ABS) ، وكتلة وبرغي من الفولاذ المقاوم للصدأ ، وحلقة من الفولاذ المقاوم للصدأ عالي الجودة (الفولاذ المقاوم للصدأ عالي التفاصيل) (انظر
الشكل 2 للحصول على الأبعاد
والمواد لملفات الطباعة ثلاثية الأبعاد). يتم تثبيت الكتلة بشكل دائم على الدعم ، إما مشدود أو لصق. بمجرد تثبيت الحلقة على جمجمة الماوس ، يجب تثبيتها على حامل الكتلة (
الشكل 1 أ).
- بلل الشعر على فروة الرأس بمنشفة ورقية مبللة بنسبة 70٪ إيثانول للتطهير. قم بإزالة كل الشعر المتساقط بمنشفة ورقية مبللة.
ملاحظه: للراحة ، يمكن حلق فروة الرأس قبل الجراحة.
- شق فروة الرأس عن طريق تشكيل حرف T في خط الوسط حتى 1 سم وبين الأذنين لفضح الكالفاريوم باستخدام مقص وملاقط دقيقة معقمة.
ملاحظه: سيتم وضع الحلقة لتتداخل مع العظام الأمامية والجدارية (الشكل 1 ب).
- استخدم ملاقط معقمة لكشف الجمجمة. قم بإزالة السمحاق بعناية بالمقص والملاقط. استخدم قطعة قطن معقمة مبللة بمحلول ملحي فسيولوجي لإزالة كل السمحاق وأي حطام أو شعر ، مما قد يغير التصوير.
ملاحظه: للحد من التفاعلات الالتهابية ، احرص على عدم إتلاف العظام.
- قم بإزالة أي آثار دم عن طريق الشطف بالمحلول الملحي ، وجفف العظم بسرعة باستخدام قطعة قطن جافة. ضع جل الغراء على الحلقة ، وضعه على العظم المكشوف ، واحتفظ به لبضع ثوان حتى يتم ربط الحلقة بإحكام بالجمجمة.
ملاحظه: يجب ألا يدخل أي غراء إلى مجال المراقبة لأنه قد يؤدي إلى التألق الذاتي غير المرغوب فيه.
- بلل الجمجمة برفق بقطعة قطن مغمورة في محلول ملحي فسيولوجي.
- قم بإعداد معجون الأسنان من السيليكون عن طريق خلط المكونات الزرقاء والصفراء 1: 1 بعناية. ضع معجون الأسنان في جميع أنحاء الحلقة لإغلاقها لمنع التسرب أثناء التصوير. قم بإزالة أي معجون أسنان أو غراء قد يكون قد دخل الحلبة بعناية.
- املأ الحلقة بالمحلول الملحي وتحقق من وجود تسرب. < / >
ملاحظه: يعمل المحلول الملحي كوسيط غمر لهدف المجهر. قد يكون النزيف أكثر أهمية عند استخدام الفئران التي تعاني من عيوب مرتبطة بالإرقاء. من الضروري منع الدم من دخول الحلبة لأنه قد يؤدي إلى تشويش المزيد من التصوير.
- ضع الماوس على الدعامة وقم بلف الحلقة على حامل الكتلة (الشكل 1 ج). ضع كمادات مطوية تحت رأس لرفع الرأس ومنع انفصال الحلقة عن الجمجمة.
ملاحظه: يتم تثبيت الرأس مباشرة بحيث يمنع حركات الصورة بسبب التنفس.
- ضع مجموعة الدعم والفأرة في غرفة المجهر الساخنة (الشكل 1 د).
ملاحظة: احرص على عدم إخراج القسطرة التي تم إدخالها في أي وقت.