مقالة منهجية

نموذج توليد عدوى المسالك البولية: تقنية لإدارة البكتيريا المسببة للمسالك البولية في الفئران لتطوير نموذج عدوى المسالك البولية

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Luyts، N. et al. ، المتابعة الطولية لالتهابات المسالك البولية وعلاجها في الفئران باستخدام التصوير الحيوي. J. Vis. Exp. (2021).

في هذا الفيديو ، نصف تقنية الإدارة داخل المثانة للبكتيريا المسببة للبول لتوليد نموذج عدوى المسالك البولية في الفئران. يمكن استخدام هذا النموذج لفهم انتشار العدوى البكتيرية المسببة للبول داخل الجهاز البولي والآليات التي تحدد قابلية الإصابة بالتهاب المسالك البولية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. تلقيح

  1. تحضير
    1. اختر سلالة (سلالات) الفأر المطلوبة اعتمادا على سؤال البحث وتوافر خطوط الضربة القاضية والتفاصيل التجريبية والاختلافات في قابلية الإصابة بالتهاب المسالك البولية. ضع في اعتبارك أن القسطرة عبر الإحليل أسهل في إناث الفئران. لا تستخدم التي يقل عمرها عن 8 أسابيع ، لأنها غير ناضجة من الناحية المناعية. هنا ، تم استخدام أنثى الفئران C57BL / 6J البالغة من العمر 12 أسبوعا.
    2. اطلب مسبقا ودعها تتأقلم ، من الناحية المثالية لمدة 7 أيام. تجميع في أقفاص جيدة التهوية بشكل فردي ، في ظل ظروف الإضاءة / الظلام القياسية لمدة 12 ساعة.
    3. حلق منطقة البطن للحيوانات للحد من فقدان الإشارة. لا تستخدم كريم إزالة الشعر لأنه يمكن أن يحرق جلد بسرعة. كبح جماح عن طريق إمساك الأطراف القفشية والخلفية بإحكام باليد غير المهيمنة أثناء الحلاقة باليد المهيمنة. بدلا من ذلك ، احلق تحت تخدير الأيزوفلوران.
      ملاحظه: تم حلق قبل يومين من التصوير ، مع الأخذ في الاعتبار أن ستعتني بالمنطقة المحلوقة بشكل أكبر.
    4. توفير الماء والغذاء القياسي طوال التجربة. ومع ذلك ، حرم من الماء قبل ساعتين من التقطير لتقليل حجم المثانة أثناء التقطير.
    5. قم بتركيب طرف قسطرة وعائية معقمة 24 جم على حقنة سعة 100 ميكرولتر واملأ المحقنة بمحلول بكتيري.
  2. تقطير
    1. ضع في غرفة الحث وقم بتخديرها باستخدام استنشاق الأيزوفلوران مع الأكسجين النقي كغاز ناقل (الحث بنسبة 3٪ والصيانة بنسبة 1.5٪).
    2. ضع واحدا على سطح عمل في وضع الاستلقاء وحافظ على تخدير الأيزوفلوران المستقر باستخدام مخروط الأنف أثناء التقطير. ضع مرهم العين.
    3. طرد البول المتبقي عن طريق تطبيق ضغط لطيف والقيام بحركات دائرية على المنطقة فوق العانة. نظف أسفل البطن بنسبة 70٪ من الإيثانول قبل التقطير.
    4. قم بتليين طرف القسطرة بمحلول ملحي عادي. ضع إصبع السبابة لليد غير المهيمنة على البطن وادفعها برفق لأعلى. ابدأ قسطرة مجرى البول بزاوية 90 درجة (عموديا) وبمجرد مواجهة المقاومة ، قم بإمالتها أفقيا قبل إدخالها أكثر (0.5 سم).
      ملاحظه: لا تدفع القسطرة بقوة أبدا ، لأن ذلك سيسبب ضررا لمجرى البول. يمكن أن تكون حركات الدوران اللطيفة مفيدة في إدخال القسطرة. من ناحية أخرى ، يشير نقص المقاومة عادة إلى الإدخال الخاطئ في المهبل.
    5. قم بإجراء تقطير بطيء (5 ميكرولتر / ثانية) بمقدار 50 ميكرولتر من اللقاح البكتيري (2 × 107 CFU).
      ملاحظه: قد يتسبب الأحجام العالية أو التقطير الأسرع في حدوث ارتجاع إلى الكلى. أثناء ممارسة هذه التقنية ، يمكن استخدام الحبر الأزرق لتقييم الارتجاع.
    6. بعد التقطير ، احتفظ بالحقنة والقسطرة في مكانهما لبضع ثوان أخرى ثم تراجع ببطء لمنع التسرب. سجل أي مخالفات مثل كمية عالية من التسرب أو الصماخ الدموي واستبعد ، إذا لزم الأمر.
    7. ضع في وضع ضعيف عند مخروط الأنف في غرفة التصوير وكرر الخطوات السابقة 1.1.1-1.1.6 لجميع المتبقية. استخدم قسطرة واحدة لكل مجموعة تجريبية. تأكد من استمرار التخدير وتقليل الوقت بين الأول والأخير.
    8. إذا لزم الأمر، يتم تطبيق المضادات الحيوية أو الأدوية التجريبية، قبل التصوير أو بعده (الخطوة 3). على سبيل المثال ، لإعطاء الإنروفلوكساسين ، أضف 40 ميكرولتر من محلول الإنروفلوكساسين (100 مجم / مل) إلى 3.96 مل من المحلول الملحي الفسيولوجي للحصول على تخفيف 1/100. حقن 100 ميكرولتر / 10 جم تحت الجلد في الساعة 9 صباحا و 5 مساء لإعطاء 10 مجم / كجم من الإنروفلوكساسين مرتين يوميا لمدة 3 أيام.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات إسكولاب داعش أسكولاب جي تي 421 ماكينة تشذيب الشعر ، مع غطاء GT608 مبخر التخدير جهاز هارفارد المحدود غير متاح https://www.harvardapparatus.com/ harvard-apparatus-anestheticvaporizers.html BD Insyte Autoguard 24 GA دينار بحريني 382912 القسطرة الوعائية الصفراء ، استخدم طرفا بلاستيكيا معقما للتقطير الفئران C57Bl / 6J جانفيير غير متاح محلول ملحي ذو فوسفات من Dulbecco ، جيبكو ثيرموفيشر العلمي الرقم المرجعي 14040-083 الإيثانول 70٪ متنيت 5 لتر VWR الدولية 85825360 حقنة هاميلتون GASTIGHT ، قفل لوير PTFE ، 100 ميكرولتر سيجما ألدريتش هاتف: 26203 لضمان تقطير بكتيري بطيء يبلغ 50 ميكرولتر Iso-Vet 1000 مجم / جم دكرا للمنتجات البيطرية غير متاح إيزوفلوران

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة