$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >
1. تحضير المواد والأدوات
- قم بتوصيل البطانية الحرارية للحفاظ على درجة حرارة منطقة العملية ودرجة حرارة جسم الفأر أثناء التخدير عند 37 درجة مئوية.
- مقص الأوتوكلاف والملقط ، قم بإعداد محلول الإيثانول بنسبة 70٪ والحفاظ على مرهم العين dexpanthenol المتاح ، وعدة قطع من القطن ، وخياطة البوليستر المضفر المطلية 5-0 جاهزة للاستخدام. تحضير حقنة 1 مل بمحلول ملحي 0.9٪ (بدون إبرة) للحفاظ على رطوبة موقع شق. تحضير غاز التخدير (100٪ O2 + isoflurane).
- قم بإعداد حامل لمسبار دوبلر بالليزر عن طريق قطع طرف طرف ماصة 10 ميكرولتر (طول 3-5 مم).|< / >
ملاحظة: يتم تعقيم جميع الأدوات باستخدام معقم الخرز الساخن. يتم أيضا تطهير الأسطح قبل الجراحة وبعدها برذاذ مطهر ميكروبي. قبل الجراحة ، يتم تطهير المناطق المحيطة برأس وصدر الفئران برذاذ تطهير الجروح.
< p class = "jove_title" >
2.
تحضير دوبلر الليزر
- حقن التسكين للفأر قبل 30 دقيقة من الجراحة (4 ملغ/كغ من الكاربروفين و0.1 ملغ/كغ من البوبرينورفين، داخل الصفاق).
- قم بتخدير الفأر عن طريق وضعه في غرفة الحث بمعدل تدفق أيزوفلوران بنسبة 4٪ حتى توقف حركة الجسم التلقائية والاهتزازات.
- ضع الفأر في وضع الانبطاح في منطقة العملية مع أنفه في قناع التخدير. حافظ على تركيز الأيزوفلوران عند 4٪ لمدة دقيقة أخرى ، ثم قلل منه واحتفظ به عند 2٪.
- اضبط وسادة التسخين المرتبطة التي يتم التحكم فيها عن طريق التغذية المرتدة للحفاظ على درجة حرارة جسم الفأر عند 37 درجة مئوية ، وأدخل مسبار المستقيم برفق لمراقبة درجة الحرارة طوال العمليات الجراحية.
- ضعي مرهم العين ديكسبانثينول على كلتا العينين.
- تطهير الجلد والشعر المحيط بالعين اليسرى والأذن اليسرى بنسبة 70٪ من الإيثانول.
- قطع فروة الرأس بين الأذن اليسرى والعين (بطول 1 سم) لكشف عظم الجمجمة.
- قم بقص العضلة الصدغية وتقاعدها لتصور MCA أسفل الجمجمة.
- قم بتثبيت الجزء الخارجي من الطرف بالغراء الذي يحمل مسبار / ألياف دوبلر الليزر أعلى MCA الأيسر بالغراء. ثم قم بلصق الجلد لإغلاق الجرح حول حامل الطرف. ضع 2-3 قطرات من الغراء المقسى لتسريع العملية. تأكد من عدم لصق ألياف دوبلر الليزر ويمكن إزالتها بسهولة من حامل الطرف في أي وقت.
< p class = "jove_title" >
3. نموذج MCAo العابر (انسداد)
- أدر الماوس إلى وضع ضعيف. ضع الخطم في مخروط التخدير وقم بإصلاح الكفوف بشريط لاصق.
- تطهير الجلد والشعر المحيط بالصدر وعمل شق خط الوسط بطول 2 سم في الرقبة.
- استخدم الملقط لسحب الجلد والغدد تحت الفك السفلي عن بعضهما البعض. استخدم المباعدات لتثبيت العضلة القصية ، وفضح المجال الجراحي والعثور على الشريان السباتي المشترك الأيسر (CCA). تشريح CCA خال من النسيج الضام والأعصاب المحيطة (دون الإضرار بالعصب المبهم) وإجراء ربط عابر قبل التشعب.
- قم بتشريح الشريان السباتي الخارجي (ECA) واربط عقدة دائمة في الجزء المرئي الأبعد. ضع خياطة أخرى تحت ECA ، بالقرب من التشعب ، وقم بإعداد عقدة فضفاضة لاستخدامها لاحقا.
- قم بتشريح الشريان السباتي الداخلي (ICA) وضع مشبكا للأوعية الدموية الدقيقة عليه ، 5 مم فوق التشعب. تأكد من عدم تلف العصب المبهم.
- اقطع ثقبا صغيرا في ECA بين الأربطة الضيقة والفضفاضة ؛ احرص على عدم قطع ECA بالكامل.
- أدخل الفتيل ودفعه نحو CCA. شد الربط السائب في ECA حول التجويف لتأمين الفتيل في هذا الوضع قريبا وتجنب النزيف عند إزالة مشبك الأوعية الدموية الدقيقة.
- قم بإزالة مشبك الأوعية الدموية الدقيقة وأدخل الفتيل من خلال ICA حتى يتم الوصول إلى أصل MCA عن طريق اكتشاف انخفاض حاد (>80٪) في تدفق الدم الدماغي كما تم قياسه بواسطة دوبلر الليزر. قم بإصلاح الفتيل في هذا الموضع عن طريق تشديد العقدة حول ECA.
ملاحظه: عندما يذهب الفتيل نحو الاتجاه المناسب ، فإنه يتقدم بسلاسة ، ولا ينبغي ملاحظة أي مقاومة.
- سجل قيم دوبلر بالليزر قبل وبعد إدخال الفتيل.
- قم بإزالة الضام ونقل العضلة القصية والغدد تحت الفك السفلي قبل خياطة الجرح. قم بإزالة مسبار دوبلر بالليزر وضع في غرفة الاسترداد عند 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة (حتى إزالة الفتيل).