$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >1. تنظير القولون وتحريض الجرح
قم - بتجميع مكونات المنظار مسبقا عن طريق إدخال المنظار الداخلي ذو التجويف الصلب مقاس 1.9 مم في الغمد (الشكل 1A-B). قم بتوصيل مضخة الهواء (لتوفير نفخ القولون) باستخدام الأنبوب المقدم ، بصمام الغاز على الجانب الأيسر من الغلاف بجوار قناة العمل (الشكل 1C).
ملاحظه: على الرغم من أن العدسة الموضحة هنا هي 0 درجة ، إلا أنه يمكن أيضا استخدام عدسة 30 درجة لهذا الغرض.
- تأكد من أن قناة العمل في الوضع المفتوح وأدخل ملقط خزعة 3 Fr عبر قناة العمل وقم بتقديمها حتى نهاية الغمد (مع التأكد من عدم خروجها من الغمد) (الشكل 1C). قم بتوصيل المنظار الداخلي المجمع بمصدر الضوء وجهاز تصوير الفيديو وفقا لتعليمات الشركة المصنعة.
- تخدير الفأر بنسبة 5٪ من الأيزوفلوران بالأكسجين في غرفة الحث. ثم انقل الماوس إلى منصة التدريج بالمنظار التي تحتوي على نظام تسخين (لمنع انخفاض حرارة الجسم) على جانبه البطني وحافظ عليه تحت التخدير باستخدام مخروط أنف يحتوي على 2٪ إيزوفلوران مع الأكسجين. أضف مرهما بيطري إلى العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير. تأكد من تخدير الماوس بالكامل عن طريق الضغط برفق على القدم الخلفية لاختبار رد الفعل.
ملاحظه: يمكن استخدام أي سلالة أو أي من جنسي الفئران مع هذه التقنية ؛ ومع ذلك ، يفضل أن يكون عمر الفئران 8 أسابيع على الأقل ، لذا فهي كبيرة بما يكفي لهذا الإجراء.
- أضف مرهما بيطري إلى العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير.
- تأكد من تخدير الماوس بالكامل عن طريق الضغط برفق على القدم الخلفية لاختبار رد الفعل.
- املأ حقنة سعة 3 مل بإبرة تزقيم الفئران المرفقة بمحلول ملحي مخزن بالفوسفات بدرجة حرارة الغرفة (PBS). أدخل إبرة حوالي 1 سم في فتحة الشرج بالماوس وقم بغرس PBS برفق لتنظيف المواد البرازية. يجب أن تخرج العديد من الكريات البرازية من الماوس مع PBS الذي تم غرسه.
ملاحظه: يمكن أن يؤدي تقطير حجم مفرط من PBS إلى تكوين رغوة في التجويف مما قد يحجب رؤية التجويف.
- أدخل المنظار الداخلي المجمع 0.5 سم في فتحة الشرج من الماوس. قم بدفع ملقط الخزعة إلى تجويف المستقيم حتى يتجاوز "الفكين" الكاملان (بما في ذلك المفصلة) من نهاية الغمد (كما لوحظ على شاشة الفيديو). أدر الملقط 90 درجة بحيث يفتح الفكين في اتجاه الشرق والغرب.
- للخزعة ، افتح الملقط وتقدم حوالي 1 سم ، وأغلق الملقط وبحركة واحدة سلسة اسحب الملقط بسرعة مع تركه مغلقا.
- تجنب نفخ القولون بالكامل عند إجراء الخزعة. لذلك ، اترك الجانب الأيمن من صمام الغاز مفتوحا خلال هذه الخطوة ؛ على الرغم من أنه تجدر الإشارة إلى أنه عند فتح الملقط ، هناك خطر إتلاف الغشاء المخاطي عندما يكون القولون في هذا الوضع.
