تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< ص الفئة = "jove_title" >
1. معدات وإعداد الجهاز.
- ترتيب المعدات:
- قم بإعداد طاولة عمليات بحجم حسب وزن الأرنب.
- قم بتركيب غطاء الصدر الاصطناعي على العمود الفولاذي مع وجود حجرة زجاجية تحتها وجهاز التنفس الصناعي بمضخة أسطوانية على الجانبين.
- تأكد من أن الغطاء يميل بسهولة إلى جعل قنية القصبة الهوائية تتماشى مع القصبة الهوائية للسماح بتوصيل أسرع.
- الصدر الاصطناعي:
ملاحظة: إنه جزء أساسي من النظام. يتكون من غرفة زجاجية مغلفة بالماء مختومة بغطاء خاص. يعمل الغطاء كحامل للأعضاء مع وصلات لقنية القصبة الهوائية والأوعية المضمنة فيه.
- قم بإعداد نفاثة فنتوري تعمل بالهواء المضغوط لتوليد الضغط السلبي داخل الصدر الاصطناعي.
ملاحظه: تسمح وحدة التحكم في التهوية (VCM) بإجراء تعديلات منفصلة لضغوط الشهيق والزفير النهائي بالإضافة إلى معدل التنفس ونسبة مدة الشهيق إلى مدة الدورة الإجمالية.
- جهاز:
- تأكد من أن الجهاز الذي يعمل بشكل طبيعي يتكون من عمود فولاذي رئيسي مثبت على لوحة قاعدة تحمل الصدر الاصطناعي ، مع وجود مقياس الصدر المضغوط ومحول الوزن فوقه وخلف ملف التسخين المسبق مع مصيدة فقاعات.
- قم بتوصيل محول ضغط تفاضلي بمقياس الترواء وآخر بضغط الغرفة. ضع زوجين مختلفين من محولات الضغط خلف الصدر لقياس التروية والضغوط الوريدية.
- قم بتوصيل مخزون التغيير أسفل الأكسجين بقطب كهربائي مستوي ونظام التهوية بجانب الجهاز.
< ص الفئة = "jove_title" >
2. الاستخراج الجراحي للكتلة القلبية الرئوية.
- تخدير:
- استخدم مزيجا من مهدئ (زيلازين) وباربيتورات (بنتوباربيتال).
ملاحظه: يمكن استخدام كوكتيلات مخدرة مختلفة دون أي تأثير على النتائج التجريبية.
- أولا ، تخدير الأرانب النيوزيلندية السليمة بحقنة عضلية واحدة من زيلازين هيدروكلوريد (3-5 مجم / كجم). تأكد من أن الأرانب تظل هادئة ومسترخية للسماح بمزيد من التلاعب بعد بضع دقائق من الحقن.
- بعد التخدير ، استخدم أوردة الأذن الهامشية (الجانبية) كوسيلة لتخدير الأرانب بحقن الصوديوم البنتوباربيتال في الوريد (28 مجم / كجم).
- رصد:
- لتجنب عدم كفاية التخدير أو الاكتئاب المفرط لوظائف القلب والجهاز التنفسي ، راقب المعلمات التالية. لتقييم عمق التخدير ، قم بإجراء اختبار قرصة إصبع القدم.
- تأكد من أن الغشاء المخاطي وردي. تشير الظلال الزرقاء أو الرمادية إلى نقص الأكسجة.
- تأكد من أن معدل ضربات القلب يتراوح بين 120-135 نبضة / دقيقة ، وأن درجة حرارة الجسم لا تنخفض عن 36.5 درجة مئوية.
- وضع:
- احلق جذع الأرنب وضع على طاولة العمليات في وضع ضعيف. ضع نظام التهوية بالقرب من الطاولة ، خلف رأس الأرنب ، للسماح بتوصيل القنيات بسرعة بعد بضع القصبة الهوائية لتجنب تلف القصبة الهوائية.
- شق وبضع القصبة الهوائية:
- تشريح الجلد بشق خط متوسط بطني من 3-5 سم من الحجاب الحاجز حتى الرقبة.
- باستخدام مقص التشغيل ، قم بقطع الجزء الأمامي 2/3 من القصبة الهوائية بين حلقتين من الغضروف لإدخال قنية القصبة الهوائية من خلال الغشاء الليفي للقصبة الهوائية.
- أدخل 5 مم (القطر الخارجي ؛ OD) قنية القصبة الهوائية من خلال الغشاء الليفي للقصبة الهوائية واستخدام خياطة حريرية 4-0 لإصلاحها بعناية.
- ضع إما ملقطا أو ملاقط أسفل القصبة الهوائية للتأكد من أن القنية لا تنحني على القصبة الهوائية.
- تهوية الضغط الإيجابي:
- طالما بقيت الرئتان خارج الصدر الاصطناعي ، استخدم مضخة تنفس صغيرة لتهوية الضغط الإيجابي لتجنب انهيار الرئة أثناء الجراحة.
- ابدأ التهوية من خلال قنية القصبة الهوائية المتصلة بمضخة التنفس بسرعة بعد بضع القصبة الهوائية وقبل فتح الصدر.
- اضبط حجم المد والجزر على 10 مل / كجم
ملاحظه: اعتمادا على إعداد التجربة ونموذج الصدر الاصطناعي ، قم بتوفير تهوية بالضغط الإيجابي إما بواسطة نفس مضخة التهوية المستخدمة لتوفير الضغط السلبي أو مضخة مختلفة ، مما يمنح إعادة التنبؤ السريعة.
- بضع الصدر والاستئصال:
- للوصول إلى التجويف الصدري ، استخدم مشرطا أو مقصا لفتح جدار الصدر وإجراء بضع القص الإنسي حتى الثلث العلوي من الصدر.
- امسك نصفي الصدر مفتوحين بواسطة اثنين من الضاعات. عادة ما تحيط العديد من اللوحات الرئوية بالقلب.
قم - بتوطين الوريد الأجوف العلوي والسفلي وإحالته بالخيوط.
- قبل إخراج ، حدد البطين الأيمن وحقن 1000 UI / كجم من الهيبارين.
- مباشرة بعد الحقن ، قم بربط الوريد الأجوف العلوي والسفلي بالخيط الحلقي مسبقا وقم بإجراء الاستئصال.
- حصاد القلب والرئة:
- حصاد الكتلة القلبية الرئوية بلطف وبسرعة. استخدم التشريح الرقمي المباشر أو المقص الزنبركي لفصل النسيج الضام لإزالة الرئتين من الصدر.
- تشريح الأوعية الدموية في المنطقة ، وكذلك المريء.
- اقطع القص القصي لتمديد بضع القص الإنسي باتجاه قنية القصبة الهوائية ، مع تحرير القصبة الهوائية على كلا الجانبين من الأنسجة المتصلة.
- الآن ، قم باستئصال القصبة الهوائية فوق قنية القصبة الهوائية. اسحب القنية برفق في محور قحفي ذيلية حيث يتم استئصال التثبيت الظهري للقصبة الهوائية والرئتين.