يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

توصيل جزيء التتبع في Cisterna Magna: طريقة لتوصيل جزيئات التتبع الفلورية عبر التقنية المباشرة لصهريج ماجنا في الخنزير

3.1K مشاهدات

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: Bèchet ، N. B. ، et al. زرع القنية المباشر في صهريج الصهريج للخنازير. J. Vis. Exp. (2021).

يصف هذا الفيديو بروتوكول توصيل جزيء التتبع عبر القنية المباشرة لصهريج ماجنا في دماغ الخنزير. تساعد هذه الطريقة في تصور توزيع السائل النخاعي في الجهاز الغليمفاوي.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

فئة < ص = "jove_title" >1. القنية والحقن

ملاحظة: تتطلب هذه الخطوة شخصين على الأقل ويتم تنفيذها مع رفع رأس وثني الرقبة.

  1. ابدأ بخنزير مخدر ، تم تشغيله مسبقا باستخدام صهريج يمكن الوصول إليه جراحيا.
  2. تأكد من أن شخصا ما يرفع ويثني رأس وعنق بينما يتحسس الآخر الصهريج الماجنا مع ملاحظة موقعه التشريحي.
  3. أدخل قنية 22 جم ببطء وحذر من خلال الجافية وفي صهريج ماجنا بزاوية مائلة للمحور الطولي.
    ملاحظه: لا تدخل القنية بعمق شديد ، فقد يتسبب ذلك في تلف الدماغ. إن معرفة مدى إدخال القنية يأتي مع الخبرة في فهم شعور القنية لاختراق الجافة. بشكل أساسي ، تماما كما تم ثقب الجافية ، تكون القنية عميقة بما يكفي لحقن التتبع الناجح. يبلغ هذا العمق حوالي 3-5 مم ولكنه سيختلف بناء على حجم أو عمره. يجب أن يكون القنية الناجحة واضحة على الفور من خلال تصور السائل الدماغي النخاعي الواضح والنابض الذي يصعد القنية. للحصول على أفضل نتيجة, فمن المستحسن لممارسة العديد من قنية مسبقا في القتل رحيم للحصول على فهم المرء من ثقب الجافية.
  4. اسحب الإبرة من القنية وضع غطاء على القفل.
  5. أولا ، ضع الغراء الفائق ومسرع حيث تدخل القنية إلى الأنسجة ، متبوعا بتطبيق الأسمنت الأسنان. انتظر لمدة 5 دقائق حتى يتماسك الأسمنت.
  6. قم بإزالة الغطاء بعناية من القنية وقم بتوصيل الطرف الذكري لصنبور الخط الوريدي بامتداد 10 سم ، مع التتبع ، بالقنية.
  7. قم
  8. بحقن جهاز التتبع ببطء يدويا أو باستخدام مضخة التسريب الدقيق بمعدل 100 ميكرولتر / دقيقة. قم بإزالة صنبور الخط الرابع المكون من 3 طرق بامتداد 10 سم واستبدله بالغطاء. يجب أن يكون جهاز التتبع مرئيا الآن ينبض عند قاعدة القنية.
    ملاحظه: في حالة الحقن باليد ، افعل ذلك حتى يظل جهاز التتبع مرئيا في عمود القنية ، على ارتفاع 1-2 مم تقريبا حيث يغطي الأسمنت السني العمود.
  9. بعد الحقن، ضع أكياس الرمل تحت الرقبة للحفاظ على بعض الانثناء. يمكن بعد ذلك تحرير الرأس ، ويترك في وضع الانبطاح للراحة.
  10. حرر الضاعرات التي تحتفظ بها ذاتية وضع العضلات كما كانت من قبل. اجمع الجلد معا فوق العضلات باستخدام مشابك المنشفة الجراحية.
  11. قم بتغطية مشابك المنشفة والشق بشاش ثم بطانية للحد من فقدان الحرارة.
  12. اسمح للمتتبع بالدوران للوقت المطلوب قبل القتل الرحيم للحيوان عن طريق حقن البنتوباربيتال (140 مجم / كجم). تأكد من القتل الرحيم عن طريق عدم وجود أصوات القلب عند التسمع باستخدام سماعة الطبيب.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات إبرة 18 جرام ميديق حقنة 1 مل فيشرسيكي 15849152 قنية 20 جرام ميديق غير أ قنية 22 جرام ميديق غير أ ألبومين مصل الأبقار Alexa-Fluor 647 Conrupgate ثيرموفيشر أ34785 2 قارورة (10 مجم) كلوريدالهواء 2 سيغمالدريتش سي 1016 الاسمنت للأسنان أنثوس 7508 الجلوكوز سيغمالدريتش G8270 مسرع CA Insta-Set بي إس آي إنك بي إس آي-151 صنبور خط IV ، 3 طرق مع تمديد 10 سم ببراون غير أ كيه سي إل سيغمالدريتش ص 9333 قلم تحديد غير أ غير أ مغنكلوريد2 سيغمالدريتش M8266 ماء MilliQ غير أ غير أ كلوريد الصوديوم سيغمالدريتش إس 7653 NaH2PO4 سيغمالدريتش إس 8282 NaHCO3 سيغمالدريتش الطراز S5761 ملح ميديق غير أ مباعدات ذاتية الاحتفاظ غير أ غير أ الغراء الفائق غير أ غير أ مقص منحني جراحي غير أ غير أ المشابك المنشفة الجراحية غير أ غير أ

الوسوم