$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >1. تجربة التحفيز الضوئي
- ضع مصدر ضوء بعاكس دائري 30 سم أمام الأرنب على مستوى العين ، مع ضبط شدة الفلاش على الحد الأقصى (16 شمعة). يشار إلى مصدر الضوء بنقطة بيضاء في الشكل 1E.
ملاحظه: يجب استخدام غرفة ذات إضاءة خافتة لاستنباط الاستجابة الحساسة للضوء.
- نظرا لأن عيون الأرنب على جانب الرأس بدلا من مقدمة رأسه (كما هو الحال في البشر) ، ضع مرآتين على جانبي الأرنب ، و 1 خلف الأرنب حتى يدخل الضوء إلى عيون الأرنب.
ملاحظه: تخلق المرآة المسطحة التي يبلغ ارتفاعها ≥ 20 سم ، بطول 120 سم ≥ حاوية مثلثة حول الأرنب لضمان دخول الضوء الوامض إلى عيون الأرنب ، كما هو موضح في الشكل 1E.
- قم بتوصيل مصدر الضوء بوحدة تحكم ذات معدل وشدة ومدة قابلة للتعديل.
- سجل الفيديو باستخدام كاميرا ذات ضوء أحمر وإمكانيات تسجيل الأشعة تحت الحمراء.
- قم بتعريض الأرانب لكل تردد لمدة 30 ثانية وأعينهم مفتوحة ثم 30 ثانية أخرى بقناع جراحي يغطي وجوههم لمحاكاة أو التسبب في إغلاق العين عند كل تردد.
ملاحظه: أظهرت الدراسات السابقة أن إغلاق العين هو المناورة الأكثر استفزازا لإثارة الحساسية للضوء للنوبات. بالإضافة إلى ذلك ، يظهر 10٪ من المرضى الذين يعانون من حساسية للضوء علامات تخطيط كهربية الدماغ فقط أثناء إغلاق أعينهم. يمكن تحديد النوبة سريريا من خلال ملاحظة وجود هزات رمع عضلي في الرأس والجسم بالكامل ، أو كلونوس ، أو حالة منشطة. يتم تحليل تسجيل مخطط كهربية الدماغ بشكل أكثر شمولا للارتباط الكهربائي للدماغ (على سبيل المثال ، المسامير ، والمسامير المتعددة ، والتفريغات الإيقاعية) مع المظاهر الحركية للتشخيص النهائي لنشاط النوبات. يجب مراجعة الحركات التي يتم فيها حجب مخطط كهربية الدماغ بواسطة قطعة أثرية عضلية أو موجات من الصرع غير المحدد من قبل أخصائي الصرع للتأكيد.
- قم بزيادة تردد المحفز الضوئي من 1 هرتز إلى 25 هرتز بزيادات قدرها 2 هرتز. ثم قم بتنفيذ نفس بروتوكول التحفيز الضوئي ، ولكن هذه المرة قلل التردد من 60 هرتز إلى 25 هرتز بزيادات قدرها 5 هرتز.
ملاحظه: إذا أصيب الأرنب بنوبة صرع ، فيجب إيقاف التجربة. استمر في مراقبة الأرنب لمدة 30 دقيقة. ثم أعد الأرنب إلى غرفة السكن وراقب كل 1 ساعة لمدة 3 ساعات للشفاء التام. ومع ذلك ، إذا أدى التحفيز الضوئي إلى استجابة ضوئية ، تخطي ما تبقى من الترددات الصاعدة ، وتبدأ السلسلة مرة أخرى عن طريق النزول من 60 هرتز حتى تحدث استجابة ضوئية أخرى. سيسمح ذلك بتحديد عتبات التحفيز الضوئي العلوية والسفلية. لا داعي للتأخير لأن الاستجابة الانتيابية الضوئية ستتوقف بعد إيقاف التحفيز الضوئي. إذا لم يكن من الواضح ما إذا كانت استجابة انيابية ضوئية قد حدثت ، يتم تكرار التردد بعد تأخير 10 ثوان.
- بعد اكتمال التجربة ، قم بإزالة خيوط مخطط كهربية الدماغ وتخطيط القلب من الأرنب وإعادتها إلى قفص منزلها للرعاية الروتينية من قبل موظفي التربية.