المراقبة متعددة الأنظمة لتشوهات الصرع في الأرانب: طريقة لتسجيل مخطط كهربية الدماغ بالفيديو وتخطيط القلب وتصوير الكبنوغرافيا وقياس التأكسج أثناء النوبات المستحثة

الملخص

المصدر: Bosinski، C.، et al. المراقبة متعددة الأنظمة لتحديد النوبات وعدم انتظام ضربات القلب وانقطاع النفس في الأرانب المقيدة الواعي. J. Vis. Exp. (2021).

في هذا الفيديو ، نعرض طريقة مراقبة متعددة الأنظمة لتقييم التشوهات العصبية والقلب والجهاز التنفسي أثناء الحقن الوريدي لدواء مسبب للنوبات. تساعد المراقبة المتزامنة لمعلمات مخطط كهربية الدماغ بالفيديو وتخطيط القلب وقياس التأكسج وتصوير الكابنوغرافيا على فهم التغيرات الفسيولوجية في الوقت الفعلي المرتبطة بنوبات الصرع.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_content" >1. لتمكين الأرانب من التأقلم في القيود ولكي يؤكد المحقق بشكل موضوعي استقرار معدلات القلب والجهاز التنفسي ، قم بتجهيز جميع الأرانب بأجهزة استشعار القلب والجهاز التنفسي والخلايا العصبية وقم بإجراء مراقبة مستمرة بالفيديو لمدة ساعة واحدة > ، 1-3 مرات لكل.

< p class = "jove_title" >2. تجربة الدواء عن طريق الوريد (Pentylenetetrazol ، PTZ)

1. لتصور وريد الأذن الهامشي ، احلق السطح الخلفي لأذن الأرنب. استخدم مناديل إيثانول بنسبة 70٪ لتطهير الموقع وتوسيع وريد الأذن الهامشي. يشار إلى ذلك من خلال الشكل البيضاوي الأسود المتقطع في الشكل 1F.
2. في هذه المرحلة ، اطلب من أحد المجرب تغطية وجه الأرنب بيده لتقليل ضغط الإجراء على الأرنب. يقوم مجرب ثان بتقشير وريد الأذن الهامشي بعناية باستخدام قسطرة وعائية معقمة 25 جرام.
3. بمجرد دخول القسطرة إلى الوريد، ضع سدادة حقن معقمة في نهاية القسطرة حتى تتمكن الإبرة من إدخال الدواء عن طريق الوريد. يشار إلى موقع قابس الحقن بدائرة زرقاء في الشكل 1G.
4. اصنع جبيرة عن طريق لف شاش مقاس 4 × 4 بوصات بشريط لاصق بحيث يشكل شكل أنبوب ووضعه داخل أذن الأرنب. ثم قم بلصق الجبيرة على الأذن بحيث يتم تثبيت القسطرة في مكانها وتظل منتصبة، على غرار الأذن غير القسطرة.
5. حقن 1 مل من 10 وحدات USP لكل مل من المحلول الملحي الهيباريني.
   ملاحظه: يجب تطهير القسطرة والوعاء بشكل واضح من الهواء وأن يظلوا حاصلين على براءة اختراع. إذا لم تكن القسطرة في الوعاء ، فلن تدفع المحقنة بسهولة وسيكون هناك تراكم للمحلول الملحي في الأنسجة تحت الجلد.
6. أعط الأرانب جرعات إضافية من PTZ عن طريق الوريد من 1 مجم / كجم إلى 10 مجم / كجم بزيادات 1 مجم / كجم كل 10 دقائق. قم بتدوين ملاحظة في بداية كل جرعة للإشارة إلى الذي يتم حقنه وتركيز الدواء.
   ملاحظه: يتيح ذلك تقييم الآثار الحادة والمضافة لإدارة PTZ. بدلا من ذلك ، لمزيد من التقييم للآثار المزمنة لجرعة منخفضة من PTZ ، يتم إعطاء الأرنب جرعات متكررة عند كل تركيز جرعة منخفضة ، 7 جرعات عند 2 مجم / كجم ، 3 جرعات عند 5 مجم / كجم ، ثم 3 جرعات عند 10 مجم / كجم ، يتم فصل كل جرعة بمقدار 10 دقائق.
7. بعد كل جرعة ، راقب بعناية بالفيديو - تخطيط كهربية الدماغ - تخطيط القلب - تصوير التأكسج - قياس التأكسج بحثا عن أي تشوهات كهربائية وتنفسية عصبية قلبية وأدلة بصرية على نشاط الصرع. لاحظ هذه التغييرات في الوقت الفعلي وأثناء ما بعد التحليل.
   ملاحظه: غالبا ما يبدأ نشاط النوبات في غضون 60 ثانية من إعطاء PTZ.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: أرنب متصل بالمعدات.(أ) موقع أقطاب تخطيط القلب ، يشار إلى الذراع الأيسر بنقطة صفراء. يشار إلى الذراع اليمنى بنقطة بيضاء. يشار إلى الساق اليسرى بنقطة حمراء. يشار إلى الأرض الأمامية للساق اليمنى بنقطة خضراء. (ب) أرنب في مقيدة مع أقطاب كهربائية لتخطيط القلب ومخطط كهربية الدماغ. (ج) أرنب يافع في قايد مع تعديلات مناسبة لاستيعاب أرنب أصغ...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 0.9٪ ري كلوريد الصوديوم ، USP - حاوية مرنة فايزر (هوسبيرا) 7983-09 مخفف حقنة Luer Lock 10cc مع إبرة 20G × 1 " سور بيطري SS-10L2025 يستخدم كتدفق بعد حقن المخدرات 4x4 شاش الإسفنج فيشر ساينتيك 22-415-469 ملفوفة في أنبوب لجبيرة الأذن باستخدام القسطرة الوعائية حاسوب ديل الطراز Optiplex فئة 5040 كمبيوتر الاستحواذ قطب تخطيط القلب إيثم لينك RLSND116-2.5 أقطاب كهربائية دبوس تحت الجلد مقاس 13 مم عازمة بزاوية 35 درجة (قطر 0.4 مم) قطب EEG إيثم لينك RLSP513 5 تواء 13 مم مستقيمة (قطر 0.4 مم) أقطاب دبوس تحت الجلد إيجلاب (2020) مركز شوارتز لعلم الأعصاب الحاسوبي الوصول المفتوح يمكن إجراء التحليل الطيفي لمخطط كهربية الدماغ محول إيثرنت إلى إيثرنت لينكسيس USB3G16 محول لتوصيل الكاميرا بالكمبيوتر قفل الهيبارين فلش ميدلاين EMZ50051240 للحفاظ على سالكية القسطرة الوعائية ضوء الأشعة تحت الحمراء بوش EX12LED-3BD-8W يسهل التسجيلات في الظلام LabChart Pro (2019 ، الإصدار 8.1.16) أدينسيرومنتس غير متاح تحليل تخطيط القلب قسطرة JELCO PROTECTIV Safety IV ، مقياس 25 سميثس الطبية 3060 تستخدم لتقطير وريد الأذن الهامشي MATLAB (R2019b ، التحديث 5) الرياضيات غير متاح مطلوب لتشغيل EEGLAB ميكروفون سوني ستيريو وحدة التحكم في المحيط الهادئ - D570P تسجيل مظاهر مسموعة للنوبات شريط طبي Micropore ، ورق ، أبيض 3 م 1530-1 تستخدم لتأمين الأسلاك وإنشاء جبيرة الأذن ناتوس نيورووركس ناتوس LC101-8 برامج الاستحواذ والمراجعة Pentylenetetrazol (1-10 مجم / كجم دائما بحجم 1 مل) سيجما ألدريتش 88580 التخفيفات المحضرة بالمحلول الملحي مكبر الصوت الكمي ناتوس 13926 مكبر للصوت / محول الأرقام مكبر الصوت Quantum HeadBox ناتوس هاتف: 22134 صندوق اندلاع 64 سنا رديتر الأرنب مختبرات بلاس 501-TC تتوفر قيود أرنب مختلفة الحجم. 6 × 18 × 6 بوصة في هذه الدراسة. مشبك الأذن SpO2 نونين 61000 ريال بيور سات/إسب 2 محول مستشعر SpO2 نونين 13931 XPOD PureSAT / SpO2 كاميرا SRG-X120 1080p PTZ مع إخراج HDMI و IP و 3G-SDI سوني SRG-X120 كاميرا إمبيلا حقنة Terumo Sur-Vet Tuberculin 1cc 25G X 5/8 "Luer العادي سور بيطري 13882 يستخدم لحقن الأدوية الوريدية الحقن البيطري التوصيل Luer Lock سور بيطري سريب 2 في سدادة حقن لإدخال الإبرة للأدوية الوريدية Webcol كحول الإعداد، معقم، كبير، 2 طبقة كوفيديان 5110 ريال لتحضير وريد الأذن قبل القسطرة