إجراء الحقن في الفص الحجاجي للغدة الدمعية العلوية: تقنية لإحداث مرض جفاف العين في نموذج الأرانب

الملخص

< p class = "jove_content" >المصدر: Honkanen ، R. A. et al ، نموذج أرنب لمرض جفاف العين الناجم عن نقص الماء الناجم عن حقن Concanavalin A في الغدد الدمعية: التطبيق على دراسات فعالية الأدوية. J. Vis. Exp. (2020).

يصف هذا الفيديو إجراء إحداث مرض جفاف العين في نموذج أرنب من خلال حقن Concanavalin A في الفص المداري للغدة الدمعية العلوية. النموذج المطور مفيد لدراسة فعالية الأدوية المختلفة لعلاج أمراض جفاف العين.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_title" >1. تحضير

< p class = "jove_content" >ملاحظة: يتم حقن أجزاء من نظام الغدة الدمعية المدارية.

1. تخدير الأرانب مع أسيبرومازين 0.2 مجم / كجم تحت الجلد.
2. قص الفراء في المنطقة المحيطة بالحجاج وفروة الرأس وإزالة أي فرو متبقي تماما باستخدام Nair. اترك البشرة ناعمة تماما للحصول على تصور أفضل للسمات المميزة التشريحية والحقن الموجه بالولايات المتحدة من كونكانافالين أ (الشكل 1).
3. تحفيز التخدير المعتدل كما هو موضح أعلاه.

فئة < ص = "jove_title" >2. حقن الغدة الدمعية المدارية العليا (OSLG)

ملاحظة: يتبع OSLG في تتابع سريع.

1. تطبيق الضغط الإنسي على الكرة الأرضية مما تسبب في بروز OSLG من الظهورة الخلفية. تطبيق الضغط الإنسي على الكرة الأرضية (الشكل 2 ، السهم الأحمر) مع نتوء OSLG من الحافة الخلفية. يعمل النتوء كتوطين إجمالي للعثور على الظلام الخلفي.
2. استخدم ملقطا منحنيا مع أطراف مغلقة لمسافة بادئة للمنطقة حتى يتم الشعور بالفتحة العظمية في الجمجمة. سيكون هذا يشبه الشق مع اتجاه أمامي / خلفي تحت النتوء.
3. ضع ضغطا متواضعا باستخدام ملقط لترك فجوة في الجلد ، والتي ستكون بمثابة علامة بارزة لوضع الإبرة (الشكل 3 أ).
4. أدخل إبرة (حقنة السل بإبرة قياس 27 بوصة ، 5/8 بوصة) عموديا على الجلد فوق علامة المسافة البادئة (الشكل 3 ب) ~ 1/4 بوصة في الحافة ، ثم أعد توجيه الإبرة للخلف والخارج نحو الكانثوس الجانبي الذي يهدف إلى نقطة المنتصف بين موقع الحقن والحافة المدارية العظمية.
   ملاحظه: إذا لم يتم استهداف الحافة بدقة بالإبرة ، فإن الجمجمة تمنع تقدمها.
5. بمجرد الوصول إلى محور الإبرة ، قم بحقن 1000 ميكروغرام من Con A ببطء بحجم 0.2 مل (الشكل 3C).
6. أكمل حقن كل من PSLG و OSLG في غضون 2-3 دقائق
7. قم بإزالة من تخدير الأيزوفلوران (إذا لم يتم ذلك بعد). يمكن عادة إكمال حقن الغدة الدمعية السفلية (ILG) دون مزيد من التخدير.

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: تحضير الأرنب لحقن كونكانافالين أ.(أ) تستخدم المقصات الصغيرة لإزالة الفراء ، مما يسمح بتصور أسهل للمعالم لتحديد الغدة الدمعية العلوية المدارية. (ب) يستخدم ناير لإزالة الشعر المتبقي بعد القص.

< p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل...

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات عدسة ماكرو 100 مم عدسة EF 100mm f/2.8L IS USM من Canon 3554B002 26 إبر قياس (5/8) بيكتون ديكنسون وشركاه ،
بحيرات فرانكلين ، نيوجيرسي 305115 إبر لحقن ConA في
الغدد الدمعية 27 إبر قياس (5/8) بيكتون ديكنسون وشركاه ،
بحيرات فرانكلين ، نيوجيرسي 305921 إبر لحقن ConA في
الغدد الدمعية أسيبروينج (أسيبرومازين) هنري شاين لصحة ،
دبلن ، أوهايو NDC11695-0079-8 0.1 مل / كجم الحقن تحت الجلد < / > لتخدير الأرانب مبخر التخدير VetEquip ، بليسانتون ، كاليفورنيا البند #911103 الأسقف هارمون ملقط Bausch and Lomb (Storz) ،
بريدجووتر ، نيوجيرسي E1500-C ملقط الأنسجة الفرجار Bausch and Lomb (Storz) ،
بريدجووتر ، نيوجيرسي إ-2404 الفرجار المستخدم لقياس طول
إبرة أثناء حقن ConA كونكانافالين أ سيجما ، سانت لويس ، ميزوري سي 2010 اصنع 5 مجم / مل في PBS للحقن
إلى الغدد الدمعية للأرانب أرنب ، نيوزيلندا أبيض أو
الهولندية الحزام (كما هو موضح في النص) مختبرات نهر تشارلز ، والثام ، ماساتشوستس 2-3 كجم البحث عن العدسات الجراحية +1.50 تصاميم للرؤية ، بوهيميا ، نيويورك عنصر التخصص توفير روعة العين
السطح أثناء مراقبة كسر المسيل للدموع
حتى وأداء Concanavalin A
الحقن.