$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >1. تحضير نماذج عدوى العظام
- احتفظ بذكور الأرانب البيضاء النيوزيلندية ، التي تتراوح أعمارها بين 3 أشهر ، في أقفاص فردية ، في ظروف يتم التحكم فيها بالهواء (20 ± 1 درجة مئوية) و 12 ساعة / 12 ساعة من دورات الإضاءة الفاتحة والظلامية. قدم نظاما غذائيا روتينيا وماء الصنبور يوميا.
- تأكد من أن الأرنب يزن أكثر من 3 كجم في وقت الجراحة.
- تخدير الأرانب عن طريق الحقن داخل الصفاق مع البنتوباربيتال الصوديوم (3 مجم لكل 100 غرام من وزن الجسم). تأكد من تخدير الأرانب تماما بسبب الفشل في الاستجابة لقرص المخلب. إصلاح الأرانب على طاولة العمليات أثناء إجراء العملية.
ملاحظة: تأكد من أن مدة إجراء النمذجة أقل من 1 ساعة.
- حلق منطقة الساق القريبة باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية عكس اتجاه نمو الشعر. تطهير البشرة عن طريق وضع محلول بوفيدون اليود.
- ضع علامة على الطرف العلوي من الظنبوب وموضع ثقب الحفر للحقن باستخدام المكورات العنقودية الذهبية (المسافة إلى الطرف العلوي من الساق 1.5 سم) بالقلم والمسطرة. تأكد من أن مواضع ثقب الحفر في منتصف هضبة الظنبوبة أفقيا (الشكل 1 أ).
- قم بقص جلد الساق باستخدام مشرط رقم 11 وقم بعمل شق 1 سم في السمحاق (الشكل 1 ب ، ج). قم بعمل ثقب قطره 2 مم في الساق باستخدام وحدة حفر عظمية كهربائية (الشكل 1 د).
- اضغط على الفتحات التي قطرها 2 مم في هضبة الظنبوبة بأسطوانة من شمع العظام بقطر 2 مم وارتفاع 2 مم (الشكل 1E). قم بإزالة شمع العظام الاحتياطي على طول المستوى الأفقي لهضبة الظنبوبة (الشكل 1F). تأكد من أن الفتحة 2 مم مليئة بشمع العظام (الشكل 1G).
ملاحظه: تأكد من أن الثقوب مليئة بشمع العظام عن طريق فحص الثقب مع أو بدون فيضان الدم.
- قم بخياطة السمحاق والجلد بخياطة جراحية قابلة للامتصاص في خياطة مرتبة عمودية لمنع من مضغ الغرز (الشكل 1H).
- حقن 1 × 108 CFU/مل من المحاليل المكورات العنقودية الذهبية (30 ميكرولتر لكل 100 غرام من وزن الجسم) مع حاقن التعقيم 1 مل (الشكل 1I). تأكد من أن الإبر تخترق شمع العظام وحقن محلول المكورات العنقودية الذهبية في نخاع العظام ببطء.
- احتفظ بالحيوان في ظروف دافئة ونظيفة لتجنب فقدان الحرارة بعد النمذجة. مراقبة معدل التنفس ومعدل ضربات القلب. بعد الاستيقاظ ، ضع الأرانب في أقفاص فردية مع حرية الوصول إلى الطعام والماء.
