ذوبان أجنة الأرانب: إجراء تسخين لاستعادة أجنة الأرانب المحفوظة بالتبريد لنقل الأجنة

الملخص

المصدر: Garcia-Dominguez، X. et al.، نقل الأجنة طفيف التوغل وتزجيج الأجنة في مرحلة الجنين المثلى في نموذج الأرانب.

يوضح هذا الفيديو إجراء إذابة أجنة الأرانب المزججة وخطوات القياس الاحترازية لاستعادة الأجنة على النحو الأمثل.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< ص الفئة = "jove_title" >1. ارتفاع درجة حرارة الأجنة

1. قم بإذابة الأجنة في خطوة واحدة.
   1. ضع القش الصغير أفقيا على بعد 10 سم من بخار النيتروجين السائل لمدة 20-30 ثانية.
   2. عندما تبدأ عملية التبلور داخل القش الصغير ، اغمر القش الصغير في حمام مائي عند 25 درجة مئوية لمدة 10-15 ثانية.
   3. قم بإزالة سدادة القش الصغيرة وقطع السدادة القطنية.
   4. باستخدام موزع دقيق مقترن ، قم بطرد كل محتوى القش الصغير في صفيحة تحتوي على محلول سكروز 0.33 متر عند 25 درجة مئوية في BM لمدة 5 دقائق.
      ملاحظه: يجب أن تتم هذه الخطوة بسرعة من أجل تقليل تعرض الأجنة لمحلول التزجيج.
   5. انقل الأجنة إلى صفيحة جديدة تحتوي على محلول BM لمدة 5 دقائق أخرى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات النيتروجين السائل اير سليمع P1505XXX أطباق بتري، 35 مم سيجما ألدريتش CLS430165-500 إيه خلع الملابس البلاستيكية (Nobecutan) IBOR الطبية 7140028 قش بلاستيكي 0.25 مل IMV - التقنيات 6431 ريال مقص روبوز RS-5880 سيعمل أي مقص فولاذي صغير مستقيم من الدرجة الجراحية. قفازات معقمة ألفيت إسكارتي 087GL010075 ثوب معقم ألفيت إسكارتي 12261501 قناع معقم ألفيت إسكارتي 058B15924B قابس القش IMV - التقنيات 6431 ريال سكروز سيجما ألدريتش إس 7903 حمام مائي رايبا بي إي -4 محلول ملحي مخزن بالفوسفات من Dulbecco (DPBS) سيجما ألدريتش د5773 بدون كلوريد الكالسيوم.