تلطيخ Safranin-O: طريقة لتصور السلامة الهيكلية والخلوية للغضروف

Abstract

< p class = "jove_content" >المصدر: Zhao ، Y. ، et al. إنشاء نموذج مستحث جراحيا في الفئران للتحقيق في الدور الوقائي للبروجرونلين في هشاشة العظام. J. Vis. Exp. (2014).

< p class = "jove_content" >في هذا الفيديو ، نوضح إجراء تلطيخ الغضروف باستخدام برتقالي السافرانين. تساعد هذه الطريقة في تصور الغضروف واكتشاف أي ضرر.

Protocol

< ص الفئة = "jove_title" >1. تلطيخ سافرانين يا

1. ابدأ بالشرائح الزجاجية التي تحتوي على أقسام سهمية تسلسلية تمتد على منطقة من مركز اللقمة الجانبية إلى مركز اللقمة الإنسية لنموذج الفأر القتل الرحيم مع الغضروف المفصلي الإنسي غير المستقر.
2. بعد ذلك ، قم بإزالة الشرائح في الأوكسيلين ، وترطيبها في تدرج الإيثانول إلى الماء المقطر. بعد ذلك ، يتم تلطيخ الشرائح من خلال محلول Hematoxylin الحديدي من Weigert ، و 0.05٪ Fast Green (FCF) ، و 1٪ محلول حمض الخليك ، و 0.1٪ محلول Safranin O. قم بتركيب الشرائح باستخدام وسط راتنجي.
3. قم بتسجيل الشرائح الملطخة ب Safranin O بناء على فقدان البروتيوغليكان (اللون الأحمر) في الغضروف ونسبة التدمير في بنية الغضروف ، وقم بإجراء تحليل إحصائي للنتيجة النسيجية.