$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< ص الفئة = "jove_title" >
1. تلطيخ تولويدين الأزرق
- تحضير محلول 1٪ من التولودين الأزرق عن طريق إذابة 2 جم من بورات الصوديوم في 100 مل من الماء منزوع الأيونات ، ثم أضف 1 جم من التولودين الأزرق وحرك حتى يذوب. قم بتصفية المحلول باستخدام ورق الترشيح (حجم المسام: 11 ميكرومتر) واحتفظ بالمحلول في زجاجة غير شفافة في درجة حرارة الغرفة لمدة تصل إلى أسبوعين.
- باستخدام ماصة بلاستيكية أو ماصة دقيقة، أضف قطرة من محلول التولودين الأزرق في الجزء العلوي من الأقسام العصبية واتركها لمدة 20-30 ثانية.
- اشطف كل محلول التولودين الأزرق الزائد عن طريق غمس الشرائح برفق في وعاء ماء منزوع الأيونات وكرر ذلك 3-4 مرات حتى تصبح الأقسام واضحة. جفف الشرائح لمدة 15 دقيقة على الأقل عند 60 درجة مئوية أو طوال الليل في درجة حرارة الغرفة ثم قم بتغطية الأقسام بغطاء باستخدام وسيط تثبيت عادي. افحص الشرائح المثبتة على الفور أو قم بتخزينها في درجة حرارة الغرفة.
- افحص تحت المجهر الضوئي. يوصى باستخدام عدسة غمر بالزيت بمعدل 100X للصور التفصيلية المستخدمة لحساب نسب g.