مقالة منهجية

طريقة التلوين المزدوج: تقنية لتصور تفاعلات الفطريات النباتية باستخدام أحمر الروثينيوم والأزرق القطني اللاكتوفينول

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Marques ، J. P. R. ، و Nuevo ، L. G. طريقة تلطيخ مزدوج للكشف عن البكتين في تفاعل النبات والفطريات. J. Vis. Exp. (2022).

يوضح هذا الفيديو طريقة تلطيخ مزدوجة باستخدام أحمر الروثينيوم والأزرق القطني اللاكتوفينول لتصور البكتين والكيتين أثناء تفاعلات الفطريات النباتية في نبات صدأ القهوة. يساعد الإجراء في فهم آليات الدفاع عن النبات أثناء الالتهابات الفطرية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
فئة < ص = "jove_title" >1. عملية تلطيخ مزدوجة

  1. ابدأ بأقسام أوراق رقيقة للغاية مدمجة بالراتنج من القهوة العربية السيرة الذاتية Catuaí مصابة بصدأ القهوة. قم بتغطية الأقسام ب 2 مل من القطن الأزرق بنسبة 5٪ في اللاكتوفينول (40٪ جلسرين ، 20٪ فينول ، و 20٪ حمض اللاكتيك في الماء) وقم بتسخينها على طبق ساخن عند 45 درجة مئوية لمدة 5 دقائق (الشكل 1 أ).
  2. قم بإزالة الصبغة الزائدة عن طريق غسل الشريحة ثلاث مرات في دورق مملوء بالماء المقطر (الشكل 1B-D).
  3. بقعة مع 2 مل من 0.01٪ روثينيوم أحمر في الماء لمدة 1 دقيقة (الشكل 1 ه).
  4. قم بإزالة الصبغة الزائدة عن طريق غسل الشريحة ثلاث مرات في دورق مملوء بالماء المقطر (الشكل 1F ، G).
  5. ضع قطرة من الماء المقطر فوق الأقسام وقم بتغطية الأقسام بغطاء 24 مم × 60 مم لإجراء تحليل المجهر الضوئي.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" >figure-results-1
الشكل 1: تفاصيل الخطوات الفردية لبروتوكول التلوين المزدوج. (أ) قم بتغطية الأقسام بقطرات من اللاكتوفينول القطني الأزرق وقم بتسخين الشرائح على لوح ساخن عند 45 درجة مئوية. (د) أقسام على الشرائح الزجاجية بعد الغسيل (يشار إليها بالسهام). (ه) قم بتغطية الأقسام بقطرات من الروثينيوم الأحمر. (إف جي) قم بإزالة الصبغة الزائدة عن طريق غسلها بالماء المقط...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات صفيحة ساخنة دوبيسر SSCD25X30-110 فولت تلطيخ قطن أزرق لاكتوفينول Metaquímica 70سولسيج024629 تلطيخ مجهريه زييس # 490040-0030-000 التقاط الصور علبة كأس صب البلاستيك EMS 10176-30 تلطيخ أحمر الروثينيوم لاب #006004 تلطيخ برنامج Axion Vision زييس # 410130-0909-000 التقاط الصور

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة