مقالة منهجية

تلطيخ Wiesner لتصور اللجنين: تقنية لتلطيخ رواسب اللجنين الموجودة في سيقان نبات الأرابيدوبسيس ثاليانا

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Pradhan Mitra، P. et al.، تلطيخ الكيمياء النسيجية لعناصر جدار الخلية الثانوية لأرابيدوبسيس ثاليانا. J. Vis. Exp. (2014).

في هذا الفيديو ، نصف تقنية تلطيخ Wiesner لتلوين اللجنين الموجود في الخلايا النباتية المتخصصة. تساعد تقنية التلوين هذه على تصور جدران الخلايا الخشنة في سيقان نبات الأرابيدوبسيس thaliana وتساعد على تحديد كمية التقشير في جدران الخلايا لأنواع مختلفة من الخلايا.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. تضمين الجذع

  1. اصنع محلول الاغاروز بنسبة 7٪ في الماء (7 جم من الاغاروز بدرجة الرحلان الكهربائي في 100 مل من الماء المقطر). قم بإذابة الاغاروز عن طريق التعقيم لمدة 20 دقيقة أو عن طريق الميكروويف لمدة 20 دقيقة بأقل كثافة (على سبيل المثال ، كثافة 10٪ من ميكروويف 1،250 واط).
  2. قم بإعداد قالب محلي الصنع لتضمين السيقان باستخدام قوارير بلاستيكية.
    1. باستخدام شفرة حلاقة ، قم بقطع الجزء السفلي المخروطي لأنبوب الطرد المركزي الدقيق ذو الغطاء اللولبي سعة 2 مل (الجزء أ). باستخدام إبرة حقنة ، قم بثقب ثقب في غطاء الأنبوب أكبر قليلا من قطر الجذع المراد تضمينه. بعد ذلك ، قم بقطع 0.5 سم من قاع أنبوب الطرد المركزي الدقيق 0.6 مل (الجزء ب).
      2. ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
الشكل 1. قالب محلي الصنع لتضمين السيقان.على الجانب الأيسر الجزء العلوي من أنبوب الطرد المركزي الدقيق ذو الغطاء اللولبي سعة 2 مل (الجزء أ) والجزء السفلي من أنبوب الطرد المركزي الدقيق سعة 0.6 مل (الجزء ب). على الجانب الأيمن. البارافيلم الذي يحمل الجزأين. A و B لتشكيل القالب النهائي.

figure-results-2
الشكل 2. تلطيخ Phloroglucinol-HCl للمقاطع العرض.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات أغاروز EMD MERC2125 رقم سجل المستخلصات الكيميائية: 9012-36-6 فلوروجلوسينول سيغما ص 3502 1،3،5-ثلاثي هيدروكسي بنزين [رقم سجل المستخلصات الكيميائية: 108-73-6] حمض الهيدروكلوريك EMD HX0603-75 رقم سجل المستخلصات الكيميائية: 7647-01-0 دليل الإيثانول 190 كوبتيك V1401 رقم سجل المستخلصات الكيميائية: 64-17-5 الاهتزاز لايكا Leica تهتز شفرة microtome VT1000S http://www.leicabiosystems.com/ المنتجات/التقطيع/الاهتزاز-الميكروتوم/التفاصيل/المنتج/ LEICA-VT1000-S/ موسى شركة شفاقة السلامة الأمريكية الصنف # 60-0139-0000 شفرة مزدوجة الحواف من الفولاذ المقاوم للصدأ (Personna Super) أنابيب الطرد المركزي الدقيقة ذات الغطاء اللولبي (2 مل) VWR 16466-044 أنابيب الطرد المركزي الدقيقة (0.6 مل) أكسيجن العلمية MCT-060-C لاصق الأنسجة شركة تيد بيلا 10033 يحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية أو 20 درجة مئوية لمدة 3 أشهر أو أكثر كاميرا مع شريحة CCD بدون مصراع ميكانيكي هاماماتسو ج4742-95 برنامج الكاميرا الأجهزة الجزيئية إصدار MetaMorph 7.7.0.0 تخيل التحليل طُوب فوتوشوب CS4 نظارات مايكرو كشور ، مربع ، رقم 1 VWR هاتف: 48366-067 22 × 22 مم (7/8 × 7/8 بوصة) - نظارات الغطاء مقاومة للتآكل شرائح صغيرة بلوستد ، 1 مم VWR 48312-003 75 × 25 مم - 1 مم

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة