مقايسة التألق المناعي لتقييم تأثير البروتينات المستهدفة على نمو العصبات

الملخص

المصدر: Chan ، W. ، W. ، R. et al. اختبار محسن قائم على البروتين الفلوري الأخضر لدراسة نمو العصبات في الخلايا العصبية الأولية. J. Vis. Exp. (2019).

في هذا الفيديو ، نوضح مقايسة التألق المناعي المستند إلى EGFP لتحديد فعالية البروتينات المستهدفة على نمو الخلايا العصبية للخلايا العصبية القشرية الأولية. يتم نقل الخلايا العصبية الأولية ببروتين فلوري ، EGFP ، وبروتين مستهدف ، ثم يتم إجراء اختبار مناعي للتحقيق في تأثير البروتين المستهدف على نمو العصب.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات زلات غطاء دائري 18 مم الترمو: العلمية CB00180RA تعقيم قبل الاستخدام السيتوكالاسين د إنفيتروجين PHZ1063 تم حلها في DMSO مجموعة EndoFree Plasmid Maxi Kit كياجين هاتف 12362 وسط تركيب التألق داكو S302380 كاشف الإرسال Lipofectamine 2000 إنفيتروجين 11668019 بارافورمالدهيد سيجما ألدريتش ص 6148 pEGFP-C1 كلونتك # 6084-1 PCI FE65 يرجى الاطلاع على المشيرتين 8 و 15 أقراص PBS جيبكو 18912014 البنسلين - ستربتومايسين جيبكو 15140122 بولي د-ليسين هيدروبروميد سيجما ألدريتش P7280 ملعقه سيجما ألدريتش إس 4147 التربسين EDTA (0.05٪) ، أحمر الفينول جيبكو 25300062