Method Article

تقنية قياس تداخل الطبقة الحيوية للكشف عن التفاعلات بين Ligand و Analyte

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Desai, M., et al. تطبيق قياس تداخل الطبقة الحيوية (BLI) لدراسة تفاعلات البروتين والبروتين في النسخ. J. Vis. Exp. (2019)

في هذا الفيديو ، نوضح تقنية قياس تداخل الطبقة الحيوية (BLI) للكشف عن التفاعلات بين الجزيئات بين الروابط والتحليلات المستهدفة في الوقت الفعلي. يقيس BLI التغيرات في نمط تداخل الضوء الأبيض المنعكس عن طبقة من الروابط المجمدة على سطح المستشعر الحيوي أثناء تفاعلها مع التحليلات في المحلول.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. ترطيب المستشعر الحيوي وإعداد الفحص

  1. قم بتشغيل آلة BLItz.
  2. تأكد من توصيل الجهاز بالكمبيوتر من خلال منفذ إخراج بيانات USB في الجزء الخلفي من الجهاز.
  3. على الكمبيوتر ، افتح البرنامج المرتبط (على سبيل المثال ، BLItz Pro) ، وانقر فوق Advanced Kinetics على الجانب الأيسر من الشاشة.
  4. في البرنامج ، اكتب جميع المعلومات المناسبة حول التجربة (بما في ذلك اسم التجربة والوصف ومعرف العينة وتركيز البروتين) تحت كل عنوان على حدة.
  5. انقر فوق Biosensor Type واختر Ni-NTA من القائمة المنسدلة.
    1. ضمن عنوان إعدادات التشغيل، تحقق من تعيين Shaker على تمكين

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments آلة BLItz فورتي بيو 45-5000 جهاز تراجع وقراءة صينية المستشعر الحيوي Ni-NTA فورتي بيو 18-5101 مستشعرات حيوية Ni-NTA جاهزة للاستخدام للبروتينات التي تحمل علامة poly-His حامل السقوط فورتي بيو 45-5004 جهاز أنابيب PCR (0.2 مل) توماس العلمية CLS6571 أدوات بلاستيكية أنابيب الطرد المركزي الدقيقة (أسود) ثيرمو فيشر العلمي 03-391-166 أدوات بلاستيكية كيمويبس ثيرمو فيشر العلمي 06-666 أ أدوات بلاستيكية DTT ثيرمو فيشر العلمي R0861 كيميائي EDTA MilliporeSigma E6758 كيميائي مغنكلوريد2 MilliporeSigma M8266 كيميائي كلوريد الصوديوم MilliporeSigma S9888 كيميائي تريس حمض الهيدروكلوريك جولد بيو T095100 مخزن مؤقت

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Biolayer InterferometryLigand Analyte InteractionNi NTA BiosensorHistidine Tagged LigandWavelength Shift MeasurementAssociation Dissociation KineticsBLI Buffer SystemFiber Optic BiosensorBLItz InstrumentAdvanced Kinetics Software

Related Articles