Method Article

القياس الكمي لتكوين الكشكشة الغشائية باستخدام المجهر الإلكتروني الماسح

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Ahn ، W. et al. ، تصور تكوين كشكشة الغشاء باستخدام الفحص المجهري الإلكتروني الماسح.J. Vis. Exp. (2021)

يوضح هذا الفيديو تحضير العينة وتثبيتها وتصوير خلية البلاعم التي تعرض الكشكشة الغشائية باستخدام المجهر الإلكتروني الماسح ، SEM. تعد المعلومات التفصيلية حول مورفولوجيا الغشاء وتنظيمه أمرا بالغ الأهمية لفهم الحالة الفسيولوجية للخلايا.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = "jove_title" >1. خط الخلية وزراعة الخلايا

  1. قم بزراعة 264.7 وحدة بلاعم خام في وسط النسر المعدل (DMEM) من Dulbecco مع 10٪ (حجم / حجم) مصل بقري الجنين المعطل بالحرارة (FBS) ، و 100 وحدة دولية / مل من البنسلين و 100 ميكروغرام / مل من الستربتومايسين في حاضنة رطبة عند 37 درجة مئوية و 5٪ ثاني أكسيدالكربون 2. استبدل وسائط النمو كل يومين.
  2. عندما تصبح الخلايا ملتصقة بنسبة 80٪ ، اغسل اللوحة مرتين باستخدام PBS المعقم.
  3. افصل الخلايا عن طريق إضافة 1,000 ميكرولتر من 0.5٪ تريبسين-EDTA واحتضان لوحة زراعة الخلايا لمدة 3-5 دقائق في حاضنة مرطبة عند 37 درجة مئوية.
  4. افحص اللوحة تحت المجهر الضوئي لتأكيد تفكك الخلية. أضف 10 مل من وسائط ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments 0.5٪ تريبسين EDTA جيبكو 15400-054 2٪ جلوتارالديهايد علوم المجهر الإلكتروني 16320 [ا] 4٪ بارافورمالديهايد سانتا كروز التكنولوجيا الحيوية 281692 5- (N-ethyl-N-isopropyl) -Amiloride سيجما لايف ساينس أ 3085 علامات تبويب لاصقة الكربون علوم المجهر الإلكتروني 77825-09 ثنائي ميثيل سلفوكسيد كورنينج 25-950-CQC وسط النسر المعدل من Dulbecco سيتيفا لعلوم الحياة SH30022.01 Falcon 24-well Clear Flat Bottom معالج TC لوحة ثقافة الخلايا متعددة الآبار صقر 353047 مصل الأبقار الجنينية الجوزاء بيو 900-108 حاضنة HERAcell 150i CO2 ثيرمو فيشر العلمي 51026282 هامر موديل 6.2 الاخرق المغطي Anatech الولايات المتحدة الأمريكية 58565 JSM-IT500HR المجهر الإلكتروني الماسح زجاج غطاء المجهر ثيرمو فيشر العلمي 12-545-82 القلم Strep جيبكو 15140-122 فوربول 12-ميريستات 13-أسيتات ميليبور سيجما 524400 RAW 264.7 البلاعم ATCC ATCC TIB-71 M-CSF البشري المؤتلف بيبروتك 300-25 Samdri-790 مجفف النقاط الحرجة شركة توسيميس للأبحاث 8778 ب SEM عينة الألومنيوم يتصاعد علوم المجهر الإلكتروني 75220 كاكوديلات الصوديوم علوم المجهر الإلكتروني 12300 ريال تريبان بلو سوليشن ثيرمو فيشر العلمي 15250061

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Membrane Ruffle FormationScanning Electron MicroscopyMacrophage Cell CultureSample PreparationFixation ProtocolCritical Point DryingSputter CoatingElectron Beam ImagingSecondary Electron DetectionCell Surface Morphology

Related Articles