تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >
1. تحريض التهاب الجلد في الفئران pIL1-DsRed
- تخدير الفأر عن طريق الحقن داخل الصفاق (IP) لكوكتيل مخدر يحتوي على 100 مجم / كجم كيتامين ، و 10 مجم / كجم زيلازين ، و 1 مجم / كجم أسيبرومازين. لا تظهر الفئران المخدرة بشكل كاف انسحاب مخلب خلفي إلى قرصة إصبع القدم.
- ضعي كريم إزالة الشعر على السطح الظهري لكلتا أذني الفأر. انتظر من 30 ثانية إلى 1 دقيقة. امسح سطح الأذن بقطن مبلل بالماء واتركه حتى يجف في الهواء.
- قم بقياس سمك الأذن باستخدام ميكرومتر واستبدل الماوس في قفص منفصل. راقب حتى الشفاء من التخدير (~ 15 - 30 دقيقة). لحل التهاب الجلد الناجم عن منتج إزالة الشعر ، اترك الفأر يرتاح لمدة 3 أيام قبل إجراء المزيد من التجارب.
- تحضير 1.25٪ (وزن / حجم) أوكسازولون (OX) عن طريق إذابة 16.7 مجم من OX في 1 مل من الأسيتون وخلط 750 ميكرولتر من محلول OX / الأسيتون مع 250 ميكرولتر من زيت الزيتون. تحضير محلول السيارة عن طريق خلط 750 ميكرولتر من الأسيتون مع 250 ميكرولتر من زيت الزيتون.
- إعادة تخدير الفأر عن طريق الحقن داخل الصفاق (IP) لكوكتيل مخدر (1.1). قم بقياس سمك الأذن كما كان من قبل.
- ضع 12.5 ميكرولتر من 1.25٪ OX على كل جانب من الأذن اليمنى. ضع 12.5 ميكرولتر من محلول الأسيتون / زيت الزيتون على كل جانب من الأذن اليسرى.
- احتفظ بالفأر منفصلا عن زملائه في القفص حتى يتعافى تماما لمنع إهانة أذنيه من قبل الفئران الأخرى ، ثم استبدل الفأر في قفصه الأصلي وأعده إلى مرفق إسكان.
ملاحظه: قد تؤدي إزالة الشعر إلى التهاب بسيط في الجلد يتبعه تغيير سمك الأذن. سيتم حل هذا الالتهاب الطفيف بعد 3 أيام مؤكدا عن طريق سمك الأذن الطبيعي. بعد التطبيق الموضعي لمدة 24 ساعة ، تظهر الأذنان المعالجة ب OX تورما كبيرا (p < 0.01) مقارنة بالأذنين المعالجة بمحلول السيارة وحده.
