Method Article

مقايسة لدراسة تنظيم البلعمة الضامة بواسطة الخلايا الجذعية الوسيطة

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: إيفانز، جي إف، وآخرون. تنظيم الخلايا الجذعية الوسيطة لبلعمة البلاعم ؛ القياس الكمي والتصوير. J. Vis. Exp. (2021).

يوضح هذا الفيديو فحصا لدراسة تنظيم الخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) لبلعمة البلاعم في ثقافة مشتركة. عند الزراعة المشتركة ل MSC مع الضامة ، تتم إضافة جزيئات زيموزان غير opsonized المقترنة بالفلوروفور الحساس للأس الهيدروجيني ليتم البلعمة بواسطة الضامة. مع زيادة البلعمة ، ترتفع شدة التألق ، مما يسمح بتحديد تنظيم نشاط البلعمة بوساطة MSC.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ملاحظة: يتم تنفيذ جميع تقنيات التحضير المتوسط وزراعة الخلايا في ظل ظروف معقمة باستخدام خزانة السلامة الحيوية مع التدفق الرقائقي. وتنفذ جميع خطوات حضانة الاستزراع الموصوفة باستخدام حاضنة مصممة للحفاظ على جو 37 درجة مئوية و5٪ ثاني أكسيد الكربون 2 و95٪ رطوبة.

< p class = "jove_title" >1. زراعة الخلايا

  1. تحضير وسط النمو
    1. بالنسبة إلى MSC (الخلايا الجذعية الوسيطة) و LADMAC (البلاعم المشتقة من نخاع عظم الفأر ؛ مشتق من أسماء الباحثين الذين أسسوا خط الخلية: Laskin و Dower و Malech) ، أضف 50 مل من FBS و 5 مل من مزيج المضادات الحيوية / مضادات الفطريات 100x إلى 500 مل من DMEM عالي الجلوكوز (وسط النسر المعد....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1: نظرة عامة على سير عمل مقايسة الثقافة المشتركة والبلعمة. مخطط تفصيلي لسير العمل للتحليل الكمي والنوعي لنشاط البلعمة MΦ في الزراعة المشتركة مع MSC.

الملف التكميلي 1: ملف جدول بيانات تمثيلي للبيانات الحركية الأولية من تجربة مثالية. الرجاء ال.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments 96 بئر من البوليسترين الأسود Microplate MilliporeSigma CLS3603-48EA 0.4٪ محلول تريبان الأزرق MilliporeSigma T8154-20 مل 15 مل و 50 مل أنابيب الطرد المركزي المخروطي المعقم من مادة البولي بروبيلين ثيرموفيشر 339653 مضاد حيوي مضاد للفطريات (100X) جيبكو ثيرموفيشر 15240096 رافع الخلايا MilliporeSigma CLS3008-100 إيه قوارير الاستزراع ، زراعة الأنسجة المعالجة ، مساحة السطح 75 سم 2 ، رقبة معلقة ، مع غطاء ، مفلترة MilliporeSigma C7231-120EA D1 ORL UVA [D1] ATCC رقم التعريف الهاتفي-12424 خط خلية MSC للماوس DMEM, نسبة عالية من الجلوكوز ثيرموفيشر 11965092 مصل الأبقار الجنينية، مؤهل، معطل بالحرارة ثيرموفيشر 16140071 مقياس الدم فيشر ساينتفيك 02-671-51 ب I-11.15 ATCC CRL-2470 خط خلية الماوس MΦ خط خلوي LADMAC ATCC رقم التعريف الهاتفي-2420 تفرز خلايا LADMAC عامل تحفيز مستعمرة العامل 1 (CSF-1). حل تصوير الخلايا الحية ثيرموفيشر A14291DJ برنامج تلفزيوني ، درجة الحموضة 7.4 ثيرموفيشر 10010031 درجة الحموضة رودو جرين زيموسان الجسيمات الحيوية المترافقة ثيرموفيشر ص 35365 سبيكتراماكس i3X الأجهزة الجزيئية وحدات تصفية فراغ معقمة للاستخدام الواحد ، 250 مل ، 0.2 ميكرومتر ثيرموفيشر 568-0020 مرشحات حقنة معقمة ، 0.2 ميكرومتر ثيرموفيشر 723-2520 أطباق الاستزراع المعالجة بزراعة الأنسجة، 100 مم × 20 مم MilliporeSigma CLS430167-100 أ التربسين EDTA (0.05٪) ، أحمر الفينول ثيرموفيشر 25300054

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Mesenchymal Stem CellsMacrophage PhagocytosisMSC Macrophage Co cultureZymosan ParticlespH Sensitive FluorophoreTunneling NanotubesMitochondrial TransferFluorescence Intensity MeasurementLive Cell ImagingPhagolysosome Formation

Related Articles