التهاب الجلد الناجم عن الملاسيزية وتحليل العبء الفطري في نموذج الفئران

الملخص

المصدر: Sparber، F. et al.، إصابة الفئران بالملاسيزية spp. لدراسة التفاعل بين الفطريات والمضيف.J. Vis. Exp. (2019)

يوضح هذا الفيديو عدوى الجلد الناجمة عن الملاسيزية في الفئران. يتم وضع معلق زيت الملاسيزية على الأذن المصابة ، مما يؤدي إلى التهاب وتورم أنسجة الأذن. في وقت لاحق ، يتم تشريح الأذنين وتجانسهما ونشرهما على صفيحة أجار للنمو. يشير عدد المستعمرات إلى العبء الفطري الناتج عن التهاب الجلد.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. زراعة الملاسيزية في ظروف المختبر

ملاحظة: قم بتخزين جميع الكواشف والوسائط المستخدمة لهذا البروتوكول في درجة حرارة الغرفة (RT ، 20-25 درجة مئوية) ما لم ينص على خلاف ذلك ، لأن درجة الحرارة المنخفضة يمكن أن تمنع نمو الفطريات.

1. تحضير وسط ديكسون (mDixon) المعدل بالسائل لنمو الملاسيزية. لتحضير 500 مل من وسط mDixon السائل ، قم بإذابة 18 جم من مستخلص الشعير ، و 10 جم من الصفراء الثورية المجففة ، و 5 مل Tween-40 ، و 3 جم بيبتون ، ....

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: زراعة الملاسيزية في المختبر. (أ) M. sympodialis سلالة ATCC 42132 نمت لمدة 3 أيام عند 30 درجة مئوية و 180 دورة في الدقيقة في وسط mDixon السائل (يسار) بجوار قارورة Erlenmeyer الضابطة التي تحتوي على وسط mDixon الذي لم يتم تلقيحه (يمين). (ب) مستعمرات M. sympodialis سلالة ATCC 42132 على أجار mDixon بعد 5 أيام من الحضانة عند 3.......

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات اجار سيجما ألدريتش A1296-1 كجم أتاني إيزوفلوران بيرامال للرعاية الصحية - خزانة Biosaftey (BSC) أسرع فائقة الأمان مجموعة داسيت 5594 معتمد من BSL2 الطرد المركزي إيبندورف 5415 د متوافق مع أنابيب Eppendorf 2 مل الثور الصفراء المجفف سيجما ألدريتش 70168-100 جرام أنابيب إيبندورف (2 مل) إيبندورف 0030 120.094 الجلوكوز سيجما ألدريتش 49159-5 كجم جيلسيرول (99٪) هانيويل 10314830 وسادة التدفئة إيكينماير 648048 حاضنة Hereaus B20 هيريوس 412047753 معتمد من BSL2 كيتاسول (100 مجم) Graeub AG 6680416 لوحة تسخين أرجوانية MR Hei-Standard أدوات هايدولف 442-1355 Malassezia spp. ATCC 14522 ، 14521 ، 42132 مستخلص الشعير سيجما ألدريتش 70167-500 جرام اضرب أنابيب المحيط الحيوي (200 ميكرولتر) سارستيدت إيه جي 7084211 قفل آمن زيت الزيتون الأصلي - - Commerc. متاح نونيديت P40 مختبر أكسون 1694,0250 Oditest قياس الابتكار كروبلين S0247 المدى 0-5 مم حمض الأوليك سيجما ألدريتش 75090-5 مل الببتون أوكسويد ل.ب0037 أطباق بتري سارستيدت إيه جي 82.1473 [إ] محلول ملح مخزن بالفوسفات (PBS ، 1x) أميميد / المفهوم الحيوي 3-05F39 رومبون (2 ٪) باير KP0BFHR حاضنة الاهتزاز Infors Minitron المعلومات - معتمد من BSL2 مطياف جينواي 20308 قياس الكثافة البصرية عند 600 نانومتر مطياف Cuvettes غرينر بيو ون 613101 كرات الفولاذ المقاوم للصدأ (5 مم) ABF كو 5G80 1.3541 محاقن 1 مل Sub-Q BD Bioscience 305501 الأنسجة لايزر II كوياجن 85300 Transpore الشريط هيبوالحساسية 3 م 1527-1 توين 40 سيجما ألدريتش P1504-100 مل فيتامين أ كريم العين ريتينولي بالميتاس باوش آند لومب Commerc. متاح