القياس الكمي لحجم الدموع في نموذج فأر العين الجافة المناعي الذاتي باستخدام خيط الفينول الأحمر

الملخص

المصدر: Hou، A. et al. ، نموذج فأر العين الجاف المناعي الذاتي المزمن مع زيادة في الخلايا التائية للذاكرة المستجيبة في أنسجة مقلة العين.

يوضح هذا الفيديو اختبار الخيط الأحمر الفينول لتحديد حجم الدموع في نموذج فئران العين الجافة المناعية الذاتية. يتغير لون الخيط الأحمر الفينول الحمضي الحساس للأس الهيدروجيني عندما يتلامس مع الدموع القلوية. يتوافق الطول الأقصر لتغير اللون في الخيط الأحمر الفينول مع انخفاض حجم المسيل للدموع.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تقييم ملامح جفاف العين

ملاحظة: يجب إمساك الفئران المخدرة برفق بيد مرتدية قفاز في وضع رأسي على سطح مستو لتجنب الحركة.

1. قم بقياس حجم المسيل للدموع بخيط أحمر الفينول.

1. استخدم زوجا واحدا من الملقط لتثبيت الخيط وآخر لسحب الجفن السفلي للفئران. ضع الخيط في الزاوية القريبة من العنقب السفلي لمدة 1 دقيقة ثم قم بإزالة الخيط.
   ملاحظه: الدموع تجعل الجزء المبلل من الخيط أحمر اللون.
2. التقط صورة لطول الجزء المبلل من الخيط بجوار المسطرة بعلامات ملليمترية. قم بقياس الطول المبلل حتى عشر المليمتر باستخدام برنامج صور (على سبيل المثال ، ImageJ).

المواد