تقنية لاستخراج الحمض النووي بوساطة الجسيمات الزجاجية المغناطيسية من الدم

الملخص

المصدر: Rosenstierne ، M. W. ، et al. استخراج الحمض النووي اليدوي السريع والآمن والبسيط بجانب السرير للكشف عن الفيروس في عينات الدم الكاملة. J. Vis. Exp. (2018).

يوضح هذا الفيديو تقنية لاستخراج الحمض النووي من دم الإنسان الكامل باستخدام جزيئات الزجاج المغناطيسي (MGPs) - حبات مغناطيسية صغيرة مطلية بالسيليكا. عند تحلل خلايا الدم باستخدام محلول تحلل ، ترتبط الأحماض النووية المنبعثة بسطح MGPs المطلية بالسيليكا ، وتستخرج الجزيئات من العينة.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تنطوي على جمع العينات وفقا لإرشادات IRB الخاصة بالمعهد

< p class = "jove_title" >1. جمع الدم من المرضى

تنبيه: اتخذ تدابير السلامة المختبرية المناسبة عند جمع الدم الكامل من المريض. ارتد القفازات والنظارات. إذا كان المريض في عزلة ، فيرجى اتباع إجراءات السلامة البيولوجية من المستوى 4.

1. لجمع الدم الكامل عن طريق الوريد من المريض ، استخدم إبرة فراشة مع أنبوب تمديد صغير التجويف وأنبوب مفرغ لجمع الدم يحتوي على محلول تحلل / ربط. ضع ذراع المريض في وضع لأسفل وضع أنبوب التجميع أقل من إبرة الفراشة. أدخل إبرة الفراشة في وريد المريض وقم بتوصيل الأنبوب المفرغ لجمع الدم با....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات أنابيب Vacutainer K2 EDTA (4 مل) بيكتون ديكنسون 368861 بالإضافة إلى جمع الدم بيكتون ديكنسون 362725 23 جم × 1 إبرة بيكتون ديكنسون 300800 حقنة LUER LOK (3 مل) بيكتون ديكنسون 309658 إبرة فراشة مع أنابيب تمديد صغيرة التجويف يورغن كروس أ / س 121714 1٪ فيركون نوميكو أ / إس 849265 مجموعة عزل الحمض النووي MagNA Pure LC I - عازلة التحلل / الربط - إعادة التعبئة تشخيص روش A / S 3246752001 مجموعة عزل الحمض النووي الكلي MagNA Pure LC تشخيص روش A / S 3038505001 Nunc™ Biobanking وأنابيب مبردة لثقافة الخلايا (1,8 مل) ثيرمو فيشر العلمي 375418 Nunc™ Biobanking وأنابيب مبردة لثقافة الخلايا (3,6 مل) ثيرمو فيشر العلمي 379189 Nunc™ Biobanking وأنابيب مبردة لزراعة الخلايا (4,5 مل) ثيرمو فيشر العلمي 379146 مغناطيس DynaMag-5™ ثيرمو فيشر العلمي 12303 د ماصة النقل (3.5 مل) سارستيدت 86.1171.010 ماصات سامكو™ ذات الطرف الدقيق من Thermo Scientific™ (1.5 مل) ثيرمو فيشر العلمي 231 Thermo Scientific™ Nunc™ 50 مل أنابيب الطرد المركزي المخروطي المعقم من مادة البولي بروبيلين ثيرمو فيشر العلمي 339652