تأثير عامل دوائي معدل مناعي على التفاعل بين الخلايا المتغصنة والخلايا التائية CD4 +

الملخص

المصدر: Wei, H., et al. التطوير والتوصيف الوظيفي للخلايا المتغصنة ذات التوتر العضلي في الفئران. J. Vis. Exp. (135) ، (2018).

يوضح هذا الفيديو طريقة لتحويل الخلايا المتغصنة (DCs) إلى DCs تحمل المنشأ (TolDCs) باستخدام عامل دوائي معدل المناعة. يتم تأكيد هذا التحويل من خلال تقييم وظيفة TolDC من خلال تأثيرها المثبط للمناعة على خلايا CD4 + T.

البروتوكول

1. تقييم وظيفة TolDCs في المختبر وفي الجسم الحي

1. مقايسة الانتشار التركيبي للخلايا التائية
   1. تعقيم جميع الأدوات الجراحية عن طريق التعقيم وإجراء التجربة في خزانة السلامة البيولوجية من الفئة الثانية مع إجراءات السلامة المناسبة.
   2. قم بإعداد مخزن MACS المؤقت باستخدام 0.5٪ ألبومين مصل بقري (BSA) و 2 ملي مولار EDTA في 500 مل PBS. قم بتعقيم المخزن المؤقت عن طريق التصفية من خلال مرشح 0.2 ميكرومتر.
      ملاحظه: احتفظ بالمخزن المؤقت على الجليد أثناء التجربة التالية.
   3. للحصول على خلايا CD4 + T ، قم بالقتل الرحيم للفئران المعدلة وراثيا لمستقبلات الخلايا التائية OT-II ....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات CDDO-DFPA (RTA-408) رياتا للمستحضرات الصيدلانية في التوليف المنزلي زراعة الخلايا الماوس GM-CSF شركة Peprotech 315-03 تمايز BMDC طقم عزل الخلايا المتغصنة شركة ميلتيني بيوتيك 130-100-875 مقايسة تكاثر الخلايا التائية عموم الخلية الشجيرية البيوتين والأجسام المضادة كوكتيل شركة ميلتيني بيوتيك 130-100-875 مقايسة تكاثر الخلايا التائية طقم عزل الخلايا التائية CD4 + شركة ميلتيني بيوتيك 130-104-454 مقايسة تكاثر الخلايا التائية CFSE بيو ليجند 423801 مقايسة تكاثر الخلايا التائية كاشف حجب FcR شركة ميلتيني بيوتيك 130-100-875 مقايسة تكاثر الخلايا التائية الميكروبيدات المضادة للبيوتين شركة ميلتيني بيوتيك 130-104-454 مقايسة تكاثر الخلايا التائية حقنة 1 مل BD Biosciences 309626 مقايسة تكاثر الخلايا التائية جيش صرب البوسنه شركة سيجما ألدريتش أ 2058 مقايسة تكاثر الخلايا التائية EDTA ثيرموفيشر العلمي 15575020 مقايسة تكاثر الخلايا التائية عمود LS شركة ميلتيني بيوتيك 130-042-401 مقايسة تكاثر الخلايا التائية مرشح ما قبل الفصل شركة ميلتيني بيوتيك 130-095-823 مقايسة تكاثر الخلايا التائية كولاجيناز د شركة سيجما ألدريتش 11088858001 مقايسة تكاثر الخلايا التائية HBSS ثيرموفيشر العلمي 14025076 مقايسة تكاثر الخلايا التائية ببتيد البيضا (OVA) 323-329 شركة سيجما ألدريتش [أو1641] مقايسة تكاثر الخلايا التائية