مقالة منهجية

اختبار جزيئي لقياس فيروسات الأنفلونزا A و B

857 مشاهدات

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: Otto ، C. C. et al. ، الكشف الجزيئي السريع والتمايز بين فيروسات الأنفلونزا A و B.J. Vis. Exp. (2017)

يوضح الفيديو اختبارا لقياس فيروسات الأنفلونزا A و B. يستخدم هذا الاختبار تضخيم نوكلياز داخلي مع بادئات خاصة بالإنفلونزا والكشف عن الهدف باستخدام مجسات المنارة الجزيئية.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تنطوي على جمع العينات وفقا لإرشادات IRB الخاصة بالمعهد.

1. قبل تشغيل الفحص

ملاحظة: تمت الموافقة على اختبار الإنفلونزا A و B لعينات مسحة البلعوم الأنفي والمسحات الأنفية البلعومية المخزنة في وسائط النقل الفيروسي. يتم تضمين المسحات في المجموعة ويجب استخدامها للحصول على الأداء الأمثل. ومع ذلك ، يمكن أيضا استخدام الحرير الصناعي أو الرغوة أو المسحات المتدفقة أو مسحات الأنف المصنوعة من البوليستر لجمع عينات مسحة الأنف.

  1. لجمع عينة من مسحة الأنف ، أدخل المسحة في فتحة الأنف التي تحتوي على التصريف الأكثر وضوحا أو الأكثر ازدحاما. مع الدوران اللطيف ، ادفع المسحة إلى فتحة الأنف حتى تتحقق المقاومة ، وقم بتدويرها عدة مرات على جدار الأنف قبل إزالتها ببطء من فتحة الأنف. قم بتخزين المسحات ونقلها في قوارير تحتوي على 3 مل من وسائط النقل الفيروسي (VTM).
    ملاحظة: يجب إيلاء اهتمام دقيق لجمع العينات المناسبة لأن جمع العينات غير الكافي قد يؤدي إلى نتائج خاطئة. < / > ملاحظة: يجب اختبار عينات المسحة في أقرب وقت ممكن بعد جمعها. ومع ذلك ، يمكن تخزينها في درجة حرارة الغرفة لمدة تصل إلى ساعتين أو تبريدها عند 2-8 درجات مئوية لمدة تصل إلى 24 ساعة إذا لم يكن الاختبار متاحا على الفور. تعتبر العينات التي تم جمعها حديثا مثالية لأداء الاختبار الأمثل. قد تؤدي معالجة العينات وتخزينها و / أو نقلها بشكل غير صحيح إلى نتائج خاطئة.
    ملاحظة: كإجراء احترازي ، يجب على الأفراد الذين يجرون هذا الاختبار التعامل مع جميع العينات على أنها يحتمل أن تكون معدية باتباع الاحتياطات العالمية عند التعامل مع العينات.
  2. أحضر جميع العينات إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاختبار.
    ملاحظة: جميع مكونات الاختبار للاستخدام الفردي فقط ولا ينبغي استخدامها لإجراء اختبارات متعددة. لا تخلط مكونات المجموعة من أرقام دفعات مختلفة. لا تستخدم كواشف المجموعة بعد تاريخ انتهاء صلاحيتها.
  3. أحضر جهاز استقبال العينة الأزرق إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاختبار. يمكن اختبار قاعدة الاختبار البرتقالية دون الحاجة إلى التسخين إلى درجة حرارة الغرفة.
  4. اترك جميع قطع الاختبار في غلاف القصدير حتى قبل الاستخدام مباشرة. قم بتشغيل الجهاز بالضغط على زر الطاقة الموجود على جانب الجهاز. أدخل معرف المستخدم واضغط على "موافق".

2. تشغيل الاختبار

  1. لبدء عملية الاختبار ، المس "تشغيل الاختبار" على شاشة العدادات. أدخل معرف المريض باستخدام لوحة المفاتيح التي تظهر على الشاشة أو ماسح الباركود واضغط على "موافق". افتح الغطاء وأدخل قاعدة الاختبار البرتقالية في حامل قاعدة الاختبار البرتقالي.
  2. تأكد من عرض الاختبار الصحيح على الشاشة واضغط على "موافق". أدخل جهاز استقبال العينة الأزرق في حامل مستقبل العينة الأزرق.
    ملاحظة: لا تفتح جهاز استقبال العينة قبل وضعه في الجهاز لأن هذا سيمنع المخزن المؤقت للشطف من الوصول إلى درجة حرارة التشغيل الصحيحة وقد يؤثر على أداء الاختبار.
  3. انتظر حتى يتم تسخين جهاز استقبال العينة. عندما يطلب منك الجهاز ، قم بإزالة ختم القصدير وضع مسحة المريض لفحصها في جهاز استقبال العينة.
    ملاحظة: عند إزالة الرقاقة، ضع إصبعين على حافة جهاز استقبال العينة للتأكد من بقائها في مكانها.
  4. امزج المسحة بقوة في السائل لمدة 10 ثوان ، واضغط على رأس المسحة على جانب جهاز استقبال العينة أثناء مزجها للمساعدة في إخراج العينة من المسحة. اضغط على "موافق" للمتابعة. إذا تم تخزين مسحات الاختبار في وسط نقل فيروسي ، فقم بتدوير VTM لمدة 10 ثوان ثم أضف 200 ميكرولتر إلى جهاز استقبال العينة.
  5. اضغط على خرطوشة النقل البيضاء في جهاز استقبال العينة الأزرق. استمر في الضغط على جهاز استقبال العينة حتى يرتفع المؤشر البرتقالي.
  6. ارفع خرطوشة النقل ثم قم بتوصيلها بقاعدة الاختبار. لاحظ نزول المؤشر البرتقالي بمجرد توصيل نقل الخرطوشة بشكل صحيح. أغلق الغطاء ولا تفتح حتى تظهر رسالة "اكتمل الاختبار" على الشاشة.
فئة < p = "jove_title" >3. مراقبة الجودة (QC)

  1. المس "تشغيل اختبار مراقبة الجودة" على الشاشة الرئيسية. حدد اختبار مراقبة الجودة المراد تشغيله. تأكد من نوع الاختبار لمطابقة عينة مراقبة الجودة المخصصة للاختبار عن طريق لمس "موافق" واتباع المطالبات التي تظهر على الشاشة لإكمال الاختبار.
< p class = "jove_title" >4. تفسير النتائج

  1. بعد اكتمال تشغيل الاختبار ، راقب نتائج الاختبار المعروضة على الشاشة مع تفسيرات لوجود الأنفلونزا A و B والأنواع الفرعية غير المعروفة. بالنسبة للنتائج غير الصالحة، كرر الاختبار.
فئة

5. الصيانة والتنظيف

  1. نظف الجهاز ومنطقة المقعد المحيطة به يوميا باستخدام 70٪ إيثانول أو 10٪ محلول مبيض. رش محلول التنظيف على قطعة قماش مبللة وخالية من النسالة لتنظيفها. لا تصب المحاليل مباشرة على الجهاز.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات Alere i Instrument أليري NAT-000 (عالمي) ، NAT-024 (الولايات المتحدة) طقم اختبار Alere i Influenza A & B 24 أليري 425-000 (عالمي) ، 425-024 (الولايات المتحدة) Alere i ماسح الباركود أليري EQ001001 طابعة Alere العالمية أليري 55115 (عالمي) ، alereiprinter (الولايات المتحدة) ماصة دقيقة 200 ميكرولتر 200 ميكرولتر أطراف ماصة يمكن التخلص منها وسيط النقل الفيروسي ريميل M4-RT

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة