توصيل الأجسام المضادة المعززة بالحمل الحراري إلى دماغ الفأر

الملخص

المصدر: Beffinger، M.، et al. توصيل الأجسام المضادة إلى دماغ الفئران عن طريق التوصيل المعزز بالحمل الحراري. J. Vis. Exp. (2019).

يوضح هذا الفيديو تقنية التوصيل المعزز بالحمل الحراري (CED) لتوصيل الأجسام المضادة إلى دماغ الفأر. تتعرض جمجمة الفأر المخدر ، ويتم إنشاء ثقب نتوء في المنطقة المستهدفة لتوصيل الأجسام المضادة. يتم إدخال قسطرة متدرجة تحتوي على أجسام مضادة في الموقع المستهدف ، وعبر مضخة التسريب ، يتم إنشاء تدرج ضغط لتوصيل الأجسام المضادة بمعدل متحكم فيه.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تحضير القسطرة الخطوة

1. تحضير أنبوب السيليكا المنصهر لخطوة القسطرة
   1. قطع الشعيرات الدموية المدمجة من السيليكا بقطر داخلي يبلغ 0.1 مم وسمك الجدار 0.0325 مم بطول 30 مم.
   2. افحص الأنبوب بحثا عن الشقوق وتلميع الأطراف بالحرارة باستخدام microforge للتأكد من أن فتحات الأنابيب لها سطح أملس.
2. تثبيت الأنبوب الداخلي في إبرة معدنية
   1. قم بتركيب إبرة 27 جم على حقنة سعة 10 ميكرولتر وضع المحقنة في روبوت تجسيمي.
   <....

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1: رسم تخطيطي يصور منطقة تطبيق المادة اللاصقة. يتم إدخال الجزء العلوي من 10 مم من أنابيب السيليكا المنصهرة في الإبرة المعدنية. ضع الغراء على الأنبوب مقاس 10 مم بدءا من طرف الإبرة المعدنية.

....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات حقنة 10 ميكرولتر هاملتون 7635-01 27 جم إبرة نهاية حادة هاملتون 7762-01 أغاروز بروميجا في 3121 أتيباميزول يانسن شمع العظام براون 1029754 بوبرينورفين Indivior Schweiz AG كاربروفين فايزر إيه جي لقم ثقب أسنان ، فولاذ ، مقاس ISO 009 هاجر ومايزنجر 1RF009 الإيثانول 100٪ Reuss-Chemie AG 179-VL03K-/1 الفنتانيل هيلفيفارم إيه جي FITC-Dextran, 2000 كيلو دالتون سيجما ألدريتش FD2000S فلومازنيل لاباتيك فارما إيه جي فورمالدهيد سيجما ألدريتش F8775-500 مل غراء سيانواكريليت عالي اللزوجة ميغروس محلول اليود موندي فارما ميديتوميدين أوريون فارما إيه جي ميكروفورج ناريشيجي MF-900 ميدازولام روش فارما إيه جي مرهم العيون باوش + لومب فيتامين أ بلاش برنامج تلفزيوني ثيرموفيشر العلمي 10010023 جسم مضاد للماعز متعدد النسيلة مضاد للفئران IgG (H + L) إلى جانب Alexa Fluor 647 جاكسون إيمونو المشارط براون BB518 القطر الداخلي لأنابيب السيليكا 0.1 مم ، سمك الجدار 0.0325 مم بوستنوفا Z-FSS-100165 إطار تجسيمي للفئران ستويلتينج 51615 [م] الروبوت التجسيمي نجم العصبي روبوت الحفر والحقن سكروز سيجما ألدريتش S0389-500G لاصق الأنسجة الموضعية زويتيس GLUture تريبان بلو ثيرموفيشر العلمي 15250061 الماء بيشسل 1000004