تقنية تصوير التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني في الجسم الحي للكشف عن الأورام في نموذج الفئران باستخدام الأجسام المضادة ذات العلامات الإشعاعية

الملخص

المصدر: Zeglis، B. M.، et al. الاقتران الحيوي والتخليق الإشعاعي ل ⁸⁹أجساما مضادة تحمل علامة Zr-DFO. J. Vis. Exp. (2015).

يوضح هذا الفيديو تقنية تتضمن مترافقا مناعيا مشعا للتصوير في الجسم الحي للورم في نموذج الفأر. عند حقن المقترن المناعي الإشعاعي ، ترتبط الأجسام المضادة للمترافق بمستضد غشائي معين على الخلايا السرطانية. ينبعث المتتبع الإشعاعي للمترافق من البوزيترونات التي تتفاعل مع الإلكترونات المجاورة لإنتاج الطاقة ، والتي يتم اكتشافها بواسطة ماسح التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET) لإنشاء صورة للورم.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. في Vivo التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني باستخدام ⁸⁹Zr-DFO-J591

تنبيه: تتضمن هذه الخطوة من البروتوكول التعامل مع النشاط الإشعاعي ومعالجته. قبل تنفيذ هذه الخطوات ، يجب على الباحثين استشارة قسم السلامة الإشعاعية في مؤسستهم المحلية. يجب اتخاذ جميع الخطوات الممكنة لتقليل التعرض للإشعاع المؤين.

1. في ذكور الفئران العارية الرياضية ، قم بزرع سرطان العقدة الليمفاوية 5 × 10⁶ تحت الجلد في خلايا سرطان البروستاتا (LNCaP) والسماح لها بالنمو إلى 100-150 مم³ xenograft (3-4 أسابيع بعد التلقيح).
2. تمييع ⁸⁹Zr-DFO-J591 المقترن المناعي المشع بتركيز 1.0 ملي Ci/مل في محلول ملحي معقم 0.9٪.
3. حقن 200 ميكرولتر من ^{محلول 89}Zr-DFO-J591 (DFO = ديسفيريوكسامين ، J591 = مستضد غشاء خاص بالبروستاتا [PSMA] يستهدف الجسم المضاد) (200 ميكرو Ci ؛ 7.4 ميجابايت) في الوريد الجانبي للفئران الحاملة للطعم الغريب.
4. في النقطة الزمنية المطلوبة للتصوير (على سبيل المثال ، 12 أو 24 أو 48 أو 72 أو 96 أو 120 ساعة بعد الحقن) ، قم بتخدير الفأر بخليط غاز الأكسجين بنسبة 2٪: الأيزوفلوران.
5. ضع الماوس على سرير الماسح الضوئي المقطعي بالإصدار البوزيتروني للحيوانات الصغيرة وحافظ على التخدير أثناء الفحص باستخدام خليط غاز الأكسجين 1٪ من الأيزوفلوران. قبل وضع على سرير الماسح الضوئي ، تحقق من التخدير باستخدام طريقة قرصة إصبع القدم وقم بتطبيق مرهم العين على عيون الفأر لمنع الجفاف أثناء التخدير.
6. احصل على بيانات PET للماوس عبر مسح ثابت مع ما لا يقل عن 40 مليون حدث متزامن باستخدام نافذة طاقة من 350-700 كيلو فولت ونافذة توقيت مصادفة تبلغ 6 نانوثانية.
7. بعد الانتهاء من الحصول على الصورة ، لا تترك الفأر دون رقابة ، ولا تضعه في قفص مع الفئران الأخرى حتى يستعيد وعيه.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات ب-SCN-Bn-DFO الحلقات الكبيرة ب -705 يحفظ في درجة حرارة -80 درجة مئوية [⁸⁹Zr] Zr-oxalate مختلفة ، بما في ذلك Perkin-Elmer - تحذير: مادة مشعة