مقايسة التألق المناعي للكشف عن مجاميع ألفا سينوكلين في قسم خزعة الجلد

الملخص

المصدر: Vacchi، E.، et al. استهداف مجاميع ألفا سينوكلين في الألياف العصبية الطرفية الجلدية عن طريق فحص التألق المناعي العائم الحر. J. Vis. Exp. (2019).

يوضح هذا الفيديو مقايسة التألق المناعي للكشف عن مجاميع ألفا سينوكلين الخاصة بالأمراض التنكسية العصبية على أقسام خزعة الجلد. يتم استخدام التلوين المناعي العائم الحر لتسمية هيدرولاز الكربوكسيل الطرفي ومجاميع ألفا سينوكلين في الخلايا العصبية الجلدية. تحت المجهر متحد البؤر ، تشير الخلايا ذات التألق من كلا الأجسام المضادة إلى وجود مجاميع ألفا سينوكلين في الخلايا العصبية الجلدية.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تنطوي على جمع العينات وفقا لإرشادات IRB الخاصة بالمعهد ،

< p class = "jove_title" >1. مجموعة خزعة الجلد

1. دع الطبيب المؤهل يقوم بإجراء خزعة الجلد في بيئة سريرية مناسبة.
2. اختر المنطقة لإجراء خزعة الجلد ونظفها بمسحة كحولية.
3. تحضير محلول التخدير مع 1 سم مكعب من الليدوكائين 2٪.
4. مع الإبرة الموازية للمنطقة ، قم بحقن التخدير الموضعي تحت الجلد.
5. بعد التحقق من تأثير التخدير ، خذ الثقب القابل للتصرف مقاس 3 مم وقم بتطبيق ضغط دوراني ودقيق لأسفل لتدويرها لأسفل عبر البشرة والأدمة ، حتى يتم الوصول إلى الدهون تحت الجلد.
6. اسحب اللكمة.
7. استخدم ملقطا يمكن التخلص منه لس....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 5G4 (مضاد للإنسان αSyneclein 5G4) Analytik جينا Roboscreen 847-0102004001 الماوس أحادي النسيلة AlexaFluor 488 الماعز المضاد للأرانب IgG إنفيتروجين 1971418 2 ملغ / مل AlexaFluor 594 الماعز المضاد للفأر IgG إنفيتروجين 1922849 2 ملغ / مل محلول فوسفات الهيدروجين ثنائي الصوديوم ميرك ميليبور 106586 الإيثيلين جلايكول سيجما ألدريتش 324558 الجلسرين سيجما ألدريتش جي 7757 ل-يسين أحادي هيدروكلوريد سيجما ألدريتش L5626 بارافورمالدهيد ألدريتش كيمياء 441244 PGP9.5 أبكام أب15503 أرنب متعدد النسيلة كلوريد الصوديوم سيغما S3014 ثنائي هيدروجين فوسفات الصوديوم أحادي الهيدرات ميرك ميليبور 106346 دوريات الصوديوم (ميتا) سيجما ألدريتش S1878 قاعدة تريزما سيغما [ت1503] تريتون X-100 سيجما ألدريتش X100 فيكتاشيلد مختبرات ناقلات إتش -1000 تصاعد الوسط