اختبار في المختبر لتقييم السمية الخلوية للخلايا القاتلة الطبيعية ضد الخلايا السرطانية

الملخص

المصدر: Baik ، C. H. ، et al. اختبار السمية الخلوية القائم على اللوحة لتقييم وظيفة التحلل الخلوي الطبيعي للخلية القاتلة المشيمية للفئران. J. Vis. Exp. (2019)

يوضح هذا الفيديو إجراء اختبار إطلاق نازعة هيدروجين اللاكتات لتحديد السمية الخلوية للخلايا القاتلة الطبيعية (NK) ضد الخلايا السرطانية المستهدفة. يحدد الاختبار إطلاق إنزيم نازعة هيدروجين اللاكتات السيتوبلازمي من الخلايا السرطانية عن طريق قياس امتصاص المنتج ذو اللون الأحمر المتكون.

البروتوكول

1. فحص السمية الخلوية: بروتوكول الفحص

1. استخدم قاعا مستديرا ، لوحا معالجا بثقافة 96 بئرا لإعداد اللوحة كما هو مقترح في الجدول 1. يعرض هذا الجدول عناصر التحكم التجريبية و 3 مجموعات من الأعمدة التجريبية NK. يمكن توسيع هذا إلى ما مجموعه 10 أعمدة تجريبية من NK في صفيحة مكونة من 96 بئرا.
2. قم بالطرد المركزي للوحة الفحص عند 250 × جم لمدة 4 دقائق للتأكد من أن المستجيب والخلايا المستهدفة على اتصال. احتضان اللوحة المكونة من 96 بئرا لمدة 5 ساعات في حاضنة غرفة مرطبة عند 37 درجة مئوية ، 5٪ ثاني أكسيد_{الكربون 2} لتحقيق اتصال وافر بين الخلايا المستهدفة والمستجيبة وتحلل الخلية المستهدفة بواسطة الخلايا المستجيبة.
   ....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 96 بئر لوحة زراعة الأنسجة سيلتريت هاتف: 229190 معقم ، قاع مستدير مكشطة الخلية صياد 8100241 Cytotox 96 مجموعة فحص السمية الخلوية غير المشعة بروميجا جي 1780 RPMI جيبكو 11875135 1640 متوسط خلية YAC-1 ATCC TIB-160