يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

اختبار في المختبر لفحص الإنترفيرون كمثبطات قوية لنمو فيروس زيكا

712 مشاهدة

⸱

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

المصدر: Contreras، D. et al. ، نظام زراعة الخلايا المعدية بفيروس زيكا والتأثير الوقائي في المختبر للإنترفيرون. J. Vis. Exp. (2016)

يوضح الفيديو فحصا في المختبر لفحص الإنترفيرون ذو النشاط المضاد للفيروسات ضد فيروس زيكا، وهو أحد مسببات الأمراض البشرية. داخل الخلية المضيفة ، يخضع فيروس زيكا للتكاثر عند الاستيعاب ، ويصيب الخلايا المجاورة ويخلق مناطق مميزة أو لويحات فيروسية. الإنترفيرون من النوع الأول ، الذي يعمل كعامل مضاد للفيروسات ، يعيق تكاثر الفيروس ، وبالتالي يمنع تكوين لويحات فيروسية في الطبقة الأحادية للخلية المضيفة.

البروتوكول

1. فحص مكتبة السيتوكين ضد عدوى فيروس زيكا

  1. بذور خلايا Vero الساذجة في 1 × 105 خلايا لكل بئر باستخدام صفيحة 12 بئر. بمجرد توصيل الخلايا (بعد 6 ساعات من البذر) ، أضف كل سيتوكين في
    التركيزات المشار إليها في التكرارات البيولوجية (حجم 2 مل / بئر). قم بتضمين التحكم في السيارة (PBS) وحدها.
  2. بعد 12 ساعة من العلاج ، قم بإجراء عدوى زيكا الفيروسية (وزارة الداخلية 0.1 في 400 ميكرولتر لكل بئر). قم بتضمين آبار التحكم السلبي بدون عدوى (وهمية).
  3. بعد 4 ساعات من الإصابة، يستبدل اللقاح الفيروسي بوسائط معالجة بالسيتوكين (2 مل). احتضان الخلايا عند 37 درجة مئوية لمدة 44 ساعة إضافية.
  4. بعد 48 ساعة من الإصابة ، قم بحساب اللويحات الفيروسية باستخدام مجهر تباين الطور واحصل على صور تمثيلية للخلايا المصابة بتكبير 40 مرة (الشكل 1).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

figure-results-1
الشكل 1: تظهر الإنترفيرونات نشاطا فيروسيا قويا مضادا لزيكا. (أ) رسم بياني يوضح تعديل نمو فيروس زيكا بواسطة السيتوكينات المختلفة مقارنة بالتحكم في المركبات. يتم عرض القيم المتوسطة والانحراف المعياري في الرسم البياني الشريطي. أظهرت الإنترفيرونات تثبيط معتد به إحصائيا لتكاثر فيروس زيكا (قيمة p <0.05). (B وC) صور تباين المرحلة للخلايا...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات خط خلية فيرو ATCC CCL-81 سلالة زيكا الفيروسية PRVABC59 مراكز السيطرة على الأمراض والوقاية منها (CDC) IL-6 بيبروتك 200-06 IL-1 ألفا بيبروتك 200-01 أ TNF-alpha بيبروتك 300-01 أ إنترفيرون ألفا أ أنظمة البحث والتطوير 11100-1 إنترفيرون بيتا بيبروتك 300-02 قبل الميلاد إنترفيرون جاما بيبروتك 300-02 جهاز طرد مركزي 5415R إيبندورف 5415 ص جهاز طرد مركزي 5810R إيبندورف 5810 ص نيكون Eclipse Ti مجهر التألق المناعي مع نيكون Intenselight C-HGFI نيكون

استكشف المزيد من المقالات

فحص الإنترفيرونمقايسة اللويحات الفيروسيةخلايا Veroالنشاط المضاد للفيروساتمجهر تباين الطورالمعالجة بالسيتوكيناتتشكل اللويحاتعدوى الخلايا المضيفة