مقالة منهجية

زرع أقطاب كهربائية في قشرة الفأر للتسجيلات الكهربية القشرية

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Dufort-Gervais, et al. تسجيل القشرة الكهربائية لمناطق القشرة الدماغية التي تم التلاعب بها باستخدام فيروس مرتبط بالغدة يستهدف الكوفيلين في الفئران. J. Vis. Exp. (2021)

يوضح هذا الفيديو بروتوكولا لزرع أقطاب كهربائية قشرية في القشرة الدماغية للفأر لتسجيل الإشارات الكهربائية استجابة للفيروسات المرتبطة بالغدة التي تستهدف وتتلاعب بتعبير الكوفيلين.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
فئة

1. زرع قطب كهربائي ECoG / EMG

  1. باستخدام ملقط كيلي مستقيم ، قم بربط قطب كهربائي ECoG واحد ببطء (بسلك ذهبي مستقيم) في المحور الرأسي في الفتحة حيث تم حقن AAV. اترك ما لا يقل عن 2.5 مم من المسمار خارج الجمجمة لتقليل الضرر الذي يلحق بالجافية والقشرة الدماغية (أي لعمق تقريبي يبلغ 1.1 مم من سطح الجمجمة. الشكل 1 د).
  2. ضع علامة على موضع قطب ECoG الخلفي والقطب المرجعي على الجمجمة بقلم عند هذه الإحداثيات: القطب الخلفي (القشرة البصرية) 1.5 مم جانبي من اليمين إلى خط الوسط و 1.5 مم أمام لامدا ، القطب المرجعي (القشرة الحسية الجسدية) 2.6 مم جانبي من اليمين إلى خط الوسط و 0.7 مم خلف البرجما. أيضا ، حدد موضع ثلاثة براغي صيانة (تعمل كمثبتات بين الجمجمة والأسمنت السني لترسيخ مونتاج الرأس) على نصف الكرة الأيسر بدون إحداثيات محددة ، ولكن بعيدا قدر الإمكان عن بعضها البعض وعن أقطاب ECoG.
  3. اخترق الجمجمة بعناية في الموضع المحدد للأقطاب الكهربائية الأخرى ومسامير التثبيت باستخدام لقمة الثقب 0.7 مم. اخترق في اتجاه عمودي على سطح الجمجمة لكل برغي (أي المحور الرأسي للقطب الخلفي ولكن بزاوية من المحور الرأسي للمواقع الأخرى). اغسل الجمجمة المثقوبة بمحلول بوفيدون اليود بنسبة 10٪ ، وسد الثقوب بقطع صغيرة ملفوفة من مساحات المهام الحساسة قبل تثبيت البراغي لمنع النزيف والتلوث.
  4. باستخدام ملقط كيلي المستقيم ، قم بربط مسامير الصيانة في نصف الكرة الأيسر ثم قم بربط آخر قطبين كهربائيين في نصف الكرة الأيمن. تأكد من الربط بنفس الزاوية التي تم بها ثقب الثقوب وترك ما لا يقل عن 2.5 مم من كل برغي خارج الجمجمة (الشكل 1D).
    ملاحظه: لزيادة صلابة المونتاج النهائي وجودة الإشارات الفيزيولوجية الكهربية ، احرص على عدم لمس أي مسامير عند تثبيت الإشارات التالية.
  5. ضع بضع قطرات صغيرة من الأسمنت السني في وسط المساحة الشبيهة بالحلقة داخل البراغي.
  6. غطي عيون الفئران ، وضعي الضوء لمدة 3-5 دقائق للمساعدة في تصلب الأسمنت. بمجرد تثبيت أقطاب مخطط كهربية العضل بإحكام ، قم بتغطية قاعدة أقطاب ECoG وقاعدة براغي التثبيت بأسمنت الأسنان لتشكيل محيط على شكل تاج. غطي عيون الفئران ، وضعي الضوء لمدة 3-5 دقائق للمساعدة في تصلب الأسمنت.
    ملاحظه: لا تضع الأسمنت على أطراف قطب ECoG و EMG (السلك الذهبي الذي سيتم لحامه بالموصل) أو على الجلد.
  7. املأ مركز المونتاج بأسمنت الأكريليك المختلط مسبقا. أثناء تصلب الأسمنت ، قم بإزالة المشابك الجراحية الأربعة التي تمسك الجلد (واغسلها على الفور بمساحات مهمة دقيقة).
    ملاحظه: لا تضع الأسمنت على أطراف قطب ECoG و EMG (السلك الذهبي الذي سيتم لحامه بالموصل) أو على الجلد.
  8. خياطة الجلد في الجزء الخلفي والأمامي من المونتاج حتى لا تتعرض الجمجمة (ولكن تجنب شد الجلد كثيرا) باستخدام إبرة خياطة (13 مم 3/8 ج) وشعيرات أحادية اصطناعية قابلة للامتصاص.
  9. أمسك الموصل فوق المونتاج باستخدام ملقط منحني ، وقم بمحاذاة السلك الذهبي للأقطاب الكهربائية بعناية مع دبابيس الموصل. أطراف قطب اللحام إلى دبابيس الموصل مع مكواة اللحام.
    ملاحظه: استمر بسرعة لتجنب ارتفاع درجة الحرارة وتلف الأنسجة القشرية. تأكد من أن كل قطب كهربائي يتلامس جيدا مع دبوس الموصل المقابل ، وأن الأقطاب الكهربائية غير متصلة ببعضها البعض.
  10. قم بإزالة الماوس من الإطار التجسيمي. قم بتغطية المساحة الفارغة بين الموصل والرأس بأسمنت أكريليك مختلط مسبقا عن طريق تغطية جميع التوصيلات بين الأقطاب الكهربائية ودبابيس الموصل.
    ملاحظة: تجنب تسلل الأسمنت داخل الموصل عن طريق الضغط على الماوس مع الموصل فوق الرأس (الرأس مستقيم وليس مائل).
  11. قم بوزن الماوس وضعه في قفص نظيف (يفضل أن يكون مزودا بغطاء غير متشابك) على وسادة تسخين (غلاف فردي لتجنب تلف مونتاج الرأس). راقب بانتظام ، وقم بإعطاء 0.1 مجم / كجم من البوبرينورفين تحت الجلد عند الاستيقاظ ، وبعد 12 ساعة إذا ظهرت على علامات الألم (على سبيل المثال ، وضعية غير طبيعية ، وعينين محدقة).
    ملاحظه: يجب ألا تتجاوز زيادة الوزن بالنسبة لوزن ما قبل الجراحة 1.5 جرام.

2. التسجيلات

  1. فئران المنزل بشكل فردي لتجنب تلف مونتاج الرأس نتيجة للعناية المتبادلة بالإضافة إلى تلف وتشابك كبلات التسجيل.
    ملاحظه: بالنسبة لهذا البروتوكول ، تم إيواء الفئران مع إمكانية الوصول إلى الطعام والماء ومكعب خشبي ، وتم إجراء مراقبة يومية.
  2. قم بتوصيل الفئران بكابلات التسجيل بعد أسبوعين من الجراحة للتكيف مع ظروف الكابلات.
  3. سجل إشارات ECoG لمدة 24 ساعة (أو أطول / أقصر حسب أسئلة البحث).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1: إعداد مكونات مونتاج ECoG / EMG ومثال تمثيلي لوضع قطب ECoG. (أ) قطب كهربائي ECoG: يتم دمج سلك ذهبي بطول 4 مم وقطر 0.2 مم (غير معزول) على رأس برغي مغطى بالذهب (قطر رأس 1.9 مم ، قطر خيط رئيسي 1.14 مم ، طول إجمالي 3.6 مم) باستخدام لحام خال من الرصاص. (ب) أقطاب كهربية الكهربية الكهربية الكهربية الكهربية (1.5 و 2 سم) منحنية لاحتضان منحنى الجمجمة حتى عضل...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 21 جرام إبرة تيرومو NN-2125R موصل 6 قنوات Distrelec 300-93-672 الاستبدال المحتمل للموصل المتوقف أعلاه C57BL6 / J الفئران مختبر جاكسون 000664 | ب 6 التي يتم تربيتها في الموقع بلورونيك F-68 خافض للتوتر السطحي غير أيوني سلك ذهبي بقطر 0.2 مم دلتا العلمية 920-862-41 غير معزول حقنة هاميلتون (10 ميكرولتر) فيشر ساينتيك 14815279 مضخة حقنة التسريب CMA 402 جهاز هارفارد CMA8003110 قنية الحقن 28 جرام بلاستيك واحد C313L-SPCL إيزوفلوران باكستر CA2L9100 الكيتامين (10 مجم / مل) ساندوز 4550 لحام خال من الرصاص هدف SN100C مرهم تشحيم العين أليرجان 210889 PE 50 قسطرة جدار رقيق بلاستيك واحد C232CT مسامير التنصت الذاتية ذات رأس fillister المسطح موريس FF00CE125 القطب ECoG مغطى بالذهب; البعد: قطر الرأس 1.9 مم ، قطر الخيط الرئيسي 1.14 مم ، طول 3.6 مم لحام الحديد ويلر WES51 حقنة 1 مل دينار بحريني 309659 الانتهازي جهاز هارفارد 72-9063 زيلازين (20 مجم / مل) باير 2169592 بوبرينورفين (0.3 مجم / مل) سيفا 57133-02 ملقط منحني أدوات العلوم الجميلة 11001-12 مساحات المهام الدقيقة كيمتيك 34120 الاسمنت الأكريليك للأسنان ييتس موتلويد 44115 م ملقط كيلي أدوات العلوم الجميلة 13002-10 أكريليك سائل ييتس موتلويد 44119 مونوكريل بالإضافة إلى إبرة خياطة 13 مم 3 / 8c ليرة القطع إيثيكون MCP494 بروفيدون اليود 10٪ المستهلكات الثلاثية 10-8208 RelyX Unicem 2 ، أسمنت راتنج لاصق A2 3 م 56849

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

AAV

مقالات ذات صلة