مقالة منهجية

قياس إمكانات عمل العضلات المركبة في عضلات الأطراف الأمامية للفأر في الجسم الحي

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Pollari ، E. et al. ، في الجسم الحي قياس الفيزيولوجيا الكهربية لإمكانات عمل العضلات المركبة من الأطراف الأمامية في نماذج الفئران لتنكس الخلايا العصبية الحركية.J. Vis. Exp. (2018).

< p class = "jove_content">يوضح هذا الفيديو تقنية في الجسم الحي لقياس إمكانات عمل العضلات المركبة (CMAP) في الفئران. يحدد خطوات إعداد الأقطاب الكهربائية ، وتحفيز الخلايا العصبية الأمامية التي تغذي ألياف العضلات ، وتسجيل استجابات العضلات. تقوم هذه التقنية بتقييم إزالة الميالين العصبي وفقدان الخلايا العصبية الوظيفية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

< p class = "jove_title" >1. تحضير والتخدير

  1. تحفيز التخدير في الفأر مع استنشاق الأيزوفلوران / الأكسجين. استخدم 4٪ من الأيزوفلوران لتحريض التخدير و 2-3٪ للصيانة عند تدفق الأكسجين 2.5 لتر / دقيقة. اضبط نسبة الأيزوفلوران للحفاظ على التخدير وفقا لحالة الفأر ، أي أن الفئران الصغيرة والضعيفة تتطلب مخدرا أقل. تأكد من التخدير الكافي ، على سبيل المثال ، عن طريق الضغط الخفيف على وسادة المشي الخلفية للتحقق من عدم وجود منعكس انسحاب الألم.
  2. تحكم في درجة حرارة جسم الماوس باستخدام لوحة تسخين ثرموستاتي عند 37 درجة مئوية لمنع انخفاض درجة حرارة الجسم أثناء التخدير.
  3. قم بتركيب الماوس مع مخروط الأنف للحفاظ على التخدير. تأكد من أن لديه ما يكفي من الأكسجين عن طريق التحقق من أن مخروط الأنف لا يسد الشعب الهوائية وأن يتنفس بثبات.
  4. أثناء التسجيل ، راقب ما إذا كان الفأر مخدرا بشكل كاف من خلال مراقبة معدل التنفس (حوالي 1 هرتز في التخدير) وعدم وجود منعكس انسحاب عند الضغط الخفيف. قم بزيادة تركيز الأيزوفلوران يدويا إذا لم يكن التخدير عميقا بدرجة كافية.
  5. بعد القياسات ، اترك الماوس يتعافى على لوحة التسخين أو في دفء مصباح الأشعة تحت الحمراء حتى يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الاستلقاء القصي ، لمدة 2-5 دقائق تقريبا. لا تترك الفأر دون رقابة وبصحبة الفئران الأخرى حتى يتعافى تماما من التخدير.
< p class = "jove_title" >2. قياس CMAP في الأطراف الأمامية

  1. استخدم أقطاب الإبرة 27 G لقياسات CMAP الأمامية. انظر الشكل 1 للاطلاع على الأماكن الموصى بها لتحديد موضع القطب.
  2. ضع الأقطاب الكهربائية على الأطراف الأمامية على النحو التالي.
    1. ضع الماوس على وسادة التسخين في وضع الاستلقاء واستخدم شريطا لاصقا لتمديد كلا الطرفين الأماميين على جانبي الجسم (الشكل 1 ب).
    2. ضع الأقطاب الكهربائية المحفزة (1 = أنود و 2 = كاثود) تحت الجلد على جانبي الطرف الأمامي لتتماشى مع عصب الضفيرة العضدية. ارفع الجلد لإدخال الإبرة بشكل عمودي عبر الجلد وادفع ما يقرب من 5 مم من الإبرة تحت الجلد دون ثقب العضلات الأساسية.
    3. ضع قطب التسجيل (3) تحت الجلد فوق العضلة ذات الرأسين العضدية عن طريق رفع الجلد. ضع القطب المرجعي (4) على وسادات المشي بعمق 3 مم بزاوية 30 درجة. ضع القطب الأرضي (5) تحت الجلد على جانب الماوس.
      ملاحظه: الأقطاب الكهربائية على مقربة من بعضها البعض في هذا الإعداد. امنع الأقطاب الكهربائية من ملامسة بعضها البعض لأن هذا يشوه التسجيل.

3. الحصول على البيانات

  1. ابدأ التحفيز بالضغط على زر التحفيز المتكرر في وحدة التحكم وأدر مقبض التحكم في الشدة لزيادة التحفيز. تحفيز جميع المحاور باستخدام 1 نبضة / ثانية مع مدة تحفيز 0.1 مللي ثانية. حدد التكرار والمدة الصحيحين من القوائم المنسدلة في البرنامج.
  2. للوصول إلى المحفزات فوق القصوى (5-20 مللي أمبير ؛ في ظروف إزالة الميالين حتى 60 مللي أمبير) ، قم بتطبيق محفزات متزايدة عن طريق تدوير مقبض التحكم في الشدة حتى يتوقف سعة استجابة CMAP عن الزيادة. من هناك ، قم بزيادة التحفيز بنسبة 20٪ لضمان وصول سعة CMAP إلى أقصى استجابة. قم بإنهاء التحفيز بالضغط على زر التحفيز المتكرر مرة أخرى.
  3. استخدم أداة العلامة للإشارة إلى النقاط التالية في التسجيل: بدء التحفيز ، وبدء الاستجابة ، والحد الأقصى للذروة الإيجابية ، والحد الأقصى للذروة السلبية (الشكل 2).
  4. حدد زمن الوصول (بالمللي ثانية) كتأخير من بدء المنبه إلى بدء الاستجابة (الشكل 2). حدد بدء الاستجابة على أنه أقرب نقطة يبدأ فيها السعة في الزيادة. استخدم زمن الانتقال لتقييم إزالة الميالين في المحاور.
  5. قم بقياس السعة (mV) من الحد الأقصى للسالب إلى الحد الأقصى للذروة الموجبة (الشكل 2). استخدم حجم السعة لربط عدد المحاور الوظيفية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1. تحديد موضع الأقطاب الكهربائية لقياسات CMAP.يتم تقديم موضع الأقطاب الكهربائية للخلف (A) والأطراف الأمامية (B). يتم ترقيم الأقطاب الكهربائية على النحو التالي: 1: الأنود و 2: أقطاب محفزة للكاثود ، 3: قطب تسجيل نشط ، 4: قطب مرجعي ، و 5: قطب تأريض.

< p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات قطب إبرة تحت الجلد قابل لإعادة الاستخدام ، Pl / Ir تكنوميد TE / S61-434 يبلغ طول الإبرة 13 مم (0.51 بوصة) وقطرها 0.4 مم (27 جم) نظام التشخيص الكهربائي Natus Natus طب الأعصاب الترا برو S100 جهاز EMG التازر Natus طب الأعصاب الإصدار 20.1.0.100 برنامج EMG ل UltraPro S100 وحدة تحكم Physitem روتاشر ميديكال جي إم بي إتش TCAT-2LV وسادة التدفئة كومبي بيطري قاعدة التخدير نظام مقياس الجريان الرقمي مع TEC 3 Vaporize روثاشر وشريكه السيرة الذاتية 30-301-D مبخر الأيزوفلوران ومقياس الجريان إيزو فيت 1000 مجم / جم بيرامال للرعاية الصحية في المملكة المتحدة المحدودة ا ف ب / المخدرات / 220/96 إيزوفلوران الفئران SOD1-G93A مختبر جاكسون #002726 ALS tg وغير tg تتحكم في القمامة ، الإناث فقط الفئران PrP-hFUS-WT3 مختبر جاكسون #017916 ALS tg وغير tg تتحكم في القمامة ، جميع المجموعات متوازنة للذكور والإناث C57BL / 6Jax الفئران مختبر جاكسون #000664 الفئران غير tg لبضع المحور ، ذكور وإناث الفئران C61-PMP22 تم التبرع بخط الفأر بسخاء من قبل البروفيسور م. سيريدا (معهد ماكس بلانك للطب التجريبي ، غوتنغن ، ألمانيا). CMT tg وغير tg يتحكم في القمامة ، جميع المجموعات متوازنة للذكور والإناث

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة