مقالة منهجية

إنشاء مشبك رقعة كامل الخلية للتسجيل الفيزيولوجي الكهربي من الخلايا العصبية الحسية Vomeronasal

يوليو 8, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Ackels، T.، et al. تحليل فسيولوجي متعمق لمجموعات الخلايا المحددة في شرائح الأنسجة الحادة لعضو الفأر الصوتي.

يصف فيديو البروتوكول إنشاء مشبك تصحيح خلية كاملة للتسجيل الفيزيولوجي الكهربي من الخلايا العصبية الحسية للعضو الصوتي (VNO) في الفئران. يتم وضع شريحة VNO الإكليلية مع الخلايا العصبية الحسية المسماة بالفلورسنت في إعداد التسجيل. يتم تصحيح الخلايا العصبية المسماة بماصة تسجيل في تكوين خلية كاملة للتسجيل الفيزيولوجي الكهربي استجابة للمنبهات الكيميائية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تنطوي على جمع العينات وفقا لإرشادات IRB الخاصة بالمعهد.

1. إعداد الحل

  1. تحضير محلول خارج الخلية S1: 4- (2-هيدروكسي إيثيل) بيبيرازين -1-حمض إيثان سلفونيك (HEPES) محلول خارج الخلية المخزن يحتوي على (بالملليمتر) 145 كلوريد الصوديوم ، 5 كيلولوسيلتر ، 1 كلوريد الكالسيوم2 ، 1 ملغ كلوريد2 ، 10 هيبيس ؛ الرقم الهيدروجيني = 7.3 (معدل باستخدام هيدروكسيد الصوديوم) ؛ الأسمولية = 300 مللي أسم (معدلة بالجلوكوز).
  2. تحضير محلول خارج الخلية S2: محلول خارج الخلية يحتوي على محلول خارج الخلية (بالملليمتر) 125 كلوريد الصوديوم ، 25 NaHCO3 ،....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >figure-results-1
الشكل 1: تشريح VNO. (أ) منظر جانبي على رأس الماوس لتوضيح الموضع والزاوية التي يتم بها قطع القواطع. (ب) منظر بني يصور أفضل نقطة للاستيلاء على الحنك العلوي وتقشيره (UP). (ج) الرؤية البطنية على كبسولة الغضروف (CC) التي تؤوي VNO وعظم الأصوات (VB) بعد إزالة الفك السفلي والقواطع والحنك. (د) منظر ظهري لكبسولة VNO المقطوعة التي تص.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات المواد الكيميائيه الاغاروز (درجة حرارة منخفضة التبلور) بيكلاب 35-2030 ATP (Mg-ATP) سيجما ألدريتش أ 9187 مكرر (2-هيدروكسي إيثيل) -2-حمض أمينوإيثان سلفونيك (BES) سيجما ألدريتش ب 9879 كلوريد الكالسيوم سيجما ألدريتش سي 1016 حمض رباعي أسيتيك جلايكول الإيثيلين (EGTA) سيجما ألدريتش E3889 الجلوكوز سيجما ألدريتش G8270 GTP (Na-GTP) سيجما ألدريتش 51120 (2-هيدروكسي إيثيل) -1-بيبيرازين إيثان سلفونيك حمض (HEPES) سيجما ألدريتش إتش 3375 كلوريد المغنيسيوم سيجما ألدريتش M8266 كلوريد البوتاسيوم سيجما ألدريتش ص 9333 هيدروكسيد البوتاسيوم سيجما ألدريتش 3564 كلوريد الصوديوم سيجما ألدريتش إس 7653 كربونات هيدروجين الصوديوم سيجما ألدريتش الطراز S5761 هيدروكسيد الصوديوم سيجما ألدريتش إس 8045 الأدوات الجراحية والمواد الاستهلاكية صحن بتري كبير، 90 مم VWR قطع الرأس وتشريح كبسولة VNO صحن بتري صغير ، 35 مم VWR غطاء لتشريح VNO ، طبق للتضمين في الاغاروز مقص جراحي كبير حاد أدوات العلوم الدقيقة قطع الرأس وإزالة الفك السفلي مقص عظمي قوي أدوات العلوم الدقيقة قواطع القطع ملقط متوسط ، ملاقط دومون # 2 أدوات العلوم الدقيقة إزالة الجلد والحنك مقص زنبركي صغير، 8.5 سم، منحني، شفرات 7 مم أدوات العلوم الدقيقة الاستغناء عن VNO زوجان من الملقط الناعم ، ملاقط دومون # 5 أدوات العلوم الدقيقة تشريح VNO من الكبسولة الغضروفية ملعقة صغيرة من الفولاذ المقاوم للصدأ أدوات العلوم الدقيقة التعامل مع كتلة الاغاروز وشرائح المناديل مشرط جراحي قطع كتلة الاغاروز إلى شكل هرمي معدات مكبر هيكا إلكترونيك EPC-10 الشعيرات الدموية الزجاجية البورسليكات (1.50 مم OD/0.86 مم ID) منتجات علمية كاميرا CCD لايكا مايكروسيستمز DFC360FX مكعب المرشح ، الإثارة: BP 450-490 ، القمع: LP 515 لايكا مايكروسيستمز أولا 3 مصباح مضان لايكا مايكروسيستمز EL6000 المحرك المغناطيسي للصفيحة الساخنة سنيجدر 34532 ميكروفورج ناريشيجي مفترة -830 جهاز المعالجة الدقيقة لويغ ونيومان SM-5 مجتذب ماصة دقيقة، عمودي بخطوتين ناريشيجي PC-10 مجهر لايكا مايكروسيستمز سي إس إم DM 6000 SP5 مزيل الضوضاء 50/60 هرتز (HumBug) كويست ساینتيفيك هدف لايكا مايكروسيستمز HCX APO L20x/1.00 وات الذبذبات تكترونيك TDS 1001B مقياس التناضح جونوتيك أسمومات 030 نظام التروية 8 في 1 أوتميت ساينتيك مقياس الأس الهيدروجيني خمسة سهل ميتلر توليدو جرة تخزين الماصة أدوات الدقة العالمية إ212 غرفة التسجيل لويغ ونيومان شريحة حجرة صغيرة شفرات الحلاقه Wilkinson Sword GmbH ويلكينسون سيف كلاسيك غرفة تخزين شرائح المؤكسجين ؛ الغرف التجارية البديلة هي على سبيل المثال BSK1 Brain Slice Keeper (Digitimer) أو الغرفة المسبقة (BSC-PC; وارنر إنسترومنتس) حسب الطلب مجهر ستيريو لايكا مايكروسيستمز S4E واجهة الزناد هيكا إلكترونيك TIB-14 S الاهتزاز لايكا مايكروسيستمز VT 1000 S حمام مائي ميمرت WNB 45

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة