$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل لجنة رعاية المؤسسية المحلية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.
< p class = "jove_title" >
1. إزالة التعصيب الجراحي
- حقن محلول التخدير داخل الصفاق بجرعة 200 ميكرولتر لكل 20 جرام من وزن جسم الفأر. تأكد من أن قد وصل إلى المستوى المناسب من التخدير عن طريق فحص قرصة إصبع القدم ، وتأكد من أن معدلات القلب والجهاز التنفسي طبيعية (حوالي 600 نبضة و 160 نفسا في الدقيقة ، على التوالي).
- جهز المنطقة الجراحية من الجلد الخلفي باستخدام مناديل البيتادين والكحول ، وقم بتغطية بستارة جراحية معقمة (لأغراض العرض التوضيحي ، تم حذف الستارة المعقمة لزيادة الرؤية). حافظ على دفء باستخدام وسادة تدفئة أثناء العمل في منطقة جراحية معقمة.
- قم بعمل شق باستخدام مشرط معقم # 11 على طول خط الوسط الظهري من قاعدة الرقبة إلى حوالي 0.5 سم فوق الذيل.
- باستخدام ملقط حاد ، اعكس الجلد برفق على الجانب الأيسر بعيدا عن الجناح لتصور الأنسجة الأساسية من وسادات الدهون الكتفية بالقرب من الرقبة إلى الجزء الخلفي مباشرة.
ملاحظه: تظهر الأعصاب الجلدية الظهرية على شكل خيوط بيضاء تنتقل ذيليا عبر اللفافة الشفافة لجدار الجذع قبل إجراء انحناءات حادة ودخول النسيج الضام الرخو تحت الجلد (الشكل 1).
- باستخدام ملقط فائق الدقة تحت مجهر ضوئي تشريح ، قم بإزالة الأعصاب حصريا من الجانب الأيسر من الموجود في المواقع التشريحية T3-12 عن طريق النتف من حيث تنحني الأجزاء عند جدار الجذع إلى مواقع دخولها إلى الجلد (الشكل 1).
- يقوم توجيه الملقط عموديا وإزالة الأعصاب عن طريق الإمساك بحوالي 0.5 سم أسفل مواقع الانحناء والسحب لأعلى ، مما يتسبب في تمدد العصب وانفصال الأنسجة المحيطة (الشكل 1C-E). احرص على تجنب تمزق الأوعية الدموية المجاورة.
- استمر حتى تتم إزالة جميع الأعصاب الممتدة من جدار الجذع إلى الجلد. لا تعطل الأعصاب داخل اللفافة الكثيفة لجدار الجذع. حافظ على رطوبة الأنسجة طوال العملية عن طريق وضع قطرات من محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪ بشكل دوري.
- بدلا من ذلك ، قم بإزالة الأعصاب عن طريق الإمساك بنهاياتها القريبة بالقرب من جدار الجذع بالملقط والقص بمقص ناعم. بعد ذلك ، قم بقطع الأطراف البعيدة بالقرب من الجلد (الأشكال 1F-H). أخيرا ، قم بإزالة الأجزاء العصبية المتداخلة (الشكل 1I).
- قم بإزالة أي أعصاب من سديلة الجلد المكشوفة في الخطوة 1.4. تتكون هذه الألياف من الفروع البعيدة للأعصاب الجلدية الظهرية وتظهر على شكل خيوط بيضاء متفرعة تقع بشكل متقطع داخل النسيج الضام على الجانب الجلدي من سديلة الجلد (الأشكال 1J-K).
- لإزالة هذه الفروع الدقيقة ، ضع الملقط الدقيق بالتوازي تقريبا مع سطح الجلد ، وامسك الأعصاب ونتف لأعلى لتجنب تعطيل الأوعية الدموية وثقب الجلد. استمر حتى تتم إزالة جميع الأعصاب المرئية.
- باستخدام تشريح حاد ، انعكس الجلد على الجانب الأيمن من شق خط الوسط الظهري ، ولكن لا تقم بإزالة الأعصاب. سيكون هذا بمثابة عنصر تحكم ذائف المقابل.
- خياطة على طول خط الوسط الظهري بنمط متقطع بسيط لإغلاق الشق باستخدام خيوط نايلون 6-0 ، في نمط متقطع بسيط متباعد بحوالي 3 مم.
- لا تعيد الفئران التي خضعت لعملية جراحية إلى نفس القفص مثل الأخرى إلا بعد الشفاء التام.
- مراقبة مباشرة بعد الجراحة حتى تستعيد وعيها ، وأيضا يوميا حتى تلتئم منطقة الجراحة ، عادة في غضون أسبوع واحد. استخدم المسكنات وفقا لإرشادات رعاية المؤسسية المحددة واستخدمها إذا ظهرت على الفئران علامات الألم أو الضيق. قم بإزالة الغرز في غضون 7-10 أيام بعد الجراحة. ملاحظه: إذا لزم الأمر، يتم تحضير محلول مسكن عن طريق تخفيف الكاربروفين (محلول مخزون 50 ملغ/ مل) 1:100 في ماء معقم. يتم حقن المحلول تحت الجلد بين لوحي الكتف بالقرب من قفص الرقبة، بجرعة 200 ميكرولتر لكل 20 جم من وزن الجسم (5 ملغ/كغ من وزن جسم الفأر).
- لتقييم إزالة التعصيب المستقر وظيفيا حتى عدة أسابيع بعد الجراحة ، قم بإزالة الشعر من الجلد الظهري باستخدام مقص كهربائي.
- قم بوخز منطقة الجلد منزوعة التعصيب برفق باستخدام إبرة تحت الجلد ، ولاحظ ما إذا كان يستجيب ، عادة عن طريق الارتعاش أو إدارة رأسه. إذا تم إزالة التعصيب من منطقة الجلد بثبات ، فلن يظهر استجابة قليلة أو معدومة.
