تصور ورسم خرائط المسارات العصبية في شريحة دماغ اللوزة

Method Article

تصور ورسم خرائط المسارات العصبية في شريحة دماغ اللوزة

July 8th, 2025

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

< p class = "jove_content" >المصدر: Bosch ، D. ، et al. Ex vivo التشريح البصري الوراثي لدوائر الخوف في شرائح الدماغ. J. Vis. Exp. (2016).

يوضح هذا الفيديو إجراء لتحليل الاتصال المشبكي بين قشرة الفص الجبهي الإنسي (mPFC) والخلايا العصبية اللوزة باستخدام شرائح دماغ اللوزة الحادة من الفئران. تعبر الخلايا العصبية mPFC في هذه الفئران عن قناة رودوبسين مدمجة في بروتين فلورسنت. تسهل القناة رودوبسين تدفق الأيونات وتوليد جهد الفعل في الخلايا العصبية mPFC عند تنشيط الضوء. وبالتالي ، تطلق الخلايا العصبية mPFC ناقلات عصبية ترتبط بالخلايا العصبية للوزة بعد المشبكي ، مما يؤدي إلى تيارات ما بعد المشبكي التي يتم تسجيلها لتصور اتصال اللوزة mPFC-amygdala.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على عينات حيوانية والموافقة عليها من قبل لجنة المراجعة الأخلاقية الحيوانية المناسبة.

فئة

1. تصور وتحفيز الألياف قبل المشبكية

تحضير مجهر التصحيح للتنشيط البصري الوراثي للألياف والخلايا:
1. قم بتوسيط الصمام الثنائي الباعث للضوء المركب (LED) على مسار توصيل الضوء.
2. قم بقياس شدة ضوء LED في المستوى البؤري الخلفي وعند إخراج كل هدف باستخدام مقياس طاقة لاختيار الطول الموجي المناسب البالغ 470 نانومتر.
3. احسب شدة الضوء بالميغاواط / مم² وقم بإنشاء منحنى معايرة (شدة LED (٪) مقابل ناتج الضوء (ميغاواط / مم²)) لكل هدف للقيم المقاسة للطول المو....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" > figure-results-1
الشكل 1. الحقن التجسيمية ، وإعداد شرائح الدماغ الحادة ، وتصور الألياف قبل المشبكي. (أ ، ب) حقن الفيروسات التجسيمية. أ) صورة فأر مخدر موضوعة في إطار تجسيمي مع كشوف الجمجمة وماصة الحقن. الداخل: تكبير صورة ماصة الحقن المملوءة بمحلول الفيروسات الممزوج باللون الأخضر السريع. شريط المقياس: 3 مم. (ب) تخطيطي لجمجمة الفأر مع مواضع محددة لثقوب الحفر لمناطق الحقن المخ.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لم يتم الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

Materials

List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي (ACSF) للتكوين ، انظر المراجع # 16 و # 23 حلول التصحيح الداخلي للتكوين ، انظر المراجع # 16 و # 23 كبريتات المغنيسيوم هيبتاهيدرات Roth, ألمانيا P027.1 تحضير محلول مخزون 2M في الماء النقي مجسم ، SZX2-RFA16 أوليمبوس ، اليابان مصباح الفلورسنت Xcite (XI120Q-1492) مجموعة Lumen Dynamics ، كندا 2012-12699 مجهر التصحيح ، BX51WI أوليمبوس ، اليابان مكبر للصوت متعدد المشبك 700B الأجهزة الجزيئية ، الولايات المتحدة الأمريكية ديجيت داتا 1440 أ الأجهزة الجزيئية ، الولايات المتحدة الأمريكية برنامج PClamp ، الإصدار 10 الأجهزة الجزيئية ، الولايات المتحدة الأمريكية تستخدم للتحكم في الحصول على البيانات وتحفيزها جهاز التحكم في درجة حرارة الحمام ، TC05 لويجز ونيومان ، ألمانيا 200-100 500 0145 ثلاثة محاور micromanipulator ميني 25 لويجز ونيومان ، ألمانيا 210-100 000 0010 وحدة تحكم Micromanipulator SM7 لويجز ونيومان ، ألمانيا 200-100 900 7311 الشعيرات الدموية الزجاجية للماصات الرقعة العالمية للأدوات الدقيقة ، ألمانيا جيجابايت 150 إف - 8 ف ورق ترشيح نترات السليلوز لغرفة الواجهة Satorius Stedim Biotech ، ألمانيا 13006--50----ACN وحدة LED ، CoolLED pE CoolLED، المملكة المتحدة 244-1400 يعد CoolLED أو USL 70/470 والمحولات المناسبة خيارين بديلين لتحفيز LED CoolLED 100 مزدوج التكيف CoolLED، المملكة المتحدة محول الطاقة عبر الطاقة 50E وحدة LED ، USL 70/470 راب إلكترونية بصرية L70-000 محول ثنائي المنفذ راب إلكترونية بصرية استفسر من الشركة مجموعة المرشح باللون الأحمر (الإثارة) AHF ، ألمانيا F49-560 يمكن شراء المرشحات على أنها مجموعة F46-008 (شعاع الشعاع) AHF ، ألمانيا F48-585 (انبعاث) AHF ، ألمانيا F47-630 مجموعة المرشح باللون الأخضر (الإثارة) AHF ، ألمانيا F39-472 البدائل: مجموعة الترشيح F36-149 أو F46-002 (مع انبعاث ممر النطاق) (شعاع الشعاع) AHF ، ألمانيا F43-495W (انبعاث) AHF ، ألمانيا F76-490 LaserCheck، عداد الطاقة المحمول باليد متماسك، الولايات المتحدة الأمريكية 1098293 برنامج IgorPro ، الإصدار 6 Wavemetrics ، الولايات المتحدة الأمريكية لتحليل بيانات الفيزيولوجيا الكهربية ، يمكن أيضا استخدام حزم برامج بديلة أخرى مجموعة عصبية من وحدات الماكرو ل IgorPro http://www.neuromatic.thinkrandom.com

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

تصور ورسم خرائط المسارات العصبية في شريحة دماغ اللوزة

In This Article

Abstract

Protocol

Results

Disclosures

Materials

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles