التسجيلات الفيزيولوجية الكهربية لمستحضرات جذع الدماغ والحبل الشوكي من القوارض حديثي الولادة

الملخص

المصدر: Rousseau, J., et al. الفيزيولوجيا الكهربية على مستحضرات جذع الدماغ والحبل الشوكي المعزولة من القوارض حديثي الولادة تسمح بتسجيل إخراج شبكة الجهاز التنفسي العصبي. J. Vis. Exp. (2015).

يوضح هذا الفيديو التسجيلات الفيزيولوجية الكهربية لمستحضرات جذع الدماغ والحبل الشوكي المعزولة من القوارض حديثي الولادة. يتم وضع المستحضر في غرفة التسجيل ، ويتم تسجيل رشقات الشهيق من جذع الدماغ في ظل ظروف مؤكسجة ومحرومة من الأكسجين باستخدام جذر العصب البطني الرابع في النخاع الشوكي.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تنطوي على جمع العينات وفقا لإرشادات IRB الخاصة بالمعهد.

1. الإعداد والتحضير

1. محاليل
   1. تحضير محاليل مخزون السائل الدماغي النخاعي الاصطناعي (aCSF) وفقا للوصفات التالية. تتوفر وصفات أخرى ذات اختلافات تركيز في الأدبيات. قم بتخزين حلول المخزون في درجة حرارة 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى شهر واحد.
      1. محلول الملح: أضف 75.39 جم من كلوريد الصوديوم (129 ملي مولار نهائي) ؛ 2.5 جم من كلوريد الصوديوم (3.35 ملي مولار نهائي) ؛ 0.81 جم من NaH₂PO4 (0.58 ملي مولار نهائي) ؛ 2.33 جم من كلوريد_{المغنيسيوم 2} (1.15 ملي مولار نهائي) ؛ 1.85 جم من كل....

النتائج

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >
الشكل 1. مخطط ملخص للإعداد.يتم تسخين aCSF الفقاعي وإرساله بواسطة مضخة في غرفة التسجيل. يتم شفط فائض aCSF في غرفة التسجيل بواسطة مضخة والتخلص منه. ترتبط غرفة التسجيل بالأرض وجهاز التحكم في درجة الحرارة. يتم نقل إخراج القطب مباشرة إلى مكبر الصوت ، ثم إلى المتوسط المتحرك ونظام الحصول على البيانات ، وأخيرا الكمبيوتر.

....

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات سيلجارد سيجما ألدريتش 761036-5EA استخدم تحت الغطاء كلوريد الصوديوم بيوشوب SOD002 كيه سي إل بيوشوب بوك 888 كلوريد_{الهواء 2} بيوشوب سي سي إل 444 مغنكلوريد₂ بيوشوب ماج510 NaHCO₃ بيوشوب سوب999 NaH₂PO₄ بيوشوب SPM306 د-الجلوكوز بيوشوب GLU501 كربوجين ليندي 343-02-0006 تحكم في درجة الحرارة وارنر إنسترومنتس، هامدن، كونيتيكت، الولايات المتحدة الأمريكية تي سي -324 ب قطب الشفط أنظمة AM ، إيفريت ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية نموذج 573000 مضخم التيار المتردد التفاضلي أنظمة AM ، إيفريت ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية نموذج 1700 المتوسط المتحرك CWE ، أردمور ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية نموذج MA-821 نظام الحصول على البيانات Dataq Instruments ، أكرون ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية الموديل DI-720 برنامج LabChart ADInstruments ، كولورادو سبرينغز ، كولورادو ، الولايات المتحدة الأمريكية برامج المنشور Graphpad ، لا جولا ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية غرفة التسجيل صنع منزلي قاعدة كانيتيك ، بنسنفيل ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية معالج دقيق شركة World Precision Instrument Inc ، ساراسوتا ، فلوريدا ، الولايات المتحدة الأمريكية ميغابايت قاعدة كانيتيك ، بنسنفيل ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية كيت-آر مضخة تمعجية جيلسون ، ميدلتون ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية ميغابايت قفص فاراداي صنع منزلي مينيبولس 3 حاسوب