Assessing the Effects of Toxins on Chick Embryo Neural Network Development Using Multielectrode Arrays

doi:10.3791/31293

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Research Article

تقييم آثار السموم على تطور الشبكة العصبية لجنين الكتاكيت باستخدام مصفوفات متعددة الأقطاب الكهربائية

July 8, 2025

Cite Watch Download PDF Download Material list

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

In This Article

Abstract Protocol Disclosures Materials Reprints and Permissions

Abstract

المصدر: Sanchez، K. R.، et.al. تقييم آثار المركبات المسببة لاضطراب الغدد الصماء على تطوير وظيفة الشبكة العصبية للفقاريات باستخدام مصفوفات متعددة الأقطاب الكهربائية. J. Vis. Exp. (2018).

يوضح هذا الفيديو استخدام المصفوفات متعددة الأقطاب الكهربائية (MEA) لدراسة تأثيرات السموم على الثقافات العصبية الجنينية المبكرة. من خلال مراقبة النشاط المتزامن للخلايا العصبية في الشبكة العصبية ، تلتقط MEA الديناميكيات الوظيفية للشبكة العصبية استجابة للتعرض للسموم. يسلط انخفاض معدلات التزامن وإطلاق النار عند التعرض للسموم الضوء على تأثيره الضار على نضوج الشبكة العصبية ووظيفتها.

Protocol

1. تسجيل نشاط الشبكة العصبية

في يوم الاستحواذ ، قم باستبدال وسط الاستزراع بالوسط العصبي القاعدي الجديد وأعد المتوسط المتوسط إلى حاضنة ثاني أكسيد الكربون_لمدة ساعتين على الأقل قبل التسجيل. ابدأ تشغيل برنامج التسجيل واضبط درجة حرارة MEA على 37 درجة مئوية من خلال النقر على أيقونة درجة الحرارة.
ملاحظه: يمكن أن يبدأ التسجيل في وقت مبكر من اليوم الثالث من الطلاء ويمكن أن يستمر طالما أن الثقافات على قيد الحياة.
قم بإعداد معلمات الاكتساب عن طريق النقر بزر الماوس الأيمن على أيقونة "Muse" (ضمن التدفقات في لوحة النافذة اليسرى) وتحديد "إضافة معالجة" و "Spike Detector" والنقر فوق "موافق" في النافذة المنبثقة. سيظهر "Spike Detector (6 x STD)" أسفل اسم الملف.
بعد ذلك ، انقر بزر الماوس الأيمن على Spike Detector ، وحدد "إضافة معالجة" و "كاشف الاندفاع" وانقر فوق "موافق" في النافذة المنبثقة. سيظهر "Burst Detector" (ISI) أسفل أيقونة Muse.
انقر بزر الماوس الأيمن التالي على Burst Detector ، وحدد "إضافة معالجة" و "مترجم الإحصائيات العصبية". في النافذة المنبثقة ، تأكد من تحديد رأس الملف وإحصائيات البئر المجمعة والمزامنة. انقر فوق موافق. سيظهر أدناه "مترجم الإحصائيات".
ملاحظه: سيؤدي ذلك إلى ضبط عبور العتبة التكيفي (مرشاح STD 6x) ، والفاصل الزمني بين الارتفاع عند ms 100 مع الحد الأدنى لعدد المسامير عند 5 ، ومتوسط معدل إطلاق النار عند 10 ثوان مع معلمة التزامن عند 20 مللي ثانية ، والحد الأدنى لمعدل الارتفاع عند 0.083333 طفرة في الدقيقة.
قم بإعداد التسجيل المجدول لوقت التسجيل البالغ 5 دقائق (300,000 مللي ثانية) بالنقر فوق رمز الساعة في الأسفل. يتم تحقيق ذلك عن طريق تغيير المعلومات في قسم الإعداد للتسجيل كل 5.1 دقيقة والتسجيل لمدة 5 دقائق. سيبدأ هذا على الفور وسيتم تنفيذه مرة واحدة.
تأكد من أن درجة حرارة منطقة الشرق الأوسط وأفريقيا قد وصلت إلى 37 درجة مئوية قبل تحريك منطقة الشرق الأوسط وأفريقيا. قم بإزالة MEA من الحاضنة ، وضعها على وحدة التسجيل ، وأغلق MEA. ابدأ في تسجيل نشاط الشبكة بالنقر فوق بدء التسجيل في قسم التسجيل المجدول أو أيقونة التسجيل في نافذة "تشغيل الملفات". عادة ما يكون وقت التسجيل 5 دقائق (300,000 مللي ثانية) كافيا ، على الرغم من أنه يمكن الحصول على تسجيلات أطول تصل إلى 10 دقائق.
بعد التسجيل ، أعد MEA إلى الحاضنة.
ملاحظه: يجب توخي الحذر للحفاظ على العقم وتقليل الوقت الذي يقضيه MEA خارج الحاضنة.

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Materials

أكسيون موسى الشرق الأوسط وأفريقيا أكسيون بيوأنظمة م 64 - GL1 - 30 بت 200 سيطلق عليه نظام MEA في المخطوطة برنامج المحور أكسيون بيوأنظمة سيطلق عليه برنامج التسجيل في المخطوطة BPA سيجما ألدريتش 239658-250 جرام إيتو هيه سيجما ألدريتش 64-17-5 الوسط العصبي القاعدي برين بيتس NB4-500 برنامج Neuroexplorer الإحصائي نيكس تكنولوجيز Neuroexplorer الإصدار 5

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission

Play Video

تقييم آثار السموم على تطور الشبكة العصبية لجنين الكتاكيت باستخدام مصفوفات متعددة الأقطاب الكهربائية