Method Article

تحليل هياكل الأميلويد في قسم الأنسجة باستخدام الفحص المجهري للتصوير مدى الحياة الفلورية

April 28th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Nyström، S.، وآخرون، تصوير أنسجة الأميلويد الملطخة بقليل الجوثيوفينات المترافقة المضيئة بواسطة الفحص المجهري متحد البؤر الفائق الطيفي والتصوير الفلوري مدى الحياة. J. Vis. Exp. (2017).

يوضح هذا الفيديو تحليل هياكل الأميلويد باستخدام الفحص المجهري للتصوير مدى الحياة الفلورية أو FLIM ، باستخدام صبغة hFTAA للكشف عن النوى المدمجة مثل الأزرق / الأخضر والمحيطات غير المستقرة مثل الأحمر / الأصفر في الصور المشفرة بالألوان ، مما يعكس تنظيم الأميلويد.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. تحضير عينات الأنسجة

ملاحظة: يمكن تصوير العديد من أنواع الأنسجة باستخدام حمض خليك ثيوفين ثيوفين (hFTAA) كعلامة أميلويد. hFTAA حساس للتشكل الكلي. وبالتالي يفضل إجراء التلوين على مجاميع غير متقطع مع عدم التعرض للحاتمة. يتم تحقيق الجودة الطيفية المثلى إذا تم الحفاظ على تثبيت الأنسجة إلى الحد الأدنى. ومن ثم ، يفضل استخدام المواد المجمدة الطازجة ، المثبتة برفق في الإيثانول في وقت التلوين. ومع ذلك ، من الممكن اكتشاف رواسب الأميلويد أيضا في الأنسجة التي تم إصلاحها باستخدام ، على سبيل المثال

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

<فئة الشكل = نمط "الجدول" = "العرض: 700pt;'> < نمط TD = 'العرض: 117pt;'>Agilent Technologiestd style='height:14.5pt;width:285pt;'>LeicaDM6000< td style='الارتفاع:14.5pt;العرض:285pt;'>LSM780

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
hFTAA/Amytracker545Ebba Biotech
Dako وسيط تركيب الفلورسينGM304 <
Leica
Lumen 200Before
Spectraview systemASI specttral imaging
Spectraview softwareASI specttral imaging
Zeiss
Zen 2010b v6.0 softwareZeiss
FLIM systemBecker & Hickl
Ar/ML 458/488/514Zeiss
Table Laser In TuneZeiss

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Fluorescence Lifetime ImagingAmyloid StructureshFTAA DyeConfocal MicroscopyTissue SectionBeta Sheet StructuresFluorescence LifetimeColor Coded ImagesCompact CoresUnstable Peripheries

Related Articles