مقالة منهجية

التصوير الفلوري لديناميكيات الكالسيوم عند التقاطعات العصبية العضلية في الحجاب الحاجز للفأر المعدل وراثيا

مايو 29, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Heredia, D. J., et. ال تصوير خارج الجسم الحي لإشارات الكالسيوم الخاصة بالخلية في المشبك الثلاثي لغشاء الفأر. J. Vis. Exp. (2018)

يوضح هذا الفيديو التصوير الفلوري من ديناميكيات الكالسيوم عند التقاطعات العصبية العضلية (NMJs) في فأر معدل وراثيا يعبر عن مؤشرات الكالسيوم المشفرة وراثيا. يتم التعرف على NJM بواسطة مستقبلات الأسيتيل كولين الموسومة بالفلورسنت في الحجاب الحاجز مع العصب الحجابي. يتم استخدام مقسم الصور لتصور إشارات متعددة في وقت واحد. يتم توصيل حافز كهربائي ، ويتم تسجيل التغيير في التألق في NMJ استجابة لتدفق الكالسيوم.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات المتعلقة بعينات والموافقة عليها من قبل لجنة مراجعة أخلاقيات المناسبة.

1. تحضير الحجاب الحاجز والأعصاب الحجابية من الفئران المعدلة وراثيا

  1. شراء الفئران المعدلة وراثيا والبادئات قليلة النوكليوتيد للتنميط الجيني لهذه الفئران.
    1. قم بتربية فأر عمره من 3 إلى 6 أشهر يعبر عن نسخة واحدة من أليل Cre-driver المعدل وراثيا / الضربة ونسخ صفرية من أليل GCaMP3 / 6 الشرطي مع فأر ثان من نفس العمر يعبر عن نسخة أو نسختين من أليل GCaMP3 / 6 الشرطي ونسخ صفرية من أليل Cre-driver.
    2. قم بتمييز الجراء وتمييز تلك التي تحتوي على كل من Cre وأليلات GCaMP3 / 6 الشرطية - ستسمى هذه الفئران من الآن فصاعدا الفئران المعدلة وراثيا مزدوجة (على سبيل المثال ، Myf5-Cre ، GCaMP3 المشروط).
      ملاحظة: بهذه الطريقة ، ستنمد جميع البيانات من الفئران التي تعبر عن نسخة واحدة من كل من Cre وأليلات GCaMP3 / 6 الشرطية. هذا مهم بشكل خاص عند إضافة فئران متحولة أخرى (على سبيل المثال ، بالضربة القاضية) إلى هذه الصلبان.
  2. عندما تكون الفئران المعدلة وراثيا المزدوجة في العمر المناسب (على سبيل المثال ، يوم ما بعد الولادة 0 أو 5 [P0 أو P5] أو بالغ) ، قم بالقتل الرحيم للفئران عن طريق قطع رؤوسها بالمقص (للفئران الأصغر من P10) أو بوضعها في غرفة استنشاق الأيزوفلوران. عندما لا يعودون يستجيبون لقرص الذيل بزوج من الملقط ، يكونون مستعدين للتضحية.
  3. ضحية بقطع الرأس بزوج من المقص.
  4. قم بتقسيم عرضي عبر بأكمله أسفل الكبد مباشرة وفوق القلب والرئتين مباشرة باستخدام مقص استئصال القزحية.
  5. قم بتشريح الكبد والقلب والرئتين ، مع الحرص على الحفاظ على طول العصب الحجابي الذي يكون طويلا بما يكفي ليتم سحبه إلى قطب شفط (أي 1-2 سم).
    ملاحظة: يمكن التعرف على العصب الحجابي الأيسر على أنه قطعة بيضاء من الأنسجة تدخل الجزء الإنسي من الحجاب الحاجز الأيسر. يجب عدم قطعها عند إزالة الرئتين. يمتد العصب الحجابي الأيمن داخل قطعة من اللفافة تحتوي أيضا على الوريد الأجوف العلوي وهي أرق وأكثر بياضا من الوريد الأجوف. معا ، كلاهما يخترق الحجاب الحاجز الإنسي الأيمن.
  6. قم بإزالة القفص الصدري والعمود الفقري ، باستثناء التلال الرقيقة حول الحجاب الحاجز.
  7. ضع الحجاب الحاجز وعينة العصب الحجابي في أنبوب ميكروفوجوج بمحلول Krebs-Ringer مع 1 ميكروغرام / مل 594-αBTX لمدة 10 دقائق في الظلام.
    ملاحظة: هذا التركيز من 594-αBTX يصنف مستقبلات الأسيتيل كولين (AChRs) دون منع وظيفتها (الملاحظة الشخصية).

2. تحفيز وتسجيل إمكانات عمل العضلات

  1. باستخدام دبابيس دقيقة ، قم بتثبيت الحجاب الحاجز عن طريق تثبيته على طبق بطول 6 سم مغطى بهلام عازل من السيليكون ومملوء ب~ 8 مل من محلول Krebs-Ringer المؤكسج ووضعه على مرحلة المجهر. قم بدمج الحجاب الحاجز بمزيد من محلول Krebs-Ringer (8 مل / دقيقة) لمدة 30 دقيقة.
    } ملاحظة: هذا يشطف 594-αBTX غير المرتبط ، بالإضافة إلى موازنة الأنسجة بعد التشريح.
  2. اصنع قطب شفط وفقا للطرق المعمول بها.
    1. عند التكبير 4X ، باستخدام معالج دقيق ، حرك قطب الشفط فوق العصب الحجابي الأيسر وقم بتطبيق الشفط عن طريق سحب برميل حقنة سعة 5 مل متصلة بالأنبوب المتصل بقطب الشفط.
      ملاحظة: عند سحبه بنجاح في قطب الشفط ، يكون العصب الحجابي مشدودا. قم بتشغيل المحفز وتحفيز العصب الحجابي عن طريق قلب المفتاح اليدوي 1x.
    2. تأكد من أن الحجاب الحاجز ينقبض استجابة لتحفيز 1-هرتز عن طريق فحصه بصريا بإضاءة المجال الساطع. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فاضبط الجهد عن طريق تدوير مقبض الجهد بشكل تدريجي لتحقيق نبضة فوق الحد الأقصى ، والتي يمكن التحقق منها عن طريق الفحص البصري لتقلص العضلات. إذا كان لا يزال غير مرئي ، فقم بتفجير العصب بالمحقنة وحاول سحبه مرة أخرى عن طريق تطبيق الشفط.
  3. قم بإيقاف تشغيل التروية وإضافة مثبط الميوسين الخاص بالعضلات BHC6 أو مضاد قناة الصوديوم المزود بالجهد الكهربائي μ-conotoxin8 إلى تركيز نهائي قدره 100 ميكرومتر.
    1. لصنع 100 ميكرومتر BHC، قم بعمل 4 ميكرولتر من مخزون 200 ملي مولار في DMSO وقم بتخفيفه مسبقا في 1 مل من محلول كريبس-رينجر.
    2. قم بإزالة 1 مل من محلول Krebs-Ringer من الطبق.
    3. أضف BHC المخفف مسبقا إلى الطبق.
      ملاحظة: يساعد هذا التخفيف على منع الحث بواسطة DMSO غير المخفف لاستجابة فلورية غير عابرة في الخلايا التي تعبر عن GCaMP3.
    4. انتظر 30 دقيقة ثم قم بتشغيل نضح محلول Krebs-Ringer الجديد لمدة 20 - 30 دقيقة أخرى.
  4. قم بإعداد قطب التسجيل.
    1. عند ارتداء القفازات، ضع زجاجا من خيوط البورسليكات بقطر خارجي (OD) يبلغ 1 مم وقطر داخلي (ID) يبلغ 0.4 مم في مجتذب ماصة دقيقة، وشد الأقراص لتثبيتها في موضعها، وأغلق باب المجتذب.
    2. باستخدام مجتذب P-97 ، قم ببرمجة الإعدادات التالية: الحرارة عند 900 ، والسحب عند 120 ، والسرعة عند 75 ، والوقت عند 250 ، والضغط عند 500 ، وعدم وجود حلقات إضافية.
      ملاحظة: يتم قياس المقاومة (R) باستخدام عناصر التحكم في البرامج لمكبر الصوت: يؤكد برنامج الحصول على البيانات المقاومة عن طريق حل الصيغة V = IR. تمرر وحدة التحكم في البرنامج تيارا معروفا (I) (عادة 1 نانو أمبير) عبر القطب الكهربائي وتقيس التغير في الجهد (V) ، مما يمكننا من حل R.
    3. بالنسبة للأغشية الجنينية ، تأكد من أن المقاومة قريبة من 60 MΩ ، وبالنسبة للأغشية القديمة ، 10 - 20 ميجا أوم. قم بتحميل قطب التسجيل بكلوريد البوساتيوم 3 M (KCl).
  5. عند التكبير بمقدار 10 أضعاف ، قم بخفض القطب الكهربائي في العضلات ، باستخدام معالج دقيق ثان على الجانب الآخر من المرحلة كقطب كهربائي محفز.
  6. باستخدام برنامج الحصول على البيانات الفيزيولوجية الكهربية ، انتظر حتى يتغير غشاء الراحة من 0 إلى -65 مللي فولت أو أقل.
  7. قم بالتحفيز عند 1 هرتز وتحقق من وجود إمكانات عمل عضلية عن طريق التحقق من وجود إمكانات كبيرة تظهر تجاوزا متواضعا (إمكانية ترتفع فوق 0 مللي فولت عندما تبدأ عند -65 مللي فولت أو أقل). لا تخلط بين قطعة أثرية تحفيزية وإمكانات الفعل.
    ملاحظة: تكون الإمكانات أطول بكثير في المدة (~ 5 مللي ثانية) من القطع الأثرية للتحفيز.

3. تصوير مضان العينة

  1. عند تكبير 20X ، حدد موقع نطاق الصفيحة الطرفية في مركز العضلة من خلال البحث عن الوصلات العصبية العضلية المسماة 594-αBTX أو NMJs تحت إثارة الضوء الأخضر / الأصفر (550 نانومتر). قم بالتبديل إلى إثارة الضوء الأزرق (470 نانومتر) لصورة Ca2+ في خلايا العضلات أو الخلايا العصبية الحركية أو خلايا شوان.
  2. إذا رغبت في ذلك ، قم بإعداد مقسم الصور باستخدام مرشحات ممر النطاق ومرشح أحادي الحافة ثنائي اللون للتصوير ثنائي الطول الموجي.
  3. لحساب الحد الأقصى للتألق (Fmax) الذي أظهره النسيج المعبر عن GCaMP3 / 6 ، أضف 12 ميكرولتر من 3 M كلوريد البوتاسيوم (KCl) إلى مستحضرات الحجاب الحاجز.
    1. قم بإجراء تجارب مع شريط السطوع الموجود على شريط جدول البحث المضبوطة على 110٪ من المستوى الذي يظهر عنده النسيج المعبر عن GCaMP3 / 6 تشبعا عند تكبير 20X دون تجميع استجابة ل KCl.
  4. سجل بمعدل 20 إطارا في الثانية حتى لا تفوتك أي أحداث سريعة.
  5. قم بالتحفيز ب 1 - 45 ثانية من 20 - 40 هرتز من تحفيز الأعصاب عن طريق توصيل مجموعة من النبضات باستخدام قطب الشفط أو إضافة ناهضات دوائية عن طريق تطبيق الاستحمام أو عن طريق التروية وجمع الفلورسنت الديناميكي Ca 2 + في نوع فرعي واحد من الخلية جنبا إلى جنب مع إشارة 594-αBTX NMJ الثابتة.
    ملاحظة: إذا أصبحت مؤشرات الكالسيوم المشفرة وراثيا (GECI) أو مؤشرات الجهد المشفرة وراثيا (GEVI) الخاصة بالأنسجة متاحة للاستخدام في NMJ ، فيمكن استخدامها لجمع إشارتين ديناميكيتين تعكس عنصرين خلويين متميزين في NMJ.
  6. عند الانتهاء من تجارب التصوير أو الفيزيولوجيا الكهربية بسبب تحقيق النتائج المرجوة ، قم بنفخ الماء من خلال خطوط التروية وامتصاص الماء 2x - 3x من خلال قطب الشفط لضمان عدم تراكم الأملاح.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

<فئة الشكل = 'جدول' ><فئة الجدول = 'ck-table-resize' النمط = 'collapse border: collapse ؛ font-family: Calibri ؛ حجم الخط: 11pt ؛ تخطيط الجدول: fixed ؛ 'cellpacing = '0' cellpadding = '0' dir = 'ltr' border = '1' data-sheets root='1' data-sheets-baot = '1'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات Myf5-Cre mouse styleJax< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>#007893Drives تعبير الخلايا العضلية في وقت مبكر مثل E136Wnt1-Cre mouse #003829Sox10-Cre mouse #025807يقود تعبير خلية شوان في الأعمار الأكبر سناConditional GCaMP3 passe#029043يعبر عن GCaMP3 بطريقة خاصة بالخليةConditional GCaMP6f mouse # 024105 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>يعبر عن GCaMP6f بطريقة خاصة بالخليةBHC (3-(N-butylethanimidoyl)-4-hydroxy-2H-chromen-2-one)Hit2Lead#5102862< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفاف استراتيجية:4;'> يمنع الميوسين العضلي الهيكلي ولكن ليس النقل العصبي6CF594-α-BTXBiotium#00007< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفاف استراتيجية:4;'>تسميات مجموعات مستقبلات الأسيتيل كولين في NMJμ-conotoxin GIIIbPeptides Int'l#CONO20-01000Blocks Nav1.4 المعتمدة على الجهد قناة الصوديوم 8Ellswoth المواد اللاصقة< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'># Sil Dielec Gel .9KGminiutien pins (0.1mm diameter) 26002-10 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >يشل حركة الحجاب الحاجز على هلام عازل من السيليكون < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛ '>< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ '> Eclipse FN1 مجهر مستقيم < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >نيكون < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7 نقاط ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >MBA74100< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمات:break-word;wrap-strategy:4;'>يسمح بتحديد ومراقبة العينةBasic Basic Fixed Microscope Platform with Manual XY Microscope TranslatorMXMScr< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> يسمح بحركة العينةManual micromanipulator< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> Narishige < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كسر الكلمة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > م -152< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'> يحمل تسجيل وتحفيز الأقطاب الكهربائيةmicroelectrode amplifier< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>الأجهزة الجزيئية< نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >Axoclamp 900Aيسمح بتسجيل الفيزيولوجيا الكهربية داخل الخلايا القطب الحادالأجهزة الجزيئية < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >Digidata 1550<td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>يسمح بالحصول على البيانات الفيزيولوجية الكهربيةالأجهزة الجزيئية يقوم بتحليل البيانات الفيزيولوجية الكهربية < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛ '>< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >محفز الموجة المربعة < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشوة: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> العشب< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> S48 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > يحفز العصب لإثارة العضلاتStimulus Isolation Unit PSIU6 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>يقلل من القطع الأثرية للتحفيزخيوط البورسليكات ، القطر الخارجي 1.0 مم ، القطر الداخلي 0.5 ممSutterImpales and سجلات إمكانات العضلات التي تثيرها الأعصابSutter < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >BF150-117-15 مطول ويستخدم لقطب الشفط < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >مجتذب الماصة الدقيقة < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>Sutter< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> P-97 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كسر الكلمة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > يسحب و يعد أقطاب التسجيل1200x1200 pixel, camera cMOS ذات الإضاءة الخلفية Prime 95b < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >كاميرا حساسة تسمح بالتصوير عالي الدقة وعالي السرعة < نمط tr = 'الارتفاع: 21 بكسل ؛ '>< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> مصدر الضوء < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >LumencorSpectra X< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> أهداف الغمر في الماء الفلورسنت المصححة إلى اللانهاية ، WD 2 مم< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> نيكون < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: روبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >CFI60 توفير مسافات عمل طويلة لتصور العينةFiber Optical Illuminator with Halogen lamp LS-DWL-N< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: روبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> W-View Gemini Image Splitter < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >Hamamatsu < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>A12801-01 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >يعرض زوجا واحدا من الصور ذات الطول الموجي المزدوج مفصولة بكاميرا ثنائية اللون إلى كاميرا واحدة< نمط tr = 'ارتفاع: 21 بكسل ؛ '>< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> مرشحات ممر النطاق الترددي أحادي النطاق (512 / 25-25 و 630 / 92-25)< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> SemRock < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >FF01-512 / 25-25; FF01-630 / 92-25 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض : مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمة: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> يسمح بالتصوير ثنائي النطاق < نمط tr = 'الارتفاع: 21 بكسل ؛ '>< نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >560 نانومتر Single-Edge Bichroic Beamsplitter < td style = 'background-color: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ '> Sem Rock < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >FF560-FDi01-25x36مرآة ثنائية اللون التي تفصل أشعة الضوء للسماح بالتصوير ثنائي الطول الموجي نظام الحصول على بيانات التصويرNikonNIS Elements - MQS31000يسمح بالحصول على بيانات التصوير نيكونMQS41220 Module for ضبط بيانات التصوير< نمط tr = 'الارتفاع: 21 بكسل ؛ '>< نمط TD = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>وحدة أجهزة تقسيم الانبعاثات < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >نيكون < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >MQS41410 Module for imaging data cusiitionنظام تحليل بيانات التصوير< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>NA< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> قياس الحجم 8D5 ، Fiji)يسمح بتحليل شدة التألق وبيانات التصوير الأخرى

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

GCaMP 3

مقالات ذات صلة