مقالة منهجية

تصوير الكالسيوم للخلايا العصبية المعوية وأنشطة الخلايا الدبقية في الضفيرة العضلية المعوية في القولون الفأر

مايو 29, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: فريد، د. إي، غولبرانسن، ب. د. في الموقع Ca2+{ {{}} تصوير الجهاز العصبي المعوي. J. Vis. Exp.. (2015)

{{}}{{}} يوضح هذا الفيديو الكالسيوم التصوير لتصور وتحليل نشاط الخلايا العصبية المعوية والخلايا الدبقية في مستحضرات الضفيرة العضلية المعوية القولونية.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على عينات حيوانية والموافقة عليها من قبل المراجعة الأخلاقية المناسبة للحيوان اللجنة.

1.Prepare تعديل مخزن كريبس العازلة.

make modified Krebs buffer بحيث تكون التركيزات النهائية (بالملليمتر) للمكونات على النحو التالي: 121 كلوريد الصوديوم ، 5.9 كيلو كلوريد ، 2.5 CaCl2, 1.2 MgCl2, 1.2 NaH2PO4, 10 HEPES, 21.2 NaHCO32 + < نمط الامتداد = 'عائلة الخط: Arial ، sans-serif ؛ حجم الخط: 12pt ؛ نمط الخط: عادي ؛ متغير الخط: عادي ؛ وزن الخط: 400 ؛ زخرفة النص: لا شيء ؛ المحاذاة الرأسية: خط الأساس. المساحة البيضاء: التفاف مسبق ؛ > التصوير والتشريح الكامل.

نمط

ملاحظة: استخدم على الأقل جهاز تصوير أساسي مع مصدر ضوء فلوري ومجهر وكاميرا CCD عالية الجودة وبرنامج اقتناء مناسب. قم بتغيير إضافة المكونات الأخرى اعتمادا على مصدر الضوء والتطبيق المحدد. يجب استخدام عجلة المرشح والمصراع مع مصدر ضوء قوس الزينون التقليدي. ومع ذلك ، لا تتطلب مصادر إضاءة LED وأنظمة الإضاءة هذه المكونات.

  1. ضع غرفة التسجيل تحت المجهر وباستخدام نظام نضح تدفق الجاذبية مع خزانات حقنة ساخنة متعددة ينشئ معدل نضح مستمر يبلغ 2-3 مل / دقيقة من 37 درجة مئوية Krebs buffer. تأكد من منع تكوين فقاعة الهواء في كل من خط الإدخال والشفط المتصل بمصيدة التفريغ.
  2. NOTE: 2 + < span style = 'font-family: Arial ، sans-serif ؛ حجم الخط: 12pt ؛ نمط الخط: عادي ؛ متغير الخط: عادي ؛ وزن الخط: 400 ؛ زخرفة النص: لا شيء ؛ المحاذاة الرأسية: خط الأساس. المساحة البيضاء: التفاف مسبق ؛ > الاستجابات ليست سريعة مثل Ca2+ العابرين في الخلايا العصبية. style='لون الخلفية:شفاف;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Arial,sans-serif;حجم الخط:12pt;نمط الخط:عادي;font-variant:عادي;font-weight:400;list-style-type:decimal;text-decoration:none;vertical-align:baseline;white-space:pre;' dir='ltr' aria-level='1'>NOTE:2+].
    1. استخدم تعديلا لطريقة موصوفة سابقا باستخدام ΔF/F = ((F1− F0)/F0)ROI − (((F1− F0)/F0)الخلفية، حيث F1 هو التألق في أي نقطة معينة و F0 هو التألق الأساسي، لتحسين دقة التقييم. يساعد هذا التعديل في تقليل الضوضاء الناتجة عن تغيرات التألق في مستحضرات الأنسجة التي تظهر حركة الطبقة العضلية الكامنة وراء الضفيرة العضلية المعوية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول' ><فئة الجدول = 'ck-table-resize' النمط = 'collapse border: collapse ؛ font-family: Calibri ؛ حجم الخط: 11pt ؛ 'cellpacing = '0' cellpadding = '0' dir = 'ltr' border = '1' data-sheets root = '1' data-sheets-baot = '1'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> Fluo-4 AM صبغ < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > InvitrogenF-14201GlucoseSigmaG8270Insect pinsFine أدوات العلوم Minutien Pins< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>iQ Live Cell Imaging Software< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> Andor< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;font-family:Roboto;font-weight:normal;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>Andor iQ3< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمة: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> كلوريد البوتاسيوم < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >SigmaP3911كلوريد المغنيسيوم < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> Sigma < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>M9272 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> كلوريد الصوديوم < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> سيجما< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;font-family:Roboto;font-weight:عادي;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;s-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>S9888 sodium dihydrogen phosphate< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;font-weight:عادي;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;s-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>SigmaS8282< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > بيكربونات الصوديوم < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> سيجما< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>S6014كاميرا Neo sCMOSAndor< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي;الحشو:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفاف استراتيجية:4;'>Neo 5.5 sCMOSNicardipineSigma< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-weight:normal;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>N7510pump peristaltic هارفارد جهاز < td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;font-family:Roboto;font-weight:عادي;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'> model 720Pluronic F-127Invitrogen< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>P3000MPProbenecidMolecular مجسات < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>P36400 < td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;font-weight:عادي;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;s-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>ScopolamineSigma< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي;الحشو:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفاف استراتيجية:4;'>S1013Sutter Lambda DG-4SutterDG-4SylgardDow Corning184< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> وحدة التحكم في درجة الحرارة < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> وارنر إنسترومنتز< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;font-weight:عادي;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;s-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>TC-344C

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة