تصوير الفاصل الزمني للهجرة الشعاعية للخلايا العصبية القشرية في شرائح الدماغ الجنينية للفأر المنقولة

الملخص

المصدر: Wiegreffe, C., et. al., التصوير متحد البؤر بفاصل زمني للخلايا العصبية المهاجرة في ثقافة الشرائح العضوية لدماغ الفأر الجنيني باستخدام التثقيب الكهربائي. J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{}}J. Vis. exp. {{}}{{}}{{TAG_ 44}} (2017)

يوضح هذا الفيديو الفحص المجهري متحد البؤر بفاصل زمني لمراقبة الهجرة الشعاعية للخلايا العصبية القشرية من المنطقة تحت البطينية إلى الصفيحة القشرية عبر السقالات الدبقية الشعاعية في شرائح الدماغ الجنينية للفأر المنقولة.

البروتوكول

1. تصوير الفاصل الزمني

1. Microscope Setup
   1. ضع غرفة مناخية موضوعة على مسرح المجهر متحد البؤر المقلوب على 37 درجة مئوية و 5٪ جو ثاني أكسيد الكربون. استخدم كاشفا هجينا لتقليل كثافة الليزر وتحسين بقاء الخلية. للتحليل التفصيلي ، استخدم هدف جاف لمسافة عمل طويلة جدا 40X بفتحة عددية تبلغ 0.6 أو أعلى.
      note:Slice التصوير
      1. حدد شريحة دماغية للتصوير من اللوحة المكونة من 6 آبار التي تحتوي على إدخالات الغشاء باستخدام مجهر مضان مقلوب.
         Caution:NOTE:NOTE:

المواد

<فئة الشكل = 'جدول' ><فئة الجدول = 'ck-table-resize' style = 'collapse border: collapse ؛ font-family: Calibri ؛ حجم الخط: 11pt ؛ تخطيط الجدول: ثابت ؛ 'cellpacing = '0' cellpadding = '0' dir = 'ltr' border = '1' data-sheets root = '1' data-sheets-baot = '1'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات < td style = 'overflow: مخفي ؛ الحشو : 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ لوحة >6 بئر < td style = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > Corning < td style = 'الفائض: مخفي ؛ الحشوة: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >351146< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> مجهر ثقافة الأنسجة الفلورية المقلوبةLeica< td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ white-space : normal ؛ word-wrap: break-word ؛ wrap-strategy: 4 ؛ '> DM IL LED < td style = 'overflow: مخفي ؛ الحشو : 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < td style = 'overflow: hidden؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom؛ white-space: normal؛ word-wrap: break-word؛ wrap-strategy: 4 ؛ '> مجهر المسح الضوئي بالليزر متحد البؤر< td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ white-space: normal ؛ word-wrap: break-word؛ wrap-strategy: 4 ؛ '>LeicaTCS SP5II Hybrid DetectorLeicaHyD< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> Objective, 40x / 0.60 NALeica11506201< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> microscope temperature control system Life Imaging Services< td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ white-space: normal ؛ word-wrap: break-word ؛ wrap-strategy: 4 ؛ '>Cube ، Brick & Box < td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '> إدراج ثقافة الخلية<نمط td = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>Millipore < td style = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>PICM0RG50 < نمط td = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> MicrogrinderNarishigeEG-45< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'> use 38 ° angle for bevelMicroinjectorParker Hannifin052-0500-900< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>Picospritzer IIIملاقط مع أقطاب قرصية بلاتينية 5 مم< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>SonidelCUY650P5 مجتذب الماصة الدقيقةSutter Instrument< td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ white-space: normal ؛ word-wrap: break-word؛ wrap-strategy: 4 ؛ '>P-97 < td style = 'overflow: hidden؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '> خيوط الصندوق< td style = 'overflow: hidden؛ padding: 0px 3px؛ vertical-align: bottom؛ white-space: normal؛ word-wrap: break-word؛ wrap-strategy: 4؛ '>Sutter InstrumentFB255B2.5 مم × 2.5 مم-micro-spoon spatulaVWR231-0191< نمط td = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > 185 مم × 5 مم الطبق السفلي الزجاجي، 50 ممWorld Precision InstrumentsFD5040-100