مقالة منهجية

الاستئصال العصبي المستهدف باستخدام الفحص المجهري ثنائي الفوتون في يرقات الزرد

مايو 29, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: موتو، أ.، وآخرون. استئصال مجموعة عصبية باستخدام ليزر ثنائي الفوتون وتقييمه باستخدام تصوير الكالسيوم والتسجيل السلوكي في يرقات الزرد. J. Vis. Exp. (2018)

في هذا الفيديو، تم عرض إجراء الاستئصال بالليزر ثنائي الفوتون ، مما يتيح التدمير الانتقائي للخلايا العصبية الفلورية في يرقات الزرد المجمدة بالأغاروز. يؤكد التصوير عالي الدقة قبل الإجراء وبعده تلف الخلايا العصبية الفعال ، كما لوحظ من خلال غياب التألق.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. <-span style='color:black;'> استئصال مجموعة سكانية فرعية من الخلايا العصبية باستخدام مجهر ليزر ثنائي الفوتون
<نمط div = 'لون الخلفية: أبيض ؛ الحدود: 1.0pt لا شيء #1A202C ؛ الهامش الأيسر: 92.0pt ؛ الهامش الأيمن: 0 سم ؛ الحشوة: 0 سم ؛ '>

  1. ابدأ بإعداد تزاوج خط Gal4 الذي يصنف الخلايا العصبية المحددة المراد دراستها و UAS: EGFP أو UAShspzGCaMP6s. تأكد من استخدام nacre لكلا الوالدين بحيث nacre يمكن الحصول على متماثل الزيجوت.
    NOTE: متماثل الزيجوت من nacre لا تحتوي على ميلانوفورات على سطح الجسم (الشكل 1 ب)). في هذه الدراسة ، يتم استخدام خط Gal4 gSAIzGFFM119B (الذي يصنف pretectum) وخط Gal4 آخر hspGFFDMC76A (الذي يصنف ILH (فص ما تحت المهاد).

  2. في اليوم التالي من إعداد التزاوج، اجمع بيض الزرد، وارفعها إلى مرحلة اليرقات وعند هذه النقطة ستعبر الخلايا العصبية ذات الأهمية عن مراسلي الفلورسنت.

  3. قم بتركيب يرقة الزرد في 2٪ نقطة انصهار منخفضة الاغاروز (الشكل 1 ب).

<نمط div = 'border: 1.0pt none #1A202C ؛ margin-left: 166.0pt ؛ margin-right: 0cm ؛ padding: 0cm ؛ '>

  1. ابدأ بتحضير محلول مخزون الاغاروز بنسبة 2٪: قم بإذابة 2 جم من مسحوق الاغاروز منخفض نقطة الانصهار في 100 مل من ماء النظام (i.e.، الماء المستخدم للحفاظ على أسماك الزرد البالغة في نظام المياه المتداولة) أو الماء E3، عن طريق إحضار الماء إلى نقطة الغليان في الميكروويف، والخلط بقوة.

    1. قم بتسخين مخزون الاغاروز منخفض نقطة الانصهار بنسبة 2٪ حتى يغلي. صب 3.5-4.0 مل من الاغاروز على غطاء طبق بتري مقاس 6 سم. انتظر حتى يبرد الاغاروز حتى يصبح دافئا عند لمسه قبل المتابعة.

    2. بعد ذلك، ضع يرقة واحدة (غير مخدرة في هذه الخطوة) في الاغاروز. استمر في ضبط موضع اليرقة واتجاهها بحيث تكون منتصبة ، باستخدام إبرة تشريح (الشكل 1 ج) ، حتى تصلب الاغاروز لضمان الوضع الصحيح لليرقة.
      NOTE: ستستمر اليرقة في السباحة بينما تصلب الاغاروز.

    3. بمجرد وضع اليرقة ، اترك 5 دقائق حتى يتجمد الاغاروز تماما.

    4. صب 5 مل من محلول التريكيين (0.4٪ بتركيز عمل 1x) فوق الاغاروز.
      NOTE: لتجنب حركات اليرقات أثناء الاستئصال بالليزر ، يجب أن تبقى اليرقات مخدرة طوال عملية الاستئصال.

  1. استئصال اليرقة باستخدام وظيفة التبييض في نظام مجهر ليزر ثنائي الفوتون.

<نمط div = 'الحدود: 1.0pt لا شيء #1A202C ؛ margin-left: 130.0pt ؛ margin-right: 0cm ؛ padding: 0cm ؛ '>
    <
  1. p style = 'border-bottom-color: #1A202C ؛ border-bottom-width: 0cm ؛ border-style: none ؛ padding: 0cm ؛ '> ضع اليرقة المضمنة في agarose تحت مجهر مسح ليزر ثنائي الفوتون وابدأ نظام الفحص المجهري.

  2. ابدأ برنامج الحصول على الصور وانقر فوق الزر "تشغيل" في علامة التبويب "الليزر" لتشغيل الليزر (الشكل 1D). انتظر حتى تتغير "حالة" الليزر من "مشغول" إلى "مغلق في الوضع".

  3. في علامة التبويب "القنوات"، اضبط الطول الموجي لليزر على 880 نانومتر (الطاقة القصوى: حوالي 2,300 ميجاوات) لاستئصال EGFP (بروتين الفلورسنت الأخضر المحسن) ، أو عند 800 نانومتر (الطاقة القصوى: حوالي 2,600 ميجاواط) لاستئصال GCaMP.

  4. حدد العدسة الموضوعية 20X عن طريق تحريك مسدس العدسة يدويا. انقر فوق علامة التبويب "تحديد الموقع" ، وانقر فوق "GFP" (بروتين الفلورسنت الأخضر) لتغيير المسارات البصرية ، وعرض التألق مباشرة عن طريق العين.

  5. حدد موقع دماغ يرقات الزرد في مركز الرؤية ؛ ثم انقر فوق علامة التبويب "اكتساب" للعودة إلى الفحص المجهري ثنائي الفوتون.

  6. كسجل لحالة "قبل الاستئصال"، التقط صورة z-stack باستخدام العدسة الموضوعية 20X بسرعة مسح ضوئي عالية (لتجنب التلف الحراري). قارن لاحقا الصور الملتقطة قبل تجارب الاستئصال وبعدها (الشكل 2 أ). للحصول على z-stack ، انقر فوق "Z-Stack" لتحديد خيار z-stack وتوسيع علامة التبويب. اضبط الحد الأدنى (انقر فوق الزر "تعيين أولا") بعد التركيز على الطرف البطني لدماغ اليرقات ، وقم بتعيين الحد الأعلى (انقر فوق الزر "تعيين الأخير") بعد التركيز على الجزء الظهري من السطح الظهري للدماغ. ثم انقر فوق الزر "بدء التجربة" لتشغيل الحصول على صور z-stack.

  7. حدد العدسة الموضوعية 63X عن طريق تحريك مسدس العدسة يدويا.

  8. انقر فوق علامة التبويب "تحديد الموقع" للتبديل إلى الفحص المجهري epi-fluorescent ، وحدد موقع الخلايا المراد استئصالها في مركز الرؤية بالعين ، ثم انقر فوق علامة التبويب "اكتساب" للعودة إلى الفحص المجهري بالليزر.

<نمط div = 'لون الخلفية: أبيض ؛ الحدود: 1.0pt لا شيء #1A202C ؛ margin-left: 54.0pt ؛ margin-right: 0 cm ؛ padding: 0 cm ؛ '>

  1. في علامة التبويب "وضع الاستحواذ" ، اضبط "حجم الإطار" على 256 × 256. انقر فوق "مباشر" وراقب الخلايا العصبية ذات الأهمية.

  2. بدءا من الجانب الظهري الأكبر، ابحث عن مستوى بؤري تكون فيه الخلايا المراد استئصالها في بؤرة التركيز.

  3. ضع علامة على مساحة دائرية صغيرة تبلغ حوالي ثلث حجم الخلية في قطر كل خلية عصبية كمنطقة اهتمام (ROI) باستخدام وظيفة "المناطق".

  4. اضبط سرعة المسح الضوئي على 13.93 ثانية/256 × 256 بكسل (134.42 ميكرومتر × 134.42 ميكرومتر)، وهو ما يتوافق مع وقت سكون الليزر البالغ حوالي 200 ميكرو ثانية/بكسل، أو 200 ميكرو ثانية/0.5 ميكرومتر. أيضا ، قم بتعيين 4 تكرارات ("دورة التكرار: 4"). بدلا من ذلك ، قم بتحسين عدد التكرارات وسرعة المسح الضوئي بحيث يتم تحقيق الاستئصال الكافي.

  5. قم بأداء وظيفة "التبييض" للاستئصال ، بالاشتراك مع "السلسلة الزمنية (دورتان)" لتصوير العينة (قبل وبعد الاستئصال) و "المناطق" (لتعيين عائد الاستثمار) أو الوظائف المكافئة في البرنامج المستخدم (الشكل 1D).

  6. من خلال مقارنة الصورة الأولى (قبل الاستئصال) والصورة الثانية (بعد الاستئصال) في دورة السلسلة الزمنية ، تأكد من أنه بعد التبييض ، ينخفض التألق في الخلايا المستهدفة إلى ذلك الذي لوحظ على مستوى الخلفية (الشكل 2 ب).

  7. إذا كان التألق لا يزال موجودا بعد الاستئصال، فقم بزيادة عدد التكرارات.

  8. بعد ذلك، حرك المستوى البؤري أعمق قليلا (i.e. ، باتجاه الجانب البطني) ، واختر المستوى البؤري التالي حيث تظهر الخلايا غير المستثنية.

  9. أداء وظيفة التبييض. كرر هذه الخطوات حتى يتم استئصال جميع الخلايا في البنية العصبية ذات الاهتمام.

  10. بعد المرور عبر جميع المستويات البؤرية التي تغطي الهياكل العصبية المراد استئصالها، تحقق من الخلايا بحثا عن التألق الملغى. إذا تبين أن بعض الخلايا لا تزال فلورية بسبب عدم كفاية الاستئصال ، فقم بإشعاعها بالليزر مرة أخرى كما هو موضح أعلاه.

  11. إذا احتاجت اليرقة إلى الاسترداد من الاغاروز بعد تشعيع الليزر، فلا تحاول إجبارها على الخروج من الاغاروز لأن ذلك قد يؤدي إلى إتلاف اليرقة. بدلا من ذلك ، قم بعمل قطع صغيرة بعناية في الاغاروز حول اليرقة بشكل عمودي على سطح جسمها. ثم انتظر حتى تسبح اليرقة من الاغاروز من تلقاء نفسها عندما يتلاشى المخدر.

  12. انتقل إلى اليرقة التالية للاستئصال أو قم بإجراء تجارب التحكم باستخدام مجموعة أخرى من الخلايا العصبية غير المشاركة في السلوك قيد التحقيق.
    NOTE: هنا، كعنصر تحكم، الخلايا العصبية للبصيلة الشمية في UAS: EGFP؛ gSAIzGFFM119B تم استئصال اليرقات بالليزر باستخدام نفس البروتوكول الموضح أعلاه (الشكل 2 أ، يمين).

  13. اترك عدة ساعات أو 1 يوم للتعافي قبل المتابعة إلى التصوير المتردد أو التسجيل السلوكي. خلال فترة التعافي هذه ، تحقق من صحة اليرقات (i.e. ، السباحة العفوية العادية ، لا يوجد تلف حراري واضح حول المنطقة المفصولة ، etc.) وقم بإزالة اليرقات التي تظهر أي علامات من سوء الصحة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

<فئة الشكل = 'جدول' ><فئة الجدول = 'ck-table-resize' النمط = 'collapse border: collapse ؛ font-family: Calibri ؛ حجم الخط: 11pt ؛ تخطيط الجدول: ثابت ؛ 'cellpacing = '0' cellpadding = '0' dir = 'ltr' border = '1' data-sheets root = '1' data-sheets-baot = '1'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات < td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمات:break-word;wrap-strategy:4;'>NuSieve GTG AgaroseLonzaCat.#50080< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;wrap-strategy:4;'> انخفاض درجة حرارة الانصهار agarose6 cm petri dish< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>FALCON< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كسر الكلمة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > المنتج#:351007 dislysising needleAS ONE Corporationقط. رقم 2-013-01https://keystone-lab.com/en/item/detail/404142< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>LSM7MP< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشوة: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة كسر ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > كارل زايس< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الفائض : مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < نمط TD = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>مجهر المسح الضوئي بالليزر ثنائي الفوتون < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛' >< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>W Plan-Apochromat 63x / 1.0Carl Zeiss Imager.Z1 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> مجهر مضان epi < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛' >< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> ZEN < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > كارل زايس< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو : 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> برنامج الحصول على الصور للمجاهر متحد البؤر < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛' >< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> حشية غرفة التهجين الآمن ، 8 غرف ، قطر 9 مم × عمق 0.8 مم < نمط TD = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >المجسات الجزيئية< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;font-family:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشو:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفاف استراتيجية:4;'>كتالوج # S-24732 Imageing Chambers< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >Grace Bio-LabsCoverWell Imaging Chambers PCI-A-2.5< td style = 'background-color: #ffffff ؛ color: #1a202c ؛ font-family: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> السكين الجراحي < نمط td = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto; حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي. الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل. المساحة البيضاء: عادي. التفاف الكلمات: كلمة فاصلة. التفاف الاستراتيجية: 4 ؛ >ماني < td النمط = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: الروبوت ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '>سكين العيون MST15 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> ORCA-Flash4.0 < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشوة: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ >Hamamatsu Photonics < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ > الموديل: C11440-22CU كاميرا CMOS علميةHCImageHamamatsu Photonics < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> < td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> برنامج حدة الصورة < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛' > وحدة تسجيل القرص الصلب< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;boardding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>Hamamatsu Photonics SZX7Olympus DF PL 0.5XOlympus Point Grey Grasshopper3 4.1 MP Mono USB3 VisioProduct No. GS3-U3-41C6NIR-CCMOS camera XIMEA< td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>Product No. MQ042RG-CMCMOS cameraCCS< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمات:break-word;wrap-strategy:4;'>نموذج: LDR2-100SW2-LA< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>white LED < td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمات:break-word;التفاف استراتيجية:4;'>شبكة نايلون 32μmTokyo ScreenN-No.380Thttp://www.tokyo-screen.com/cms/sta20347/< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> شبكة نايلون 13 ميكرومترTokyo ScreenN-No. 508T-K<td style='background-color:#ffffff;color:#1a202c;font-family:Roboto;font-size:7pt;font-weight:normal;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;white-space:normal;word-wrap:break-word;wrap-strategy:4;'>http://www.tokyo-screen.com/cms/sta20347/< td style='لون الخلفية:#ffffff;اللون:#1a202c;عائلة الخط:Roboto;حجم الخط:7pt;وزن الخط:عادي;الفائض:مخفي; الحشوة:0px 3px;المحاذاة الرأسية:أسفل;المساحة البيضاء:عادي;التفاف الكلمة:break-word;التفيف استراتيجية:4;'> المعدن 150 ميكرون فتحةTokyo Screen http://www.tokyo-screen.com/cms/sta20341/#amimetal seive 75 micron apertationTokyo Screen http://www.tokyo-screen.com/cms/sta20341/#amiEBIOS Asahi Food & Healthcare، Co. Ltd.< td style='لون الخلفية:#ffffff;overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> Dry beer yeastLabVIEWوطني الأدوات a integrated development environment for program< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> Mai-Tai HP< td style = 'لون الخلفية: #ffffff ؛ اللون: #1a202c ؛ عائلة الخط: Roboto ؛ حجم الخط: 7pt ؛ وزن الخط: عادي ؛ الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ المساحة البيضاء: عادي ؛ التفاف الكلمات: كلمة فاصلة ؛ استراتيجية التفاف: 4 ؛ '> الأطياف الفيزياء -two-photon laser

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

Two Photon MicroscopyNeuronal AblationZebrafish LarvaeLaser AblationCalcium ImagingFluorescence ImagingBrain ImagingEpifluorescence MicroscopyZ Stack AcquisitionROI Selection

مقالات ذات صلة