تصوير بفاصل زمني لخلايا القشرة الدماغية الأولية للفأر المنقولة

الملخص

المصدر: Landeira, B. S.,et al., تصوير حي لخلايا القشرة الدماغية الأولية باستخدام نظام ثقافة ثنائي الأبعاد. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح الفيديو استخدام التصوير بفاصل زمني لتتبع الأسلاف القشرية المصنفة فلورسنت ، ومراقبة انقسامها وتمايزها ، ودراسة تطور النسب في خلايا القشرة الدماغية الأولية

البروتوكول

1. المجهر بالفيديو بفاصل زمني

ملاحظة: تتطلب هذه الخطوة مجهرا مضوقا مقلوبا مع غرفة حضانة (انظر جدول المواد).

1. بعد الإصابة بالفيروس القهقري ، ضع لوحة زراعة الأنسجة في حاضنة متصلة بوحدات التحكم في درجة الحرارة و CO ₂ .
   ملاحظة: يمكن أن يساعد التسخين المسبق للغرفة لمدة 3 ساعات قبل بدء التصوير في تقليل الانجراف وإلغاء التركيز أثناء الاستحواذ.
   ملاحظة: يجب أن تحافظ الغرفة على الخلايا في ظروف ثابتة تبلغ 37 درجة مئوية و 5٪ CO₂.
2. حدد موضعا في المحور XY ليكون بمثابة نقطة صفر (XY = 0). سيسمح هذا للإشارة بالعثور على المراكز مرة أخرى في المستقبل.
   

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة

الاسم	الشركة	رقم فهرسي	التعليقات
ImageJ	NIH
tTt	ETH Zurich
Cell Observer Microscope	Zeiss
برنامج أداة التتبع (tTt)		https://www.bsse.ethz.ch/csd/software/ttt-and-qtfy.html