التصوير الانعكاسي المنتشر متعدد الأطياف لتدفق الدم الدماغي للفئران وبنية الأنسجة

الملخص

المصدر: Nishidate, I., et al. التقييم المتزامن لديناميكا الدم الدماغية وخصائص تشتت الضوء لدماغ الفئران في الجسم الحي باستخدام تصوير الانعكاس المنتشر متعدد الأطياف. J. Vis. Exp. (2017)

يوضح هذا الفيديو استخدام التصوير الانعكاسي المنتشر متعدد الأطياف لتحليل تدفق الدم الدماغي ومستويات الأكسجين وتغيرات بنية الأنسجة في الفئران المخدرة ، مما يوفر رؤى حول ديناميكا الدم في الدماغ والتشكل في ظل ظروف مختلفة.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. الحصول على عينة من الصور
   } ملاحظة: يتم التقاط صور شدة الضوء المنعكس بشكل منتشر لدماغ الفئران المكشوف بتسعة أطوال موجية وحفظها على القرص الصلب لجهاز كمبيوتر شخصي باستخدام نفس شروط الاستحواذ.
   1. ضع الجرذ برفق على المسرح واضبط مستوى المسرح ببطء حتى تتمكن الكاميرا من التركيز على سطح دماغ الفئران.
   2. حدد الأمر "حفظ" من قائمة الملفات لحفظ صورة في ملف.
   3. قم بتغيير موقع الفلتر عن طريق تدوير عجلة المرشح.
   4. احفظ صورة بالأطوال الموجية الأخرى وفقا للعملية الموضحة أعلاه. يجب أن يحدد اسم الملف العينة والطول الموجي ( على سبيل المثال ، R500 ، R520 ، R540 ... R760).
2. الحصول على الصور المظلمة
   } ملاحظة: يمكن لكاميرا CCD (الجهاز المقترن بالشحن) توليد شدة ضوء استجابة لإشارة كهربائية. ومع ذلك ، هناك بعض الإخراج الطفيف بسبب الضوضاء في الدوائر الكهربائية وأجهزة الكشف ، حتى لو لم يدخل الضوء إلى الكاشف ؛ وهذا ما يسمى ضوضاء التيار المظلم. لقياس الشدة الطيفية للضوء بدقة ، يجب تسجيل مكون التيار المظلم كصورة مظلمة ثم طرحه من الإشارة المقاسة. الصورة المظلمة هي صورة تم التقاطها مع حظر مسار الضوء.
   1. قم بإيقاف تشغيل مصدر ضوء مصباح الهالوجين.
   2. قم بسد مسار الضوء إلى نظام كاميرا CCD باستخدام لوحة التدريع.
   3. حدد الأمر "حفظ" من قائمة الملفات لحفظ صورة في ملف. يجب أن يحدد اسم الملف العينة ( على سبيل المثال، داكن).

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-resize'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات 150-W مصباح الهالوجين مصدر الضوءHayashi Watch Works Co., Ltd, طوكيو ، اليابانLA-150SAEدليل الضوءHayashi Watch Works Co., Ltd, طوكيو ، اليابانLGC1-5L1000جمع عدسةHayashi Watch Works Co., Ltd ، طوكيو ، اليابانSH-F16مرشحات التداخل l@500nmEdmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان # 65088مرشحات التداخل l@520nmEdmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان # 65093مرشحات التداخل l@540nmEdmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان # 65096مرشحات التداخل l@560nmEdmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابان # 67766مرشحات التداخل l@570nmإدموند للبصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان # 67767مرشحات التداخل l@580nmإدموند للبصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان # 65646مرشحات التداخل l@600nmإدموند للبصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان # 65102مرشحات التداخل l@730nmإدموند للبصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان # 65115مرشحات التداخل l@760nmإدموند للبصريات اليابان المحدودة ، طوكيو ، اليابان # 67777عجلة المرشح الآليةشركة أندوفر ، نيو هامبشاير ، الولايات المتحدة الأمريكيةFW-MOT-12.5كاميرا CCD مبردة 16 بتBitran ، اليابانBS-40عدسة تكبير الفيديوEdmund Optics Japan Ltd ، طوكيو ، اليابانVZMTM300iمعيار أبيض مع انعكاس منتشر بنسبة 99٪Labsphere Incorporrated ، North Sutton ، NH ، الولايات المتحدة الأمريكيةSRS-99-020