Method Article

تصور هجرة خلايا القمة العصبية في جنين الزرد باستخدام التصوير بفاصل زمني متعدد الفوتون

June 17th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

المصدر: Williams, A. L., et al. تصوير الفوتون متعدد الفوتون لتصور التطور في الوقت الفعلي: تصور خلايا القمة العصبية المهاجرة في أجنة أسماك الزرد. J. Vis. Exp. (2017)

}يعرض هذا الفيديو بروتوكول تصوير بفاصل زمني متعدد الفوتون لتصور هجرة خلايا القمة العصبية في جنين الزرد في الوقت الفعلي بدقة عالية.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. إعداد المجهر للتصوير بفاصل زمني

< نمط p = 'margin-left: 40px;'>1. تحديد إعدادات الليزر

1. تحديد الطول الموجي لليزر لاستخدامه. استخدم طولا موجيا يبلغ ضعف الطول الموجي للإثارة للفلوروفور محل الاهتمام (على سبيل المثال ، الطول الموجي بين 880 و 940 نانومتر للبروتين الفلوري الأخضر (GFP).
ملاحظة: في الدراسة الحالية ، كان إعداد الطول الموجي ل GFP بين 880 و 940 نانومتر. كلما زاد الطول الموجي ، انخفضت طاقة خرج الليزر.

2. تحديد ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
figure-results-1

الشكل 1. اعداد. أ. كل مكون من مكونات جهاز تركيب الأجنة ، بما في ذلك غرفة الحمام المفتوحة ومنصة التبادل السريع ومحول المرحلة. ب . تجميع غرفة الحمام المفتوحة. ج. إضافة محلول الاغاروز 2٪ (60-7.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

<فئة الشكل = 'الجدول' >< فئة الجدول = 'ck-table-ressize'>List of materials used in this article Name Company Catalog Number Comments TC SP5 MP مجهر متعدد الفوتونLeica Microsystems CMS GmbH Mai Tai DeepSee Ti-Sapphire LaserSpectraPhysics Laser Safety BoxLeica Microsystems CMS GmbH برنامج Leica Application Suite X (LAS X)Leica Microsystems CMS GmbH Photoshop CS 6 الإصدار 13.0 x64 SoftwareAdobe iMovie الإصدار 10.1.4 برنامجApple Open Bath ChamberWarner InstrumentsRC-40HPHigh ProfileQuick منصة التبادلWarner InstrumentsQE-135 مممحولالمرحلة Warner InstrumentsSA-20LZ-AL16.5 × 10 سمLow-Melt AgaroseISC BioexpressE-3112-25GeneMate Sieve GQA Low MeltAgarose ، 25 جرامأغطية زجاجيةFisher Scientific12-545-102 زجاج غطاء دائري. 25 مم قطرشحوم فيشر عالية الفراغ الأنبوبالعلمي 14-635-5C2.0 رطل. مؤشر داو جونز CORNINGCORPORATION1658832

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Neural Crest CellsZebrafish EmbryoMulti Photon ImagingTime Lapse ImagingEGFP LabelingZ Stack AcquisitionWater Immersion ObjectiveFluorescence VisualizationEmbryo Media Refill3D Deconvolution

Related Articles