تقنية لشفط المنوية البربخية عن طريق الجلد ومعالجتها

الملخص

يوضح هذا الفيديو الشفط عن طريق الجلد للحيوانات المنوية البربخية من مريض مصاب بفقد النطاف ، وهي حالة تتميز بغياب الحيوانات المنوية في السائل المنوي. يتضمن الإجراء تطهير منطقة كيس الصفن ، وشفط السائل البربخي باستخدام حقنة بمحلول مزرعة متخصص ومعالجة العينة التي تم جمعها لعزل المنوية القابلة للحياة. ثم تكون المنوية المحضرة جاهزة للاستخدام في إجراءات علاج العقم المتقدمة.

البروتوكول

تم تنفيذ جميع الإجراءات التي تشمل المشاركين البشريين وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية والوطنية والدولية لرعاية الإنسان وتم مراجعتها من قبل مجلس المراجعة المؤسسية المحلية.

1. التحضير قبل الجراحة

1. إعداد المستلزمات الجراحية
   1. {{}} إعداد المستلزمات اللازمة للإجراء الجراحي، بما في ذلك حزمة أدوات جراحية واحدة، وحقنتين سعة 5 مل مزودة بإبرة 0.7 مم (0.7 × 32 شطبة طويلة رقيقة الجدار (TWLB))، محلول مطهر 60 مل ، زوجان من القفازات المطاطية المعقمة ، وقطعة واحدة من الضمادات اللاصقة المعقمة.
   2. اطلب من الممرضات فحص عبوة الأدوات الجراحية الخاضعة للتعقيم بالبخار عالي الضغط بحثا عن أي ضرر أو انتهاء صلاحية. بمجرد التأكد من خلوه من أي مشاكل ، ضعه على طاولة الأدوات وافتح الطبقة الخارجية.
   3. لأطباء الذكورة: ارتد قفازات مطاطية معقمة ، ثم افتح الطبقة الداخلية لحزمة الأدوات الجراحية للتحقق مما إذا كان شريط مؤشر التعقيم مؤهلا أم لا ، وكذلك التأكد من اكتمال جميع الأدوات الموجودة بالداخل.
   4. قم بإعداد حقنتين سعة 5 مل مجهزتين بإبر 0.7 مم (0.7 × 32 تيراولب) للتخدير والجراحة ، ثم فتح الأمبولة التي تحتوي على حقن الليدوكائين.
   5. استخدم حقنة معقمة سعة 5 مل لشفط حقن الليدوكائين ، وبالتالي التخلص من فقاعات الهواء من المحقنة.
2. تحضير المريض الذي يخضع لعملية جراحية
   1. ترتيب تحضير الجلد للمريض. احلق عانة العجان باستخدام ماكينة حلاقة يمكن التخلص منها واغسل العجان والجلد المحيط به بالماء والصابون للتأكد من عدم وجود عانة أو بقع زائدة.
   2. ضع المريض على طاولة العمليات في وضع بضع الحصوات ، وقم بإزالة البنطال ، وقم بتأمين الثوب العلوي فوق السرة لكشف العجان وأسفل البطن بالكامل أسفل السرة.
   3. اضبط زاوية المصباح الخالي من الظل لإضاءة كيس الصفن للمريض.
   4. استخدم ملقط بيضاوي للإمساك بكرة شاش معقمة ، ثم يتم غمرها بالكامل في محلول مطهر لبدء عملية التطهير. قم بتطهير الجلد من المحيط إلى كيس الصفن بالترتيب التالي: أسفل البطن ، والجزء الأمامي والداخلي من الفخذين ، ومنطقة العجان ، والقضيب ، وكيس الصفن.
   5. بعد التطهير الأولي ، استبدل كرة الشاش المعقمة وكرر عملية التطهير. بعد ثلاث جولات من التطهير ، تكتمل عملية التطهير قبل الجراحة.
   6. ابدأ عملية وضع المناشف المعقمة بعد اكتمال التطهير. أولا ، ضع منشفة مربعة معقمة تحت أرداف المريض ، ثم انشر منشفة معقمة حول منطقة الجراحة والمناطق المحيطة بها ، مع تعريض كيس الصفن بالكامل في منطقة الثقب.
3. تحضير محلول استزراع G-MOPS-PLUS
   1. اطلب من فنيي غرفة الاستزراع الجنينية نقل حوالي 2 مل من محلول استزراع G-MOPS-PLUS إلى طبق الاستزراع باستخدام ماصة باستور معقمة. أغلق الغطاء بشكل صحيح ، ثم قم بتسليمه بعد ذلك إلى الممرضة في غرفة العمليات من خلال نافذة النقل.
   2. ضع طبق الثقافة على المنشفة المعقمة على طاولة الأدوات وافتح الغطاء.
   3. باستخدام حقنة أخرى سعة 5 مل ، قم بشفط ما يقرب من 0.2 مل من محلول استزراع G-MOPS-PLUS ، ثم قم بإزالة فقاعات الهواء لاستخدامها في المستقبل.

2. التخدير والجراحة

1. لأطباء أمراض الذكورة: أمسك المحقنة المملوءة بحقن الليدوكائين في اليد اليمنى مع تثبيت الحبل المنوي للمريض باليد اليسرى. ثقب تحت الجلد وحقن كمية صغيرة من الليدوكائين لتشكيل ويلي. بعد ذلك ، قم بالثقب تحت الجلد وتعميق في أنسجة الحبل المنوي ، وابدأ في حقن ما يقرب من 0.5 مل من الليدوكائين بعد التأكد من عدم عودة الدم. لتحقيق تأثير أفضل لتخدير إحصار الحبل المنوي ، قم بتغيير اتجاه إبرة الحقن من 2 إلى 3 مرات في نفس نقطة البزل وكرر عملية حقن الليدوكائين في الحبل المنوي.
2. أمسك كيس الصفن للمريض باليد اليسرى ، وتأمين البربخ الذي يتطلب ثقبا. عن طريق الجسس ، تأكد من موقع البربخ حيث يلزم البزل الجراحي باستخدام اليد اليمنى. بعد ذلك ، أمسك المحقنة التي تحتوي على الليدوكائين المذكورة أعلاه وحقنها تحت الجلد في موقع البزل لتحقيق التخدير الموضعي.
3. أمسك كيس الصفن للمريض باليد اليسرى ، وتأمين البربخ الذي يتطلب ثقبا. بعد ذلك ، أمسك المحقنة سعة 5 مل التي تحتوي على محلول مزرعة G-MOPS-PLUS (0.2 مل) في اليد اليمنى وثقب عموديا على الجلد ، وتخترق أنسجة البربخ. حافظ على الضغط السلبي في المحقنة وثقب الأنسجة البربخية بشكل متكرر بحيث يدخل السائل البربخي من خلال الإبرة تحت تأثير الضغط السلبي.
4. استمر في الحفاظ على الضغط السلبي واسحب إبرة الثقب ببطء. حقن السائل البربخي المستخرج في طبق الاستزراع. بعد الانتهاء من الحقن ، قم بشفط محلول مزرعة G-MOPS-PLUS القريب لشطف المحقنة من أجل زيادة كمية السائل البربخي الذي تم حقنه في طبق الاستزراع.

3. علاج العينات الجراحية

1. البحث عن المنوية البربخية ومراقبتها
   1. نقل طبق المزرعة الذي يحتوي على سائل مزرعة G-MOPS-PLUS والسائل البربخي إلى فني مختبر الأجنة من خلال نافذة النقل.
   2. يتولى الفنيون في غرفة الثقافة الجنينية طبق الثقافة ويضعونه على مسرح المجهر البصري المقلوب ، ويؤمنه. قم بتشغيل مفتاح الطاقة الخاص بالمجهر وقم بتدوير زر ضبط الضوء إلى شدة إضاءة مناسبة.
   3. قم بتدوير محول المجهر البصري المقلوب ، وحدد العدسة الموضوعية 10x ، وقم بتدوير اللوالب البؤرية الخشنة والدقيقة بدورها لضبط البعد البؤري. راقب حالة التركيز وابحث عن المنوية البربخية تحت المجهر.
   4. استمر في تدوير محول المجهر المقلوب إلى العدسة الموضوعية 40x ، وقم بتدوير دوامة التركيز الدقيقة لضبط البعد البؤري ، ومراقبة حقل المنوية البربخية حسب المجال. تقييم عدد ونوعية المنوية البربخية. يمكن ملاحظة أن المنوية البربخية الطبيعية قد نضجت وحصلت على القدرة على الحركة.
2. علاج المنوية البربخية
   1. عند ملاحظة ما يكفي من المنوية البربخية النشطة، انقل السائل الموجود في طبق الاستزراع إلى أنبوب طرد مركزي سعة 15 مل من خلال ماصة باستور معقمة.
   2. ضع أنبوب الطرد المركزي أعلاه على صينية التوازن واستخدم أنبوب طرد مركزي من نفس المواصفات يحتوي على ماء معقم إلى المستوى.
   3. افتح باب جهاز الطرد المركزي ، ضع أنابيب الطرد المركزي في فتحة البطاقة بشكل متماثل ، ثم أغلق باب جهاز الطرد المركزي. اضبط قوة الطرد المركزي على 500 × g ووقت الطرد المركزي إلى 5 دقائق من خلال لوحة التحكم. اضغط على الزر START في لوحة التحكم لبدء عملية الطرد المركزي.
   4. بعد اكتمال عملية الطرد المركزي ، افتح باب جهاز الطرد المركزي ، وقم بإزالة أنبوب الطرد المركزي الذي يحتوي على سائل البربخ. قم بفك الغطاء ، واستنشق المادة الطافية برفق باستخدام ماصة باستور معقمة ، وتخلص من المادة الطافية المسحوبة.
   5. باستخدام ماصة باستور معقمة، انقل ما يقرب من 2 مل من محلول الاستزراع G-IVF-PLUS إلى أنبوب الطرد المركزي. ثم قم بسحب المحلول برفق في أنبوب الطرد المركزي لإعادة التعليق تماما.
   6. كرر عمليات التوازن والطرد المركزي وإزالة الطبقة العليا من السائل.
   7. وفقا لاحتياجات حقن المنوية داخل السيتوبلازم (ICSI) ، قم بنقل ما يقرب من 0.5 مل من محلول مزرعة G-IVF-PLUS إلى أنبوب الطرد المركزي باستخدام ماصة باستور معقمة ، وقم بنفخ المنوية البربخية برفق في الجزء السفلي من أنبوب الطرد المركزي لجعلها معلقة تماما.
   8. استخدم المنوية البربخية المعلقة تماما مباشرة لعملية الحقن المجهري.

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول' ><فئة الجدول = 'ck-table-resize' النمط = 'collapse border: collapse ؛ font-family: Calibri ؛ حجم الخط: 11pt ؛ تخطيط الجدول: ثابت ؛ 'cellpacing = '0' cellpadding = '0' dir = 'ltr' border = '1' data-sheets root = '1' data-sheets-baot = '1'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات CentrifugeOrigio MAXIG123511110440max rpm: 4000; ماكس RCF: 2826 × gtubege Centrifuge styleFalcon35209515 mLCombination Test tube standShenzhen Zhicheng Long Technology Co., LTDNone culture dishFalcon35300135 مم × 10 مم محلول مطهرShanghai Likang Disinfection high-tech Co., LTD<td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>20230801S60 mLG-IVF PLUSVitrolife Sweden AB511574 حل مزرعة لمعالجة السوائل البربخيةG-MOPS PLUSVitrolife Sweden AB511712culture solution for prection operationHigh Security Embryo Pasteur PipettesDarwinD2208003230 mm, Fire Polished the instrument table DZ202012010< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'> المجهر البصري المقلوبOLYMPUS IX71< td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>Lidocaine hydrochloride injection H310210725 mL: 0.1 gmedical التوازن < td style = 'overflow: hidden ؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '>Shanghai Guangzheng Medical Instrument Co., LTD < td style = 'overflow: hidden؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom;'> 201609-4854 JYT-2 medical surgical masks16122032817.5×9.5 cm(unfold size 17.5×17 cm)جدول التشغيل الذي يحرك بمحرك YZB0089-2011 < نمط td = 'الفائض: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> جدول العمليات < نمط tr = 'الارتفاع: 20 بكسل ؛'>< td style = 'overflow: مخفي ؛ الحشو: 0 بكسل 3 بكسل ؛ المحاذاة الرأسية: أسفل ؛ '> ضمادة الجرح ذاتية اللصق < td style = 'overflow: hidden؛ padding: 0px 3px ؛ vertical-align: bottom ؛ '> Guangzhou Ya Tian Biological Technology Co. ، LTD201421403486 cm × 7 cm(3 cm x 4 cm)Orbitile Underdermic Hatringes for Single UseShandong Weigao Group Medical Polypolymer Products Co., LTD202309215 mL, مجهزة ب 0.7mm (0.7 × 32TWLB)Testing Testing Powder Surgery Glove Latx LessBeijing Ruijing Latex Products Co., LTD202303032271/2, 61/2Surgical Instruments package Supply Department of the Third Affiliate of the University of Sun Yat-sen10228376التعقيم الأوتوكلافSurgical lightShanghai Jishun Medical Device Manufacturing Co., LTDJSL2009-160D Vertical flow clean tableSuzhou Wanda Purification Technology Co., LTDDS-CZ-1311006SH-CJ-2FD-1500