تثبيط النشاط العصبي واكتشافه باستخدام الفيزيولوجيا الكهربية في الفئران

الملخص

المصدر: Lai, J., et al. التسجيل الفيزيولوجي الكهربي المتزامن والحقن الدقيق للعوامل المثبطة في دماغ القوارض. J. Vis. Exp. (2015)

يوضح هذا الفيديو تقنية قائمة على الحقن المجهري لتسجيل الخلايا العصبية المتزامنة وتثبيطها في القولون العلوي للفئران. يتضمن الإجراء الاستهداف التجسيمي ، وحفر الجمجمة ، وإدخال حقن ، والذي يوفر ناقلا عصبيا مثبطا أثناء تسجيل النشاط العصبي. يثير التحفيز الضوئي إمكانات العمل ، بينما يثبط الحقن المجهري للدواء استثارة الخلايا العصبية. مع انخفاض مستويات الناقل العصبي ، يعود النشاط العصبي إلى خط الأساس ، مما يتيح دراسة كل من التثبيط والتعافي.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. تجميع ماصة حقن التسجيل

1. اسحب شعيرات دموية زجاجية بطول 7 سم تقريبا (قطر خارجي 1 مم) باستخدام مجتذب ماصة.
2. كسر طرف الشعيرات الدموية وتحقق من الفتحة تحت المجهر الضوئي. تأكد من أن القطر الداخلي يتراوح بين 30 ميكرومتر إلى 40 ميكرومتر.
3. أدخل سلكا فضيا بطول 7 سم في الشعيرات الدموية الزجاجية مع بروز 1 سم تقريبا من الطرف غير المدبب للماصة الزجاجية.
4. ثني الخيط الزائد بشكل متعامد إلى الشعيرات الدموية الزجاجية.
5. ضع قطرة من مادة لاصقة بلاستيكية مرنة على عمود إبرة تحت الجلد 30 جراما.
6. أدخل إبرة تحت الجلد 30 جم ف....

النتائج

فئة الشكل = 'الصورة image_resized image-style-align-center' style='display:table;margin-left:auto;margin-right:auto;width:75٪;'>

الشكل 1: التمثيل التخطيطي لتجميع injectrode. يتم توصيل حقنة صغيرة (A) بماصة حقن التسجيل، والتي تتكون من إبرة تحت الجلد 30 جم (B) ملتصقة بسلك فضي (C) داخل ماصة زجاجية (D). تسلط.......

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-resize'> قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات Injection pump (UltraMicroPump III)WPI#UMP3 وحدة التحكم في الحقن (وحدة تحكم Micro4)WPI#SYS-MICRO4 حقنة هاميلتونHamliton (80301) 701LT 10 ميكرولتر SYRالمحاقن بين 5 و 10 ميكرولتر تستخدمجل السيانوا أكريليت لاصقKrazy GlueKG86648Rشكل الجل أسهل في التطبيق على عمود الإبرة تحت الجلد 30Gالماصات الزجاجيةWPI#TW100F-4جدار رقيق ، OD 1 مم OD ، معرف 0.75 مم مع ماصات خيوط مستخدمة720 مجتذب ماصة إبرةKopf720 Silver wireA-M Systems، Inc.782500عارية 0.010 "