التكيف العصبي مع التكييف المسبق المتكرر لنقص التأكسج في الفئران

الملخص

المصدر: Poinsatte، K.، et al.، Quantification of neurovascular Protection After Repetitive hypoxic Preconditioning وانسداد الشريان الدماغي الأوسط العابر في الفئران. J. Vis. Exp. (2015)

يوضح هذا الفيديو طريقة التكييف المسبق المتكرر لنقص الأكسجة (RHP) عن طريق تعريض الفأر لدورات نقص الأكسجة الخاضعة للرصدة قبل إحداث سكتة دماغية. تقيم التجربة آثارها على استقرار الحاجز الدموي الدماغي والتكيف العصبي والالتهابات.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. التكييف المسبق المتكرر لنقص التأكسج

1. تصميم مخصص لأربعة مقاييس تدفق على منظمات الغاز وإرفاقها بغرف الحث القياسية سعة 15 لترا مع أنابيب البولي فينيل كلوريد (PVC) للسماح للغاز المضغوط من خزانات الأكسجين (O₂) بالتدفق إلى الغرف عبر منفذ مدخل.
2. قسم الفئران إلى مجموعتين: مجموعة التكييف المسبق لنقص الأكسجين المتكرر (RHP) ، والتي تتعرض ل 8٪ و 11٪ O₂ ، ومجموعة التحكم ، التي تتلقى التعرض ل 21٪ O₂ (هواء الغرفة) بشكل متزامن.
3. قم بإزالة غطاء المرشح العلوي لكل قفص وضع القفص ، مع زجاجات الطعام والماء سليمة ، في الغرف المتصلة بخزانات O₂ الخاصة بها. أغلق غطاء الغرفة وثبته.
   1. افتح صمام الغاز الرئيسي للخزانات واضبط التدفق الأولي لكل غرفة حث على 2 لتر في الدقيقة (LPM) لأول 5 دقائق من التعرض. قلل معدل التدفق إلى 1 لتر في الدقيقة لبقية فترة التعرض.
   2. في نهاية التعرض، قلل التدفق إلى 0 لتر في الدقيقة وأغلق صمامات الغاز في الخزانات.
   3. افتح أغطية الغرفة واستبدل الغطاء العلوي للفلتر في كل قفص. ضع الأقفاص في السكن القياسي حتى التعرض التالي لنقص الأكسجين.
4. رش كل غرفة تحريض باستخدام NPD (Steris) أو مطهر / مزيل روائح مكافئ بعد كل استخدام.
5. كشف كل من الفئران 21٪ و RHP في نفس الوقت من اليوم على مدار أسبوعين.

المواد

< فئة الشكل = 'الجدول' >< فئة الجدول = 'ck-table-ressize'> قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات مقاييس التدفق ، المنظمونVetEquip ، Incترتيب تخصصي يتم توصيل أربعة مقاييس تدفق بأنابيب PVC مرنة مقاس 6.0 مم والتي تتصل بمنفذ المدخل في كل غرفة حث بموصل بلاستيكي أنثى. يتم تثبيت مقاييس التدفق هذه بقضيب معدني مقاس 6.5 × 1 × 1 بوصة. يتم تثبيت هذا القضيب المعدني بمقياس ضغط MI-246-P مع منفذ DISS. يمكن توصيل جهاز قياس الضغط ومقياس التدفق هذا بكل أسطوانة غاز جديدة بمفتاح ربط.21٪ خزان O₂AirGasOX USP200 11٪ خزان O₂ خزان AirGasطلب متخصص 8٪ خزان O₂AirGasطلب متخصص 15 لتر غرف الحثVetEquip941454