مقالة منهجية

تقنية التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء لتحويل فورييه لدراسة التجميع الذاتي للببتيد

أغسطس 13, 2025

في هذه المقالة

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Source: Neves، R.، et al. توليف وتوصيف الببتيدات ذاتية التجميع المعدلة 1،2-dithiolane.

يوضح هذا الفيديو التجميع الذاتي لببتيدات الأميلويد في بنية فوق جزيئية غنية بأوراق بيتا باستخدام التحليل الطيفي للأشعة تحت الحمراء لتحويل فورييه. يتم تمرير شعاع الأشعة تحت الحمراء عبر بلورة ذات معامل انكسار مرتفع ، ويتم امتصاص الطاقة عبر واجهة البلورة ويتم تسجيل العينة. يتم تحديد الهياكل الثانوية لبروتينات العينة من خلال تحليل قمم الامتصاص المميزة في مناطق معينة من طيف الأشعة تحت الحمراء ، مما يساعد في تحديد تكوين التجميع فوق الجزيئي.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
< p class = 'jove_title'>1. توصيف هياكل التجميع الذاتي فوق الجزيئات

  1. تكوين ألياف الأميلويد
    1. لتحضير محلول ذاتي التجميع ، قم بوزن 1 مجم من مسحوق الببتيد باستخدام ميزان تحليلي. يذوب في خليط (درجة الحموضة 7.5) من 20٪ أسيتونيتريل و 10 ملي مولار (4-(2-هيدروكسي إيثيل) -1-بيبرازينيثان سلفونيك حمض (HEPES) في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مل ، إلى تركيز نهائي من خليط تجميع الببتيد 1 مجم / مل. دوامة محلول التجميع واتركه ليتجمع في درجة حرارة الغرفة.
  2. التوصيف الطيفي لألياف الأميلويد
    1. اتبع عملية تجميع الببتيد عبر التحليل الطيفي بالأشعة تحت الحمراء بتحويل فورييه (FTIR) كل بضعة أيام. الذروة العريضة التي تتمحور حول 1670 سم -1 هي توقيع الأشعة تحت الحمراء الناشئ عن الببتيدات غير المجمعة في العينة. عادة ما تستغرق عينات تجميع الببتيد من أسبوع إلى أسبوعين حتى تختفي الذروة العريضة غير المجمعة وتصل إلى مرحلة النضج.
      1. جفف كمية من 8-10 ميكرولتر من محلول التجميع كغشاء رقيق على بلورة الماس ATR. راقب اختفاء قمة مياه كبيرة وواسعة من 1640 إلى 1630 سم -1 حيث يتشكل الفيلم الجاف.
      2. احصل على أطياف الأشعة تحت الحمراء من 1500-1800 سم -1 بمتوسط 50 عملية مسح بدقة 2 سم -1. احصل على عمليات مسح الخلفية وطرحها قبل كل مسح عينة. توقيع الأشعة تحت الحمراء لتجميع β الألواح هو ذروة حادة بين 1625 و 1635 سم -1 (الشكل 1 أ).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

p class = "jove_content" fo: keep-together.within-page = "1" >أطياف FTIR 1627/1676 سم ⁻ ¹ (أ) ، طيف القرص المضغوط 190-270 نانومتر (B) ، مقياس 100 نانومتر من الألياف النانوية TEM (C).
الشكل 1. التوصيف فوق الجزيئي للببتيد المعدل 1،2-ديثيولان. (أ) FT-IR من 1 مجم / مل 1،2-dithiolane-KLVFAQ-NH2 ألياف مجمعة في 10 ملي مولار هيبس ، درجة الحموضة 7.5 في 20٪ CH3CN. تتوافق الذروة عند 1627 سم

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
لم يتم الإعلان عن تضارب في المصالح.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
أسيتونيتريلفيشر العلميA998-4قابل للاشتعال. مزعج للعيون. استخدام معدات الحماية الشخصية ؛ استخدم فقط تحت غطاء الدخان ؛ الابتعاد عن اللهب المكشوف أو السطح الساخن. في حالة الاتصال ، اشطفها بالماء لمدة 15 دقيقة على الأقل واحصل على عناية طبية
4- (2-هيدروكسي إيثيل) بيبيرازين -1-حمض إيثان سلفونيكأكروس أورجانكسAC172571000لا تستنشق ؛ استخدم في الهواء الطلق أو في منطقة جيدة التهوية
مطياف الأشعة تحت الحمراء فورييهألفا تينسور ، بروكر
تحويل

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

ATR

مقالات ذات صلة