استئصال ورم الدماغ في الفأر باستخدام نظام استئصال طفيف التوغل

الملخص

المصدر: Alomari، S.، et al. تنفيذ استئصال أورام المخ طفيفة التوغل في القوارض لجمع الأنسجة عالية الجدوى. J. Vis. Exp. (2022)

يوضح هذا الفيديو استخدام نظام الاستئصال طفيف التوغل (MIRS) لاستئصال أنسجة الورم من فأر مخدر مزروع بورم. يتضمن الإجراء تثبيت الماوس على إطار تجسيمي ، وإعادة فتح موقع الجراحة السابق للوصول إلى الدماغ ، وإدخال قنية متخصصة تستخدم الشفط وشفرة دوارة لإزالة أقسام الورم. بعد الاستئصال ، يتم جمع الأنسجة المستأصلة من خلال أنابيب معقمة ، ويتم إغلاق الجرح للسماح بالشفاء.

البروتوكول

تمت مراجعة جميع الإجراءات التي تنطوي على نماذج حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية المحلية لرعاية ومجلس المراجعة البيطرية JoVE.

1. زرع الورم الأولي داخل الجمجمة

1. في المرحلة الأولى من الدراسة ، قم بحقن كل فأر داخل الجمجمة ب 100,000 خلية (خط خلايا الورم الدبقي الفأري GL261) معلقة في 4 ميكرولتر من المحلول الملحي المخزن بالفوسفات (1x PBS) على عمق 2.5 مم بعد التقرير المنشور سابقا.
2. حدد إشارة الورم في كل فأر باستخدام نظام التصوير في الجسم الحي بعد 9 أيام من زرع الورم.
   ملاحظة: إذا لزم الأمر ، قم بتقسيم الفئران إلى مجموعتين بناء على عبء الورم. في هذه الدراسة ، كانت المجموعتان هما: (1) الفئران ذات عبء الورم الصغير نسبيا (متوسط إشارة ا....

النتائج

فئة الشكل = 'image image-style-align-center image_resized' style = 'display: table ؛ margin-left: auto ؛ margin-right: auto ؛ width: 75٪ ؛ '>

الشكل 1: إعداد نظام MERS. (أ) نظام الاستئصال طفيف التوغل (MIRS) لورم المخ في نماذج القوارض ذات الأنسجة المدمجة نظام الحفظ. (ب) اللوحة الأمامية لوحدة التحكم MIRS. 1 = قوة النظام ، 2 = دواسة ا.......

المواد

<فئة الشكل = 'الجدول'><فئة الجدول = 'ck-table-resize'>قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة الاسم الشركة رقم فهرسي التعليقات Anased (Injection Xylazine, 100 mg / mL)Covetrus33198 نظام التخديرباترسون Scientific78935903 حاوية نفايات غاز التخديرباترسون Scientific78909457 C57Bl / 6 ، الفئران البالغة من العمر 6-8 أسابيعكود سلالة مختبرات نهر تشارلز027 IsofluraneCovetrus11695-6777-2 Isoflurane Vaporizerباترسون Scientific78916954 KetamineCovetrus11695-0703-1 Kopf الإطار التجسيميKopf Instruments5001 Lightfield المجهرBioTekCytation 5 وحدة الحقن الدقيقKopf5001 مثقاب المحرك الدقيقForedomF210418 نظام التصوير بالرنين المغناطيسيBruker7T Biospec Avance III ماسح التصوير بالرنين المغناطيسي NICO نظام لا يحصىNICO شركة مرهم العيونPuralube مرهم بيطري غراءسيجما ألدريتش #P4762 PBSInvitrogen # 14190250 PenStrepMillipore SigmaN1638 حل PercollSigma Aldrich #P4937 تحكم الماصةFalconA07260 محلول بوفيدون اليودAplicare52380-1905-08 RPMI MediaInvitrogenINV-72400120 شفرة مشرطCovetrus7319 مقبض مشرطأدوات العلومالدقيقة 91003-12 مهلة علامة الجلدD538،851مزيل الدبابيسMikRonACR9MM دباسةMikRonACA9MM دبابيسكلاي آدامز427631 الإطار التجسيميKopfInstruments 5000 السكروزسيجما ألدريتشS9378 خياطة ، فيكريل 4-0إيثيكونJ494H